PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI PHOSPHATE KHÓ TAN TỪ ĐẤT RỪNG XUÂN LIÊN

Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 6(79)/2017 PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI PHOSPHATE KHÓ TAN TỪ ĐẤT RỪNG XUÂN LIÊN Nguyễn Văn Giang1, Nguyễn Đức ái1 TĨM TẮT Bài báo trình bày kết tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate từ đất Vườn Quốc gia Xuân Liên Từ mẫu đất thu Vườn Quốc gia Xuân Liên, dựa hoạt tính phân giải phosphate canxi, 25 chủng vi sinh vật phân lập, chủng XL3.1 RL4 biểu hoạt tính phân giải Ca3(PO4)2 mạnh nhất, tương ứng 470,47µg/ml 459,58 µg/ml Hai chủng có khả phân giải AlPO4, FePO4, cố định N2 tổng hợp IAA Khi nuôi nhiệt độ từ 25 - 300C, pH mơi trường có nguồn carbon, nitơ thích hợp như: glucose, lactose, maltose, pepton, yeast extract KNO3, hai chủng XL3.1 RL4 phát triển tốt biểu hoạt tính phân giải phosphate cao Từ khóa: Vi sinh vật phân giải phosphate, cố định N2, tổng hợp IAA ĐẶT VẤN ĐỀ Photpho (P) nguyên tố quan trọng thứ nguyên tố dinh dưỡng đa lượng trồng (N, P, K) Photpho có tác dụng thúc đẩy phát triển tăng khả chống chịu trồng iếu photpho, hình thành tế bào bị chậm lại, cịi cọc phân cành, đẻ nhánh, có màu xanh lục bẩn, không sáng, suất trồng bị giảm sút nghiêm trọng, cung cấp đủ nitơ (Havlin et al., 1999) Tính khả dụng sinh học photpho đất bị giới hạn phosphate đất tồn chủ yếu dạng khơng hịa tan (Lowell Busman et al., 2009) Chỉ có 0,1% tổng số P khả dụng, không đủ đáp ứng cho nhu cầu trồng Để đáp ứng đầy đủ nhu cầu dinh dưỡng cho trồng, photpho thường bón vào đất dạng phân bón hóa học Q trình tổng hợp sử dụng phân bón hóa học photpho địi hỏi chi phí lớn có tác động lâu dài đến môi trường gây tượng phú dưỡng, làm tăng lượng khí thải carbon (Sharma et al., 2013) đồng thời làm chết vi sinh vật có lợi vốn tồn tự nhiên đất, phá hủy cấu trúc địa lý tự nhiên đất dẫn đến đất đai bị chai cứng, bạc màu, làm giảm suất trồng gây ảnh hưởng đến sản xuất nông nghiệp lâu dài Khai thác sử dụng vi sinh vật phân giải phosphate (Phosphate Solubilizing Microorganisms/ PSMs) xem biện pháp thân thiện với môi trường cung cấp photpho tốt cho trồng Các PSMs làm tăng lượng phosphate dễ tiêu đất mà làm tăng lượng nitơ sinh học tăng cường sẵn có nguyên tố vi lượng khác sắt, kẽm, silic, đồng… đồng thời vi sinh vật bón vào đất có khả sản sinh yếu tố thúc đẩy sinh trưởng thực vật (Kucey, 1983; Sharma et al., 2013) Một số tác Nguyễn Văn Giang cộng (2015), Trần ị Huế cộng (2015) phân lập số chủng vi khuẩn có khả phân giải phosphate khó tan từ đất trồng lúa, trồng chè Các nghiên cứu vi sinh vật phân giải phosphate khó tan từ đất rừng cịn hạn chế Vườn Quốc gia Xuân Liên thuộc Khu bảo tồn thiên nhiên Xuân Liên, nằm vùng rừng thượng nguồn sông Chu thuộc huyện ường Xn, nằm phía Tây tỉnh anh Hóa, nơi bảo tồn nhiều loại động vật, thực vật quý Đất ẩm, phủ lớp thảm mục từ lá, cành Nghiên cứu thực nhằm phân lập tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate khó tan từ đất rừng Xuân Liên, làm phong phú thêm nguồn vật liệu sản xuất chế phẩm phân bón sinh học II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Mẫu đất lấy từ Vườn Quốc gia Xuân Liên ( anh Hóa), chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate khó tan Các mơi trường sử dụng: 1/ Môi trường NBRIP (g/l): glucose 10; Ca3(PO4)2 5; MgCl2.6H2O 5; MgSO4.7H20 0,25; KCl 0,2; (NH4)2SO4 0,1, pH 7.0; 2/ Môi trường Buck’s (g/l): MgSO4 0.2; K2HPO4 0.8; KH2PO4 0.2; CaSO4 0.13, FeCl2 0.00145, Na2MoO4 0.000253; Sucrose 20; 3/ Môi trường O-CAS: Chrome azurol S (CAS) 60,5 mg, hexadecyltrimetyl amoni bromua (HDTMA) 72,9 mg, Piperazin-1,4bis (axit 2-ethanesulfonic) (PIPETS) 30,24 g, 1mM FeCl3.6H2O 10 mM HCl 10 ml Agar (0,9% w/v); 4/ Môi trường LB (g/l): pepton 10, NaCl 5, yeast extract Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam 68 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 6(79)/2017 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phân lập chủng vi sinh vật Các chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate khó tan từ mẫu đất thí nghiệm phân lập mơi trường NBRIP (Chung et al., 2005) Mẫu đất phơi khơ, nghiền mịn, pha lỗng tới nồng độ 10-6 Cấy 50 µl dịch pha lỗng đĩa Petri chứa môi trường NBRIP, đĩa ủ 300C Các chủng vi khuẩn có khả phân giải phosphate khó tan hịa tan canxi phosphate mơi trường làm cho xung quanh miền khuẩn lạc chúng có màu sáng Hoạt độ phân giải phosphate khó tan chủng vi khuẩn phân lập xác định dựa nồng độ PO43- có dịch ni cấy phương pháp xanh molybdate (Nguyễn Văn Giang cộng sự, 2015) thông qua giá trị OD đo bước sóng 820nm Mối tương quan giá trị OD nồng độ PO 43- dung dịch thể qua phương trình: Y (giá trị OD) = 0.9308x - 0.0955 với R² = 0.9924 2.2.2 Đánh giá ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy (nhiệt độ, pH, nguồn carbon, nitơ) Các chủng vi sinh vật tuyển chọn nuôi cấy môi trường NBRIP với giá trị pH thay đổi từ - 10, nhiệt độ oC, 17oC, 25oC, 30oC, 35oC, 40oC với thông số thí nghiệm có bình mơi trường khơng tiếp giống vi sinh vật làm đối chứng, điều kiện nuôi lắc nuôi tĩnh, nguồn carbon, nitơ môi trường NBRIP thay glucose, fructose, xylose, maltose, manitose, lactose, sucrose, ribose, dextrin, (NH2)2CO, (NH4)2SO4, NaNO3, KNO3, NH4NO3, NH4Cl, Pepton, Yeast extract (YE) Mơi trường khơng có cacbon nitơ đối chứng âm Sau ngày tiến hành li tâm dịch nuôi xác định hàm lượng PO43- 2.2.3 Khảo sát khả sinh IAA cố định N2 Khả sinh IAA chủng vi sinh vật thí nghiệm xác định theo Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10784:2015 khả cố định N2 - theo phương pháp mô tả Qurban cộng (2011) 2.3 ời gian địa điểm nghiên cứu í nghiệm tiến hành Khoa Cơng nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam từ tháng đến tháng 12/2016 III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Phân lập, tuyển chọn chủng vi sinh vật phân giải phosphate khó tan Từ mẫu đất rừng Xuân Liên, sau tiến hành phân lập môi trường NBRIP, chọn 25 chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate khó tan dựa xuất vòng phân giải Ca3(PO4)2 Vi sinh vật có khả phân giải phosphate Hình 1.Vi sinh vật phân giải phosphate mọc môi trường NBRIP Sau ngày nuôi cấy, số 25 chủng thí nghiệm có hoạt tính phân giải phosphate mạnh RL4 (470,47 µg/ml), XL3.1 (459,58 µg/ml), PT (436,73 µg/ml), VC4 (455,52 µg/ml), NC2 (415,58 µg/ml), NT1 (399,14 µg/ml), HT3.3 (391,02 µg/ml) chủng có hoạt tính yếu XL1.1 (24,12 µg/ml) (Hình 2) Kết cao kết công bố Nguyễn Văn Giang cộng (2015), nhiên thấp kết thu nghiên cứu Buddhi Min-Ho Yoon (2013) Tofazzal cộng (2007) khảo sát khả phân giải phosphate chủng vi sinh vật từ rễ lúa thu kết tương đương cao chút Từ kết chọn chủng có hoạt tính phân giải phoshate canxi mạnh để tiến hành thử hoạt độ phân giải nguồn phosphate khó tan khác AlPO4, FePO4 phytate 600 400 300 200 100 HT3 HT3.1 HT3.2 HT3.3 XL1.1 XL1.2 XL1.3 XL2.1 XL3.1 XL4.2 XL5 XL6 VC1 VC4 VC5 NC1 NC2 NT1 NT4 RL1 RL4 PT XRL2 PN1 N1 PO43- µg/ml 500 Hình Hoạt độ phân giải phosphate chủng vi sinh vật phân lập 69 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 6(79)/2017 Tất chủng có khả phân giải nguồn phosphate này, nhiên hoạt độ phân giải phosphate canxi cao nhất, dạng dễ bị hòa tan AlPO4, FePO4 Các chủng tổng hợp enzyme phosphatase nên phân giải phytate để giải phóng từ đến gốc phosphate từ phân tử phytate, hoạt độ phân giải phytate chúng khác (Hình 3) 400 Phytate 350 Ca3(PO4)2 AlPO4 FePO4 PO43- µg/ml 300 250 200 150 100 50 -50 VC4 XL3.1 RL4 NC2 NT1 HT3.3 PT Hình Hoạt độ phân giải số dạng phosphate khóa tan chủng thí nghiệm 500 450 400 350 300 250 200 150 100 50 RL4 3.2 Ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy đến khả phân giải phosphate khó tan chủng XL3.1 RL4 3.2.1 Ảnh hưởng nhiệt độ Mỗi chủng vi sinh vật khác có khoảng nhiệt độ thích hợp khác mà chúng sinh trưởng phát triển thể hoạt tính sinh học mạnh Trong nghiên cứu hai chủng XL3.1 RL biểu khả phân giải phosphate khó tan mạnh nhiệt độ từ 25 - 300C, nhiệt độ thấp hay cao làm giảm khả phân giải chất hai chủng (hình 4A) Chủng RL4 có hoạt tính mạnh 30oC (đạt 357,2 µg/l), tăng đến 35oC họat tính chủng giảm mạnh (chỉ cịn 187,78 µg/l), 40 oC hoạt tính có xu hướng ngang khơng tiếp tục giảm Chủng XL3.1 có hoạt tính mạnh 25oC (đạt 386,2 µg/l), 30oC hoạt tính bắt đầu giảm, đến 40oC sụt giảm mạnh hoạt tính ghi nhận 350 XL3.1 300 PO43- µg/ml PO43- µg/ml Hoạt độ phân giải AlPO4, FePO4 chủng vi sinh vật thí nghiệm cao chủng Trần ị Huế cộng (2015) công bố Chủng XL3.1 RL4 biểu khả phân giải mạnh nhất, nên chọn để tiến hành thí nghiệm Hai chủng có tế bào dạng thẳng, gram âm, mầu sắc khuẩn lạc trắng ngà 250 200 150 100 50 10 pH 5oC 18oC 25oC 30oC 35oC 40oC RL4 Tĩnh XL3.1 Tĩnh RL4 Lắc XL3.1 Lắc Hình Ảnh hưởng nhiệt độ (A) pH (B) đến hoạt độ phân giải phosphatecủa chủng XL3.1 Rl4 Talat cộng (2015) khẳng định khả hòa tan phosphate chủng tăng lên xung quanh ngưỡng nhiệt độ 25 - 300C, nhiệt độ cao hoạt tính giảm sinh khối vi sinh vật phát triển mạnh Mardad cộng (2014) 30°C nhiệt độ tối ưu cho tất chủng vi sinh vật phân giải phosphate nhận thấy chúng phân giải phosphaste 4oC Sonia Saksham (2016) cho thấy 40oC nhiệt độ tối ưu cho phát triển hòa tan phosphate chủng vi sinh vật nghiên cứu Điều cho thấy hoạt động trao đổi chất chủng vi sinh vật khác có liên quan đến nhiệt độ môi trường 70 3.2.2 Ảnh hưởng pH môi trường nuôi Hai chủng vi khuẩn XL3.1 Rl4 sinh trưởng khoảng pH nghiên cứu (hình 4B) Trong điều kiện ni tĩnh chủng RL4 có hoạt tính phân giải phosphate mạnh pH (100,24 µg/l) yếu pH 10 (45,23 µg/l), chủng XL3.1 họat tính mạnh pH (108,45 µg/l) yếu pH (73,37 µg/l) Trong điều kiện ni lắc hai chủng có hoạt tính mạnh pH7 (hoạt độ chủng RL4 đạt 204,62 µg/l; chủng XL3.1 (294,4 µg/l) Talat cộng (2015) chủng nghiên cứu có hoạt tính phân giải phosphate khoảng pH 5-8, tối ưu pH từ đến 7, số chủng pH tăng lên đến hồn tồn hoạt Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 6(79)/2017 tính Nguyễn Văn Giang cộng (2015) kết luận tương tự 3.2.3 Ảnh hưởng nguồn carbon nitơ Vi sinh vật sử dụng nhiều nguồn carbon khác để sinh trưởng, phát triển biểu hoạt tính Trong thí nghiệm hai chủng XL3.1 RL4 nuôi môi trường NBRIP có thay đổi nguồn carbon Các nguồn carbon 450 400 350 300 250 200 150 100 50 -50 -100 sử dụng glucose, fructose, xylose, maltose, manitose, lactose, sucrose, ribose, dextrin, nguồn nitơlà (NH2)2CO, (NH4)2SO4, NaNO3, KNO3, NH4NO3, NH4Cl, Pepton, Yeast extract (YE) Mơi trường khơng có cacbon nitơ đối chứng âm Các nguồn carbon khác làm thay đổi khả phân giải phoshate hai chủng XL3.1 RL4 (Hình 5) 600 500 PO43- (µg/l) PO43- (µg/l) 400 300 200 100 -100 Nguồn C RL4 tĩnh Nguồn C XL3.1 Tĩnh RL4 Lắc Xl3.1 Lắc Hình Ảnh hưởng nguồn carbon đến khả phân giải phosphate chủng RL4 XL3.1 Hoạt tính phân giải phosphate mạnh hai chủng hai điều kiện nuôi tĩnh lắc môi trường nuôi cấy có nguồn C glucose (hoạt độ phân giải phosphate chủng RL4 ni lắc đạt 348,89 µg/l, ni tĩnh - 154,72 µg/l; tương tự chủng XL3, ni lắc - 499,43 µg/l, ni tĩnh - 167,84 µg/l) Khi mơi trường dinh dưỡng khơng có C hai chủng hồn tồn khả phân giải phosphate khó tan chúng khơng có nguồn lượng chất để sinh trưởng tổng hợp enzyme phân giải phosphate Hai chủng XL3.1 RL4 sinh trưởng biểu hoạt tính phân giải phosphats khó tan nuôi môi trường với nguồn nitơ khác Hoạt tính hai chủng mạnh chúng ni mơi trường có nguồn N pepton, yeast extract KNO3 Khi nuôi lắc, chủng XL3.1 RL4 có hoạt tính phân giải phosphate mạnh nuôi tĩnh RL4T XL3.1T RL4L 3.2.4 Khả tổng hợp IAA cố định N2 Các chủng vi khuẩn tuyển chọn nuôi cấy để thử khả sinh IAA với mục đích tìm kiếm chủng vi khuẩn vừa có khả phân giải phosphate khó tan vừa có khả sinh IAA nhằm bổ sung vào chế phẩm phân bón sinh học Các chủng XL3.1 RL4 ni cấy mơi trường LB có bổ sung L-tryptophan, sau thu dịch ly tâm thử với thuốc thử Salkowski, mẫu có sinh IAA chuyển sang màu hồng, nồng độ IAA sinh nhiều làm cho dịch nuôi cấy chuyển thành màu đỏ (Hình 7A) Cường độ màu đậm hay nhạt phụ thuộc vào khả sinh IAA chủng vi khuẩn Dịch nuôi cấy hai chủng XL3.1 RL4 thay đổi màu sau bổ sung thuốc thử Slkowski, chứng tỏ chúng tổng hợp phytohormone IAA XL3.1L 600 PO43- (µg/l) 500 400 300 200 100 NGUỒN N VƠ CƠ NGUỒN N HỮU CƠ Hình Ảnh hưởng nguồn nitơ đến khả phân giải phosphatecủa chủng RL4 XL3.1 A B Hình Khả sinh IAA (A) cố định nitơ (B) chủng XL3.1 RL4 71 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 6(79)/2017 Chủng XL3.1 RL4 ni đĩa petri chứa mơi trường Buck’s khơng có nitơ, chủng có khả mọc chứng tỏ có khả cố định N Kết thu hai chủng có khả cố định N tự (Hình 7B) Trần ị Giang cộng năm 2014 phân lập 63 chủng vi sinh vật vừa có khả cố định N phân giải phosphate khó tan IV KẾT LUẬN - 25 chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate khó tan phân lập tuyển chọn từ mẫu đất thu thập Vường Quốc gia Xuân Liên, hai chủng XL3.1 Rl4 vừa có hoạt tính phân giải phosphate mạnh (lần lượt đạt 470,47 µg/ml 459,58 µg/ml), - Hai chủng XL3.1 Rl4 sinh trưởng phát triển tốt biểu hoạt tính phân giải phosphate mạnh 25 - 300C, pH7, nguồn carbon, nitơ thích hợp glucose, lactose, maltose, pepton, yeast extract KNO3 Đây chủng vi sinh vật có tiềm bổ sung vào chế phẩm phân bón sinh học TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Văn Giang, Hoàng ị Vân, Trần ị Đào, Trần ị Huế, 2015 Phân lập nghiên cứu đặc điểm số chủng vi khuẩn có khả phân giải phốt phát khó tan đất Tạp chí Cơng nghệ Sinh học 13(2A): 753-762 Trần ị Giang, Nguyễn ị Quyên, Cao Ngọc Điệp, 2014 Phân lập nhận diện vi khuẩn vùng rễ kích thích sinh trưởng (PGPR) từ số loại rau ăn trồng thành phố Cần Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Cần ơ, Phần B: Nông nghiệp, ủy sản Công nghệ Sinh học, 35: 65-73 Trần ị Huế, Tống Kim uần, Nguyễn Văn Giang, 2015 Phân lập tuyển chọn chủng vi sinh vật phân giải phốt phát sắt, phốt phát nhôm từ đất trồng chè Shan Yên Bái Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam, Số 6(59), 97-102 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10784: 2015 Vi sinh vật - Xác định khả sinh tổng hợp axit 3-indolaxetic (IAA) Buddhi Charana Walpola and Min-Ho Yoon, 2013 Isolation and characterization of phosphate solubilizing bacteria and their co-inoculation e ciency on tomato plant growth and phosphorous uptake African Journal of Microbiology Research, Vol 7(3):266-275 72 Chung H, Park M, Madhaiyan M, Seshadri S, Song J, Cho H, Sa T, 2005 Isolation and characterization of phosphate solubilizing bacteria from the rhizosphere of crop plants of Korea Soil Biol Biochem 37 (10):1970-1974 Havlin, J.L., J.D Beaton, S.L Tisdale, and W.L Nelson 1999 Soil Fertility and Fertilizers 6th Edition Prentice Hall Upper Saddle River, NJ 499 p Kucey, R M N., 1983 Phosphate-solubilizing bacteria and fungi in various cultivated and virgin Alberta soils Can J Soil Sci 63:671-678 Lowell Busman, John Lamb, Gyles Randall, George Rehm, and Michael Schmitt,2009 e nature of phosphorus in soils University of Minnesota http:// www.extension.umn.edu/ Mardad I, Serrano A, Soukri A., 2014 E ect of Carbon, Nitrogen Sources and Abiotic Stress on Phosphate Solubilization by Bacterial Strains Isolated from a Moroccan Rock Phosphate Deposit J Adv Chem Eng 1:102 Qurban Ali Panhwar, Radziah Othman, Zaharah Abdul Rahman, Sariah Meon and Mohd Razi Ismail, 2011 Isolation and characterization of phosphate-solubilizing bacteria from aerobic rice African Journal of Biotechnology Vol 11(11), pp 2711-2719 Sharma Seema B, Riyaz Z Sayyed, Mrugesh H Trivedi and ivakaran A Gobi, 2013 Phosphate solubilizing microbes: sustainable approach for managing phosphorus de ciency in agricultural soils Springer Plus 2013, 2:587 Sonia Sethi & Saksham Gupta, 2016 Optimisation of Parameters for Fermentation Conditions of Phosphate Solubilising Bacteria G.J.B.A.H.S.,Vol.5(2):35-39 Tofazzal Islam Md., Abhinandan Deora, Yasuyuki Hashidoko, Atiqur Rahman, Toshiaki Ito and Satoshi Tahara, 2007 Isolation and Identification of Potential Phosphate Solubilizing Bacteria from the Rhizoplane of Oryza sativa L cv BR29 of Bangladesh http://btlbsmrau.org/wp-content/ uploads/2014/01/PSB-ZNC2007.pdf Talat Yasmeen Mujahid, Syed Abdus Subhan, Abdul Wahab, Javeria Masnoon, Nuzhat Ahmed and Tanveer Abbas, 2015 E ects of Di erent Physical and Chemical Parameters on Phosphate Solubilization Activity of Plant Growth Promoting Bacteria Isolated from Indigenous Soil Journal of Pharmacy and Nutrition Sciences, 64-70 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 6(79)/2017 Isolation and selection of potential phosphate solubilizing bacterial strains from soil of Xuan Lien National park Nguyen Van Giang, Nguyen Duc Abstract is study was conducted to isolate and select microbial strains that can solubilize phosphate from soil of Xuan Lien National park 25 bacterial strains which could solubilize phosphate from soil samples of Xuan Lien National park were isolated Based on concentration of PO43- released in cultivation media, two strains XL3.1 and RL4 were selected Strains XL3.1 and RL4 exhibited N2- xing and IAA producing ability When culturing at 25-300C, pH7 in medium with suitable carbon and nitrogen sources such as glucose, lactose, maltose, peptone, yeast extract and KNO3, these two strains developed well and expressed the highest capability of phosphate solubilization Key words: Phosphate solubilizing microorganisms (PSM), N2- xing, IAA production Ngày nhận bài: 6/6/2017 Người phản biện: PGS.TS Lê Như Kiểu Ngày phản biện: 13/6/2017 Ngày duyệt đăng: 25/6/2017 TUYỂN CHỌN CHỦNG NẤM MEN, NẤM MỐC TỪ BÁNH MEN LÁ ỨNG DỤNG TRONG NÂNG CAO CHẤT LƯỢNG RƯỢU LÀNG NGHỀ TẠI HÀ GIANG Phạm Anh Tuấn1, Hồng Văn Đạt1, Hồ Tuấn Anh2 TĨM TẮT Nghiên cứu tiến hành tuyển chọn chủng nấm men, nấm mốc từ vi sinh vật có loại bánh men làng nghề sản xuất rượu huyện Hồng Su Phì Quản Bạ, tỉnh Hà Giang Kết tuyển chọn chủng nấm mốc Aspergillus niger NLN.218 hỗ trợ thủy phân tinh bột chủng nấm men Saccharomyces cerevisiae RLN.168 có hiệu suất lên men đạt 93,07% nồng độ đường 18,14%, nồng độ cồn đạt 11,2% v/v Kết đánh giá cảm quan cho thấy tất mẫu thử nghiệm có điểm cảm quan thị hiếu cao mẫu đối chứng sản xuất từ loại bánh men truyền thống Triển khai sản xuất thử nghiệm quy mô rộng hơn, kết đạt cho thấy hiệu suất trung bình đạt từ 1,29 - 1,514 kg nguyên liệu/ lít rượu 30% v/v, tăng 6,5 - 24% so với bánh men truyền thống Từ khóa: Nấm mốc, nấm men, rượu làng nghề, bánh men lá, đánh giá cảm quan I ĐẶT VẤN ĐỀ eo thống kê sở Công thương tỉnh Hà Giang, đến năm 2014, tồn tỉnh có 17 sở tham gia sản xuất kinh doanh rượu chủ yếu theo mơ hình Hợp tác xã với lực sản xuất khoảng 160.000 lít/năm Các thương hiệu rượu truyền thống đạt nhiều giải thưởng chất lượng bao gồm rượu Nàng Đơn xã Nàng Đơn, huyện Hồng Su Phì, rượu anh Vân xã anh Vân, huyện Quản Bạ Tuy nhiên điều kiện sản xuất thủ công chủ yếu dựa kinh nghiệm người sản xuất nên chất lượng rượu hiệu suất thu hồi chưa ổn định (HABECO, 2103) Đối với sản phẩm rượu làng nghề, chất lượng bánh men định hiệu suất lên men hương, vị rượu sản phẩm Bánh men môi trường ni dưỡng bảo quản hệ vi sinh vật có lợi sản xuất rượu thủ công Nấm mốc sinh tổng hợp enzyme α-amylase glucoamylase xúc tác trình thủy phân tinh bột tạo thành dextrin loại đường có khả lên men Nấm men Saccharomyces cerevisiae có vai trị quan trọng q trình chuyển hóa đường thành cồn, tạo thành phần hương sản phẩm phụ khác trình lên men (Lương Đức Phẩm, 2009) Nghiên cứu thành phần vi sinh vật có bánh men rượu làng nghề Hà Giang, nhóm nghiên cứu Viện Kỹ thuật Bia - Rượu - Nước giải khát xác định chủng nấm mốc Aspergillus oryzae NLN.216, Aspergillus niger NLN.217, Aspergillus niger NLN.218, Mucor sp NLN.219 05 chủng nấm men Saccharomyces cerevisiae RLN.168, RLN.169, RLN.170, RLN.171, RLN.172 Nhằm nâng cao chất lượng trì tính chất cảm quan đặc trưng rượu làng nghề, việc tuyển chọn chủng nấm men, nấm mốc từ vi sinh vật từ nguồn bánh men làng nghề, ứng dụng sản xuất bánh men giống cần thiết Viện kỹ thuật Bia - Rượu - Nước giải khát, Tổng Công ty cổ phần Bia - Rượu - Nước giải khát Hà Nội Trường Đại học Kinh tế Kỹ thuật Công nghiệp 73 ... LUẬN Phân lập, tuyển chọn chủng vi sinh vật phân giải phosphate khó tan Từ mẫu đất rừng Xuân Liên, sau tiến hành phân lập môi trường NBRIP, chọn 25 chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate khó. .. phosphate khó tan IV KẾT LUẬN - 25 chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate khó tan phân lập tuyển chọn từ mẫu đất thu thập Vường Quốc gia Xuân Liên, hai chủng XL3.1 Rl4 vừa có hoạt tính phân giải. .. nghệ Nơng nghiệp Vi? ??t Nam - Số 6(79)/2017 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phân lập chủng vi sinh vật Các chủng vi sinh vật có khả phân giải phosphate khó tan từ mẫu đất thí nghiệm phân lập mơi trường