Luận án tiến sĩ HUS nghiên cứu hoàn thiện bộ kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang ứng dụng trong nghiên cứu dân tộc học và giám định AND

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN TRỌNG HỘI NGHIÊN CỨU HOÀN THIỆN BỘ KIT PCR 16 LOCUS GẮN HUỲNH QUANG ỨNG DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU DÂN TỘC HỌC VÀ GIÁM ĐỊNH ADN LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội - 2017 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN TRỌNG HỘI NGHIÊN CỨU HOÀN THIỆN BỘ KIT PCR 16 LOCUS GẮN HUỲNH QUANG ỨNG DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU DÂN TỘC HỌC VÀ GIÁM ĐỊNH ADN Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 62 42 01 21 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Trịnh Đình Đạt PGS.TS Nguyễn Văn Hà Hà Nội - 2017 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan tất kết nghiên cứu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Nếu sai tơi xin chịu trách nhiệm hoàn toàn Tác giả Trần Trọng Hội LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Luận án hoàn thành Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, tơi xin chân thành cảm ơn: PGS.TS Trịnh Đình Đạt, Bộ môn Di truyền học, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi q trình hồn thành luận án PGS.TS Nguyễn Văn Hà, Trung tâm Giám định Sinh học pháp lý, Viện Khoa học Hình sự, Tổng cục Cảnh sát, Bộ Cơng an tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi q trình hoàn thành luận án PGS.TS Phạm Đăng Khoa ThS Hồ Quang Huy, Bộ môn Sinh lý bệnh-Miễn dịch, Trường Đại học Y Hà Nội giúp đỡ q trình hồn thành luận án Các đồng chí Lãnh đạo cán thuộc Phòng 4, Cục A67, Bộ Cơng an Phịng PC54, CATP Hải Phịng giúp đỡ tơi q trình hồn thành luận án ThS Trần Minh Đôn ThS Lương Thị Yến, Viện H57, Tổng cục IV, Bộ Công an giúp đỡ đóng góp ý kiến q báu cho tơi q trình hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Nguyễn Thị Hồng Vân tập thể cán bộ, giảng viên Bộ môn Di truyền học, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Lãnh đạo Viện H57, ủng hộ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình hồn thành luận án Cuối xin gửi lời cảm ơn tới toàn thể cán Phòng Kỹ thuật Sinh học nghiệp vụ, Viện H57 gia đình, bạn bè ln bên tơi, quan tâm, động viên tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Tác giả luận án LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Các thị di truyền sử dụng nghiên cứu di truyền quần thể giám định ADN hình 1.1.1 Chỉ thị di truyền trình tự ADN lặp lại 1.1.2 Các kiểu lặp lại locus STR 1.1.3 Các locus STR sử dụng nghiên cứu di truyền quần thể giám định ADN hình 1.1.4 Đặc điểm chung locus STR sử dụng giới 1.1.4.1 Giai đoạn phát triển sớm 1.1.4.2 Bộ CODIS 13 locus STR lõi (13 CODIS Core STR Loci) 1.1.4.3 Bộ locus STR chuẩn cho người châu Âu ESS 1.1.4.4 Locus Amelogenin dùng để xác định giới tính 1.1.4.5 Bộ locus STR NST giới tính Y (Y-STR) 1.1.4.6 Bộ locus STR NST giới tính X (X-STR) 1.1.4.7 Một số kit STR thương mại sử dụng phổ biến nghiên cứu di truyền quần thể giám định ADN hình 1.1.4.8 Một số loại thị di truyền khác sử dụng giám định ADN hình a) Chỉ thị di truyền đa hình đơn nucleotide (SNP) b) Chỉ thị di truyền ADN ty thể (mtDNA) 1.2 Các công nghệ phân tích STR sử dụng khoa học hình 1.2.1 Điện di gel polyacrylamide biến tính-nhuộm bạc 1.2.2 Đánh dấu huỳnh quang - điện di mao quản CE 1.2.3 Điện di mao quản vi mạch sử dụng microchip Trang 11 15 15 15 16 17 20 21 21 24 24 25 26 26 28 28 29 29 29 30 35 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 1.2.4 Cơng nghệ phân tích khối phổ (mass spectrometry) 1.2.5 Cơng nghệ pyrosequencing (giải trình tự tổng hợp) 1.3 Tổng quan tình hình nghiên cứu ứng dụng locus STR nghiên cứu di truyền quần thể giám định ADN hình 1.3.1 Trên giới 1.3.2 Ở Việt Nam 1.4 Tổng quan dân tộc Việt Nam 1.4.1 Các dân tộc Việt Nam 1.4.2 Ba dân tộc nghiên cứu 1.4.2.1 Người Kinh 1.4.2.2 Người Mường 1.4.2.3 Người Khmer 1.5 Luận giải vấn đề nghiên cứu luận án CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng, vật liệu, hóa chất trang thiết bị nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1.1 Nguồn mẫu sử dụng cho nghiên cứu 2.1.1.2 Bộ 16 locus nghiên cứu 2.1.2 Hóa chất, vật liệu trang thiết bị 2.1.2.1 Hóa chất vật liệu 2.1.2.2 Trang thiết bị 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Các phương pháp sinh học phân tử 2.2.1.1 Tách chiết ADN hệ gen người Chelex 2.2.1.2 Tách chiết ADN hệ gen người phương pháp “salting out” 2.2.1.3 Tách chiết ADN hệ gen người từ mẫu xương kit DNA IQ Systems 2.2.1.4 Định lượng ADN máy quang phổ Nanodrop 2.2.1.5 Phương pháp lựa chọn điều kiện PCR đa mồi 2.2.1.6 Phương pháp xây dựng thang alen PCR đa mồi 2.2.1.7 Phương pháp chế tạo kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang phân tích hệ thống điện di mao quản 36 36 37 37 41 42 42 44 44 45 46 46 52 52 52 52 53 54 54 59 59 61 61 61 62 62 62 63 64 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 2.2.1.8 Phương pháp PCR sử dụng kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 2.2.1.9 Kỹ thuật điện di mao quản hệ thống máy 3130 Gentic Analyzer 2.2.2 Các phương pháp tin sinh học xử lý số liệu phần mềm 2.2.2.1 Kiểm tra mồi phần mềm FastPCR, OligoAnalyzer BLAST 2.2.2.2 Phân tích kiểu gen phần mềm GeneMapper® ID 2.2.2.3 Xử lý liệu thống kê phần mềm EasyDNA_PopuData 2.2.2.4 Xây dựng phát sinh chủng loại phần mềm POPTREE 2.2.3 Xây dựng thẻ ADN cá nhân thử nghiệm cho 1.000 đối tượng có nguy rủi ro cao CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 3.1 Kết nghiên cứu hoàn thiện kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang phân tích hệ thống điện di mao quản 3.1.1 Kết lựa chọn điều kiện PCR đa mồi cho 16 cặp mồi gắn huỳnh quang 3.1.2 Kết xây dựng thang alen cho 16 locus nghiên cứu 3.1.3 Kết chế tạo kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.1.3.1 Thành phần kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.1.3.2 Kết thử nghiệm, đánh giá kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang hai PTN giám định ADN Việt Nam 3.1.3.3 Kết kiểm tra thời hạn sử dụng kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang PTN 3.1.3.4 Chi phí mua nguyên vật liệu để chế tạo kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.2 Kết ứng dụng kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang nghiên cứu di truyền quần thể tộc người phổ biến Việt Nam 3.2.1 Khảo sát TSAL 15 locus STR NST thường tộc người phổ biến Việt Nam (Kinh, Mường Khmer) 3.2.1.1 Số lượng mẫu sử dụng nghiên cứu 3.2.1.2 Các số thống kê nhận dạng cá thể người 66 67 67 67 68 68 68 70 69 71 71 73 75 76 78 81 82 84 84 88 88 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 3.2.1.3 Sự phân bố tần số alen 15 locus STR nghiên cứu 3.2.2 Mối quan hệ di truyền quần thể nghiên cứu với 14 quần thể tham khảo 3.3 Kết ứng dụng kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang giám định ADN Việt Nam 3.3.1 Phân tích số loại mẫu sinh phẩm thu trường số vụ án hình kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.3.2 Phân tích số loại dấu vết ADN thu từ 10 đối tượng cần KSAN kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.3.3 Xây dựng thẻ ADN cá nhân thử nghiệm cho 1.000 đối tượng có nguy rủi ro cao kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.4 Bàn luận kết nghiên cứu 3.4.1 Nghiên cứu hoàn thiện kit PCR 16 locus gắn huỳnh hệ thống điện di mao quản 3.4.2 Ứng dụng kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang nghiên cứu di truyền quần thể tộc người phổ biến Việt Nam (Kinh, Mường Khmer) 3.4.3 Ứng dụng kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang giám định ADN Việt Nam KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Kiến nghị DANH MỤC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN TỚI LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt II Tài liệu tiếng Anh III Nguồn CSDL trực tuyến PHỤ LỤC 91 108 111 111 116 121 122 122 124 128 131 131 132 133 134 134 136 147 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt ADN BLAST bp BC CCD CE CI CMI CODIS CRS CSDL DCR diH2O dNTP ĐT ESS FBI FL FSS HPLC ILS 600 Interpol KSAN JOE Nghĩa tiếng Anh Nghĩa tiếng Việt Deoxyribonucleic acid Axít deoxyribo nucleic Basic Local Alignment Searh Công cụ so sánh mức độ tương đồng Tool trình tự nucleotide/axit amin trực tuyến NCBI Base pair Cặp base Toothbrush Bàn chải đánh Charged-Coupled Device Thiết bị tích điện kép CCD Capillary electrophoresis Điện di mao quản Confidence Interval Khoảng tin cậy Combined Marternity Index Chỉ số quan hệ huyết thống mẹ-con kết hợp Combined DNA Index Hệ thống số ADN kết hợp (FBI, Mỹ) System Cambridge Reference Trình tự tham khảo Cambridge Sequence Database Cơ sở liệu Shave Dao cạo râu Nuclease-free water Nước deion khơng có nuclease 2’-deoxyribonucleoside 5’2’-deoxyribonucleoside 5’-triphosphate triphosphate Đối tượng European Standard Set Bộ locus chuẩn châu Âu Federal Bureau of Cục Điều tra Liên bang Mỹ Investigation Fluorescein Chất nhuộm huỳnh quang FL Forensic Science Service Sở Dịch vụ Khoa học Hình (Anh) High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao Chromatography Internal Lane Standard 600 Kích thước ADN chuẩn 600 bp International Criminal Police Tổ chức Cảnh sát Hình Quốc tế Organization Security Control Kiểm soát an ninh 6-carboxy-4’, 5’dichloro-2’, Chất nhuộm huỳnh quang JOE 7’-dimethoxyfluorescein LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MI mtDNA mtGenome NCBI NCS NIST NST OH PCR PD PE PI PTN rCRS RFLP SNP STR TB TL Tm TSAL TMR KHHS VNTR Marternity Index mitochondrial DNA mitochondrial DNA genome National Center for Biotechnology Information Research student National Institute of Standards and Technology Chromosome Straws for drinking water Polymerase Chain Reaction Power of Discrimination Probability of Exclusion Paternity Index Laboratory revised Cambridge Reference Sequence Restriction Fragment Length Polymorphism Single Nucleotide Polymorphism Short Tandem Repeat Swabs Chỉ số quan hệ huyết thống mẹ-con ADN ty thể Hệ gen ty thể Trung tâm thông tin Công nghệ sinh học (Mỹ) Nghiên cứu sinh Viện Quốc gia Tiêu chuẩn Cơng nghệ (Mỹ) Nhiễm sắc thể Ớng hút dùng để uống nước Phản ứng chuỗi trùng hợp Khả phân biệt Khả loại trừ Chỉ số quan hệ huyết thống cha-con Phịng thí nghiệm Trình tự tham khảo Cambridge sửa đổi Đa hình chiều dài đoạn giới hạn Đa hình đơn nucleotide Trình tự ngắn lặp lại liên tiếp Tăm dùng để thu mẫu miệng cốcchén Cigarette butts Đầu mẩu thuốc Melting Temperature Nhiệt độ nóng chảy mồi Allele frequencies Tần số alen TAMRA Chất nhuộm huỳnh quang TMR Forensic Science Khoa học Hình Variable Number of Tandem Trình tự lặp lại liên tục có số lượng thay Repeats đổi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ MgCl2 mM Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ MgCl2 1,25 mM Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ MgCl2 1,5 mM Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ MgCl2 1,5 mM Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ MgCl2 1,75 mM Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ MgCl2 2,0 mM Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ MgCl2 2,5 mM Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ MgCl2 3,0 mM (PL1.3.2) 155 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ MgCl2 mM Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ MgCl2 1,25 mM Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ MgCl2 1,5 mM Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ MgCl2 1,5 mM Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ MgCl2 1,75 mM Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ MgCl2 2,0 mM Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ MgCl2 2,5 mM Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ MgCl2 3,0 mM (PL1.3.3) Hình PL.1.3 Kết lựa chọn nồng độ MgCl2 tham gia phản ứng PCR đa mồi cho 16 cặp mồi nghiên cứu (PL1.3.1): Nhóm mồi FL (D3S1358, TH01, D21S11, D18S11 PentaE) với dải nồng độ từ đến 3,0mM (PL1.3.2): Nhóm mồi JOE (D5S818, D13S313, D7S820, D16S359, CSF1PO, Penta D) với dải nồng độ từ đến 3,0mM (PL1.3.3): Nhóm mồi TMR (Amelogenin, vWA, D8S1179, TPOX FGA) với dải nồng độ đến 3,0mM 156 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ enzyme GoTaq unit Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ enzyme GoTaq 2,0 unit Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ enzyme GoTaq 2,5 unit Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ enzyme GoTaq 3,0 unit Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ enzyme GoTaq 3,0 unit Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ enzyme GoTaq 3,5 unit Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ enzyme GoTaq 4,0 unit (PL1.4.1) 157 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ enzyme GoTaq unit Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ enzyme GoTaq 2,0 unit Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ enzyme GoTaq 2,5 unit Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ enzyme GoTaq 3,0 unit Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ enzyme GoTaq 3,0 unit Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ enzyme GoTaq 3,5 unit Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ enzyme GoTaq 4,0 unit (PL1.4.2) 158 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ enzyme GoTaq unit Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ enzyme GoTaq 2,0 unit Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ enzyme GoTaq 2,5 unit Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ enzyme GoTaq 3,0 unit Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ enzyme GoTaq 3,0 unit Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ enzyme GoTaq 3,5 unit Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ enzyme GoTaq 4,0 unit (PL1.4.3) Hình PL1.4 Kết lựa chọn nồng độ enzym GoTaq tham gia phản ứng PCR đa mồi cho 16 cặp mồi nghiên cứu (PL1.4.1): Nhóm mồi FL (D3S1358, TH01, D21S11, D18S11 PentaE) với dải nồng độ từ đến 4,0 units (PL1.4.2): Nhóm mồi JOE (D5S818, D13S313, D7S820, D16S359, CSF1PO, Penta D) với dải nồng độ từ đến 4,0 units (PL1.4.3): Nhóm mồi TMR (Amelogenin, vWA, D8S1179, TPOX FGA) với dải nồng độ đến 4,0 units 159 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ ADN khuôn (9947A) ng Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ ADN khuôn (9947A) 0,2 ng Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ ADN khuôn (9947A) 0,5 ng Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ ADN khuôn (9947A) 1,0ng Kiểu gen locus gắn màu FL nồng độ ADN khuôn (9947A) 2,0ng Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ ADN khuôn (9947A) ng Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ ADN khuôn (9947A) 0,2 ng Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ ADN khuôn (9947A) 0,5 ng Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ ADN khuôn (9947A) 1,0ng Kiểu gen locus gắn màu JOE nồng độ ADN khuôn (9947A) 2,0ng Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ ADN khuôn (9947A) ng Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ ADN khuôn (9947A) 0,2 ng Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ ADN khuôn (9947A) 0,5 ng Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ ADN khuôn (9947A) 1,0ng Kiểu gen locus gắn màu TMR nồng độ ADN khn (9947A) 2,0ng Hình PL1.5 Kết lựa chọn nồng độ ADN khuôn (9947A) tham gia phản ứng PCR đa mồi cho 16 cặp mồi nghiên cứu 160 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PHỤ LỤC 2B KẾT QUẢ KIỂM TRA HẠN SỬ DỤNG CỦA BỘ KIT PCR 16 LOCUS GẮN HUỲNH QUANG SAU 12 THÁNG BẢO QUẢN Ở -20oC TẠI PTN Thang alen locus gắn màu FL Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu ADN_01 Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu ADN_02 Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu ADN_03 Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu ADN_04 Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu ADN_05 Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu đối chứng dương (9947A) Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu đối chứng âm (H2O) (PL2B.1) 161 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thang alen locus gắn màu JOE Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu ADN_01 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu ADN_02 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu ADN_03 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu ADN_04 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu ADN_05 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu đối chứng dương (9947A) Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu đối chứng âm (H2O) (PL2B.2) 162 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thang alen locus gắn màu TMR Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu ADN_01 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu ADN_02 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu ADN_03 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu ADN_04 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu ADN_05 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu đối chứng dương (9947A) Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu đối chứng âm (H2O) (PL2B.3) 163 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PHỤ LỤC MỘT SỐ KẾT QUẢ KHẢO SÁT KIỂU GEN 16 LOCUS Ở TỘC NGƯỜI PHỔ BIẾN Ở VIỆT NAM (KINH, MƯỜNG VÀ KHMER) Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu GC_ 206 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu GC_ 206 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu GC_ 206 (PL3.1) Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu GC_ 208 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu GC_ 208 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu GC_ 208 (PL3.2) 164 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu MUO_ 0625 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu MUO_ 0625 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu MUO_ 0625 Kích thước ADN chuẩn ILS 600 gắn màu CXR (PL3.3) Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu MUO_ 0825 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu MUO_ 0825 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu MUO_ 0825 Kích thước ADN chuẩn ILS 600 gắn màu CXR (PL3.4) 165 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu KHM_ 020 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu KHM_ 020 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu KHM_ 020 Kích thước ADN chuẩn ILS 600 gắn màu CXR (PL3.5) Kiểu gen locus gắn màu FL mẫu KHM_ 022 Kiểu gen locus gắn màu JOE mẫu KHM_ 022 Kiểu gen locus gắn màu TMR mẫu KHM_ 022 Kích thước ADN chuẩn ILS 600 gắn màu CXR (PL3.6) 166 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PHỤ LỤC KẾT QUẢ PHÂN TÍCH MỘT SỐ LOẠI DẤU VẾT ADN THU ĐƯỢC CỦA 10 ĐỐI TƯỢNG CẦN KIỂM SOÁT AN NINH BẰNG BỘ KIT PCR 16 LOCUS GẮN HUỲNH QUANG Thang alen locus gắn màu FL Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ dao cạo râu đối tượng số 01 (ĐT_01_DCR) Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ ống hút nước đối tượng số 01 (ĐT_01_OH) Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 01 (ĐT_01_TL) Thang alen locus gắn màu JOE Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ dao cạo râu đối tượng số 01 (ĐT_01_DCR) Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ ống hút nước đối tượng số 01 (ĐT_01_OH) Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 01 (ĐT_01_TL) Thang alen locus gắn màu TMR Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ dao cạo râu đối tượng số 01 (ĐT_01_DCR) Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ ống hút nước đối tượng số 01 (ĐT_01_OH) Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 01 (ĐT_01_TL) Hình PL6.1 Kết phân tích ADN từ số loại dấu vết ADN thu từ đối tượng cần kiểm soát an ninh số 01 kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 167 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ miệng cốc uống nước đối tượng số 05 (ĐT_05_TB) Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ bàn chải đánh đối tượng số 05 (ĐT_05_BC) Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ ống hút nước đối tượng số 05 (ĐT_05_OH) Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 05 (ĐT_05_TL) Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ miệng cốc uống nước đối tượng số 05 (ĐT_05_TB) Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ bàn chải đánh đối tượng số 05 (ĐT_05_BC) Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ ống hút nước đối tượng số 05 (ĐT_05_OH) Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 05 (ĐT_05_TL) Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ miệng cốc uống nước đối tượng số 05 (ĐT_05_TB) Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ bàn chải đánh đối tượng số 05 (ĐT_05_BC) Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ ống hút nước đối tượng số 05 (ĐT_05_OH) Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 05 (ĐT_05_TL) Hình PL6.2 Kết phân tích ADN từ số loại dấu vết ADN thu từ đối tượng 05 cần kiểm soát an ninh kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 168 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thang alen locus gắn màu FL Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ dao cạo râu đối tượng số 09 (ĐT_09_DCR) Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 09 (ĐT_09_TL) Kiểu gen locus gắn màu FL thu từ miệng cốc uống nước đối tượng số 05 (ĐT_05_TL) Thang alen locus gắn màu JOE Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ dao cạo râu đối tượng số 09 (ĐT_09_DCR) Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 09 (ĐT_09_TL) Kiểu gen locus gắn màu JOE thu từ miệng cốc uống nước đối tượng số 05 (ĐT_05_TL) Thang alen locus gắn màu TMR Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ dao cạo râu đối tượng số 09 (ĐT_09_DCR) Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ đầu mẩu thuốc đối tượng số 09 (ĐT_09_TL) Kiểu gen locus gắn màu TMR thu từ miệng cốc uống nước đối tượng số 05 (ĐT_05_TL) Hình PL6.3 Kết phân tích ADN từ số loại dấu vết ADN thu từ đối tượng số 09 cần kiểm soát an ninh kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 169 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.4 Bàn luận kết nghiên cứu 3.4.1 Nghiên cứu hoàn thiện kit PCR 16 locus gắn huỳnh hệ thống điện di mao quản 3.4.2 Ứng dụng kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang nghiên. .. TRỌNG HỘI NGHIÊN CỨU HOÀN THIỆN BỘ KIT PCR 16 LOCUS GẮN HUỲNH QUANG ỨNG DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU DÂN TỘC HỌC VÀ GIÁM ĐỊNH ADN Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 62 42 01 21 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC... cho 16 locus nghiên cứu 3.1.3 Kết chế tạo kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.1.3.1 Thành phần kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang 3.1.3.2 Kết thử nghiệm, đánh giá kit PCR 16 locus gắn huỳnh quang