TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI BÀO CHẾ BỘT DƯỢC LIỆU CÓ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA TỪ QUẢ SƠ RI (FRUCTUS MALPIGHIAE EMARGINATAE) ĐỖ NGUYỄN DIỆU QUỲNH NHƯ ĐỒNG NAI TH[.]
TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI BÀO CHẾ BỘT DƯỢC LIỆU CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA TỪ QUẢ SƠ RI (FRUCTUS MALPIGHIAE EMARGINATAE) ĐỖ NGUYỄN DIỆU QUỲNH NHƯ ĐỒNG NAI - THÁNG 07/2022 TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI BÀO CHẾ BỘT DƯỢC LIỆU CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA TỪ QUẢ SƠ RI (FRUCTUS MALPIGHIAE EMARGINATAE) Sinh viên thực hiện: Đỗ Nguyễn Diệu Quỳnh Như Giảng viên hướng dẫn: ThS Ngơ Văn Cường ĐỒNG NAI – THÁNG 07/2022 i TĨM TẮT BÀO CHẾ BỘT DƯỢC LIỆU CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA TỪ QUẢ SƠ RI (FRUCTUS MALPIGHIAE EMARGINATAE) ĐỖ NGUYỄN DIỆU QUỲNH NHƯ Người hướng dẫn: TH.S NGÔ VĂN CƯỜNG Mở đầu: Vitamin C phổ biến đặc tính chống oxy hóa Ngồi ra, cịn đóng vai trị hoạt động sinh lý trao đổi chất thiết yếu người Tuy nhiên, người thu nạp vitamin C thông qua chế độ ăn uống (đặc biệt từ trái cây, rau củ) Trong đó, Sơ ri - loại trái phổ biến có chứa lượng vitamin C nhiều Sơ ri sử dụng nguồn cung cấp vitamin C tiềm lĩnh vực y học cần phát huy Tuy nhiên chưa có nhiều nghiên cứu nước Sơ ri, đề tài thực nhằm xây dựng quy trình định lượng vitamin C cao, đồng thời bào chế bột Sơ ri tạo điều kiện phát triển chế phẩm mang giá trị dinh dưỡng thuận lợi trình bảo quản, vận chuyển Đối tượng: Quả Sơ ri (Fructus Malpighiae emarginatae) thu mua Bến Tre Phương pháp nghiên cứu: Chiết kiểm nghiệm cao Sơ ri với tiêu: cảm quan, độ ẩm, độ tro, xây dựng quy trình định lượng vitamin C cao phương pháp HPLC Xác định hoạt tính chống oxy hóa cao Sơ ri phương pháp DPPH Nghiên cứu, lựa chọn tá dược, điều chế bột Sơ ri Kết bàn luận: Chiết kiểm nghiệm cao Sơ ri với tiêu: cảm quan, độ ẩm, độ tro, xây dựng quy trình định lượng vitamin C cao phương pháp HPLC: Chiết xuất: Phương pháp ép lấy dịch, bỏ bã dùng để chiết vitamin C cao Kiểm nghiệm cao: Thu cao có màu vàng nâu, mùi thơm, vị chua nhẹ, độ ẩm độ tro 26,38 6,58% ii Hàm lượng vitamin C cao khoảng 6,305-6,374% Quy trình định lượng đạt tính tương thích hệ thống, tính đặc hiệu, khoảng tuyến tính 8-80 mcg/ml, độ lặp lại, độ xác trung gian độ Xác định hoạt tính chống oxy hóa cao Sơ ri phương pháp DPPH: Mẫu cao thử có hoạt tính chống oxy hóa thấp mẫu vitamin C chuẩn 13 lần Nghiên cứu, lựa chọn tá dược, điều chế bột Sơ ri: Lựa chọn loại tá dược: mannitol, aerosil với tỷ lệ bào chế cao - mannitol - aerosil 1:4,5:0,5 iii MỤC LỤC TÓM TẮT i MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii DANH MỤC SƠ ĐỒ ix LỜI CẢM ƠN .x CHƯƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN .3 2.1 TỔNG QUAN VỀ SƠ RI 2.1.1 Mô tả thực vật 2.1.2 Phân bố, sinh thái 2.1.3 Thành phần hóa học 2.1.4 Tác dụng dược lý .7 2.1.5 Chế phẩm bột sơ ri nước 2.2 TỔNG QUAN VỀ VITAMIN C 2.2.1 Tính chất lý hóa 2.2.2 Công dụng 2.2.3 Một vài phương pháp chiết xuất vitamin C 10 2.3 TỔNG QUAN VỀ TÁ DƯỢC .12 2.3.1 Lactose 12 2.3.2 Tinh bột 12 2.3.3 Cellulose vi tinh thể (Avicel) 12 2.3.4 Aerosil .13 iv 2.3.5 Magiê stearat 13 2.3.6 Talc 13 2.3.7 Canxi silicat .14 2.3.8 Mannitol 14 2.4 TỔNG QUAN VỀ QUY TRÌNH THẨM ĐỊNH 14 2.4.1 Tính tương thích hệ thống (System Suitability Testing) 14 2.4.2 Tính đặc hiệu (Specificity) 15 2.4.3 Khoảng tuyến tính (Linearity) .15 2.4.4 Độ lăp lại (Repeatability) 15 2.4.5 Độ xác trung gian (Intermediate precision) 15 2.4.6 Độ (Accuracy) 16 2.5 TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP DPPH ĐỂ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA .16 CHƯƠNG 3: ĐỐI TƯỢNG – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU .18 3.1.1 Dược liệu nghiên cứu 18 3.1.2 Dụng cụ thiết bị nghiên cứu .18 3.1.3 Hóa chất thuốc thử sử dụng 18 3.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.2.1 Định danh dược liệu phương pháp ADN .19 3.2.2 Chiết xuất 19 3.2.3 Kiểm nghiệm cao 19 3.2.4 Xác định tính chống oxy hóa cao Sơ ri 24 3.2.5 Bào chế bột từ cao Sơ ri 25 v CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 26 4.1 KẾT QUẢ 26 4.1.1 Định danh dược liệu 26 4.1.2 Chiết xuất 27 4.1.3 Kiểm nghiệm cao 28 4.1.4 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa 35 4.1.5 Bào chế bột từ cao sơ ri 37 4.2 BÀN LUẬN 39 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 42 5.1 KẾT LUẬN 42 5.2 ĐỀ NGHỊ .42 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT .44 TÀI LIỆU TIẾNG ANH .45 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Tiếng Anh Tiếng Việt AA Acid ascorbic Vitamin C Abs Absorbance Độ hấp thu As Symmetry Hệ số đối xứng HPLC High-performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao HTCO Hoạt tính chống oxy hóa kl/tt Khối lượng/thể tích MDR Multi Drug Resistant Đa kháng thuốc MPA Metaphosphoric acid Acid metaphosphoric N Theoretical plates Số đĩa lý thuyết NMR Nuclear Magnetic Resonance Cộng hưởng từ hạt nhân OPA Orthophosphoric acid RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn TR Retention Time Thời gian lưu UV Ultra violet Tử ngoại Acid orthorphosphoric (acid phosphoric) vii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Giá trị dinh dưỡng Sơ ri Bảng 3.1 Pha dung dịch khảo sát khoảng tuyến tính 22 Bảng 3.2 Pha dung dịch khảo sát độ 23 Bảng 3.3 Cách pha mẫu đo phương pháp DPPH 24 Bảng 3.4 Tỷ lệ tá dược điều chế bột Sơ ri 25 Bảng 4.1 Mức độ tương đồng mẫu BLAST NCBI 26 Bảng 4.2 Kết xác định độ ẩm cao 29 Bảng 4.3 Kết xác định độ tro cao 29 Bảng 4.4 Kết xác định tính tương thích hệ thống 29 Bảng 4.5 Thông số sắc ký mẫu chuẩn vitamin C mẫu thử 30 Bảng 4.6 Kết xác định phương trình hồi quy hệ số tuyến tính 31 Bảng 4.7 Kết xác định độ lặp lại mẫu thử 32 Bảng 4.8 Kết phân tích độ xác trung gian mẫu thử 33 Bảng 4.9 Kết xác định độ 34 Bảng 4.10 Kết thử nghiệm IC50 phương pháp DPPH cao 35 Bảng 4.11 Kết thử nghiệm IC50 phương pháp DPPH vitamin C chuẩn 36 Bảng 4.12 Kết khảo sát tá dược điều chế bột 37 viii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Các sản phẩm bột Sơ ri thị trường quốc tế Hình 2.2 Các sản phẩm bột Sơ ri thị trường Việt Nam Hình 2.3 Cơng thức phân tử vitamin C Hình 2.4 Cơng thức phân tử DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 16 Hình 2.5 Phản ứng trung hịa gốc DPPH 16 Hình 3.1 Quả Sơ ri tươi 18 Hình 3.2 Quy trình nghiên cứu dược liệu Sơ ri 19 Hình 4.1 Kết sắc ký đồ dịch ép tươi Sơ ri 27 Hình 4.2 Kết sắc ký đồ bã xanh dịch ép tươi Sơ ri 28 Hình 4.3 Cao Sơ ri thu 28 Hình 4.4 Phổ UV-Vis biểu đồ minh họa độ tinh khiết pic vitamin C mẫu chuẩn (1) mẫu thử cao Sơ ri (2) 30 Hình 4.5 Sắc ký đồ tính đặc hiệu với mẫu chuẩn, mẫu thử, mẫu thử thêm chuẩn mẫu trắng 30 Hình 4.6 Đường biểu diễn tương quan tuyến tính nồng độ diện tích pic 31 Hình 4.7 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc HTCO (%) theo nồng độ cao khảo sát 35 Hình 4.8 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc HTCO (%) theo nồng độ vitamin C chuẩn 36 Hình 4.9 Giá trị IC50 hoạt tính bắt gốc tự DPPH 37 Hình 4.10 Các mẫu bột thu sau trộn tá dược 38 Hình 4.11 Quả Sơ ri tươi sau sấy khô phương pháp sấy đông khô (1) phương pháp sấy thường (2) 39 ... lợi trình bảo quản, vận chuyển Tuy nhiên chưa có cơng trình báo cáo cách thực bào chế bột Sơ ri, đề tài ? ?Bào chế bột dược liệu có hoạt tính chống oxy hóa từ Sơ ri (Fructus Malpighiae emarginatae)? ??... TẮT BÀO CHẾ BỘT DƯỢC LIỆU CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA TỪ QUẢ SƠ RI (FRUCTUS MALPIGHIAE EMARGINATAE) ĐỖ NGUYỄN DIỆU QUỲNH NHƯ Người hướng dẫn: TH.S NGÔ VĂN CƯỜNG Mở đầu: Vitamin C phổ biến đặc tính. ..TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI BÀO CHẾ BỘT DƯỢC LIỆU CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA TỪ QUẢ SƠ RI (FRUCTUS MALPIGHIAE EMARGINATAE) Sinh viên thực hiện: Đỗ