THỬ NGHIỆM điều CHẾ AUTO VACCINE PHÕNG TIÊU CHẢY DO e coli TRÊN HEO CON SAU CAI sữa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP THỬ NGHIỆM ĐIỀU CHẾ AUTO-VACCINE PHÕNG TIÊU CHẢY DO E coli TRÊN HEO CON SAU CAI SỮA Ngành học: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2003 – 2007 Sinh viên thực hiện: CAO VĂN HÕA Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ************************ THỬ NGHIỆM ĐIỀU CHẾ AUTO-VACCINE PHÕNG BỆNH TIÊU CHẢY DO E coli TRÊN HEO CON SAU CAI SỮA Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS NGUYỄN NGỌC HẢI CAO VĂN HÕA Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM TẠ Đề tài nghiên cứu Con làm cịn nhiều thiếu sót chƣa tốt nhƣng Con xin dành tặng ba mẹ Đây kết mà 22 năm ba mẹ làm lụng để ni dạy Con hy vọng q bé nhỏ làm vui vơi bớt phần nỗi khổ cực, lo âu ba mẹ Con trai ba mẹ yêu ba mẹ nhiều Em xin chân thành cảm tạ Ban giám hiệu trƣờng Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ Môn Công nghệ sinh học, tất quý thầy cô truyền đạt kiến thức cho em suốt q trình học trƣờng Và ngƣời có ảnh hƣởng lớn đến hoàn thành đề tài thầy Hải (TS Nguyễn Ngọc Hải) Em cám ơn thầy nhiều mà thầy dành cho em Em đến với thầy hoàn cảnh khác với bạn, nhƣng với quan tâm hƣớng dẫn ân cần thầy giúp em có nhiều nghị lực niềm vui mà vƣợt qua giai đoạn khó khăn Khi làm việc với thầy, em không học hỏi đƣợc thầy kiến thức, kỹ mà em thấy thầy nhiều đức tính cao đẹp để em học tập Thầy có lối sống thật đơn giản, nhƣng thầy giàu tình cảm đức hy sinh Thầy Nhà Giáo mẫu mực mà em đƣợc gặp Em xin cảm ơn TS Lê Anh Phụng, ThS Trần Thị Bích Liên, cô Lê Thị Hà BSTY Nguyễn Thị Kim Loan giúp đỡ cho em điều kiện thực đề tài Em xin cảm ơn Ban lãnh đạo anh chị công ty Gia Nam nhiệt tình giúp em hồn thành đề tài Và bạn (Uyên, Thái, Phi, Linh, Vy), ngƣời chia sẻ, giúp đỡ gặp khó khăn Cuối cùng, anh cám ơn Em Em ln bên cạnh cổ vũ anh mệt mỏi động viên anh cảm thấy chán Em nguồn tinh thần vơ q báu anh CAO VĂN HỊA Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2007 LUAN VAN CHAT LUONG downloadiii : add luanvanchat@agmail.com TÓM TẮT CAO VĂN HÕA Đề tài: “Thử Nghiệm Điều Chế Auto-Vaccine Phòng Bệnh Tiêu Chảy Do E coli Trên Heo Con Sau Cai Sữa” Thời gian: 01/05/2007 02/08/2007 Địa điểm: phịng thí nghiệm vi sinh, Bộ môn Vi Sinh – Truyền Nhiễm, khoa Chăn Nuôi – Thú Y, trƣờng đại học Nông Lâm TPHCM công ty TNHH Gia Nam, huyện Bến Cát, tỉnh Bình Dƣơng Hội đồng hƣớng dẫn: TS NGUYỄN NGỌC HẢI Bƣớc 1, phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu phân tiêu chảy trại heo, chủng E coli đƣợc kiểm tra sinh hóa nghiệm pháp IMViC đƣợc định type kháng nguyên F4, F5, F6 Bƣớc 2, lựa chọn chủng E coli có kết phản ứng rõ ràng để sản xuất autovaccine Bƣớc 3, bố trí thí nghiệm đánh giá hiệu auto-vaccine: Lô 1: bầy heo con, đƣợc tiêm auto-vaccine lần Lô 2: bầy heo con, đƣợc tiêm auto-vaccine lần Lô đối chứng: bầy heo con, đƣợc tiêm chất bổ trợ Việc đánh giá hiệu auto-vaccine dựa vào hiệu giá kháng thể, tỷ lệ heo tiêu chảy, tăng trọng trung bình tuyệt đối phản ứng phụ sau tiêm, Kết quả: Auto-vaccine thực nghiệm tạo đáp ứng miễn dịch cao kéo dài Auto-vaccine thực nghiệm không gây tác dụng phụ sau tiêm không ảnh hƣởng đến tăng trọng heo Chƣa thể đánh giá xác đƣợc hiệu bảo hộ tiêu chảy E coli auto-vaccine LUAN VAN CHAT LUONG downloadiv : add luanvanchat@agmail.com SUMMARY CAO VAN HOA, Nong Lam University, HCM city Graduating thesis topic: “The experiment of auto-vaccine production to protect the post – weaning piglet from the diarrhoea caused by E coli” The thesis was carried out at Microbiology lab, Microbiology and Infectious Diseases Dept of Faculty of Animal Science and Veterinary, Nong Lam University and Gia Nam Ltd Company, Binh Duong province from 5/2007 to 8/2007 Supervisor: Dr NGUYEN NGOC HAI First, isolate E coli from the diarrhoea feces and identify them by IMViC test, then serotype with F4, F5, F6 antiserum Second, selecte E coli isolates of serotype F4 or F5 to produce the autovaccine Third, set up the experiment to evaluate the efficiency of auto-vaccine (the experiment was repeated in times): The first group: litters (28 piglets, from 14 to 20 days aged), vaccine injection one times The second group: litters (28 piglets, from 14 to 20 days aged), vaccine injection two times with 10 days interval The control group: litters (22 piglets, from 14 to 20 days aged), adjuvant injection two times with 10 days interval The efficacy of auto-vaccine was evaluated by antiody titers, medium daily gain and the side effects Result: The auto-vaccine made a high antibody titers and long immunization The auto-vaccine did not bring neither the bad effects to piglets vaccinated health nor the gain weight of piglet The results could not conclude exactly the efficacy of auto-vaccine on E Coli diarrhoea control LUAN VAN CHAT LUONG downloadv : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC CHƢƠNG TRANG Trang bìa i Trang bìa ii Lời cảm tạ iii Tóm tắt tiếng Việt iv Tóm tắt tiếng Anh v Mục lục vi Danh sách chữ viết tắt xii Danh sách hình xiii Danh sách bảng xiv Danh sách biểu đồ xv Danh sách sơ đồ xvi MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU LUAN VAN CHAT LUONG downloadvi : add luanvanchat@agmail.com 2.1 Vi khuẩn Escherichia coli 2.1.1 Định nghĩa 2.1.2 Đặc tính sinh hóa 2.1.3 Yếu tố kháng nguyên 2.1.3.1 Kháng nguyên thân O 2.1.3.2 Kháng nguyên bề mặt hay kháng nguyên K 2.1.3.3 Kháng nguyên F (fimbriae) 2.1.3.4 Kháng nguyên H hay kháng nguyên lông roi (flagella) 2.2 Bệnh tiêu chảy 2.2.1 Khái niệm 2.2.2 Nguyên nhân gây tiêu chảy 2.2.2.1 Điều kiện ngoại cảnh bất lợi 2.2.2.2 Nuôi dƣỡng không kỹ thuật 2.2.2.3 Vi sinh vật 2.3 Sự miễn dịch 2.3.1 Khái niệm miễn dịch 2.3.2 Phân loại miễn dịch 2.3.2.1 Miễn dịch không đặc hiệu 2.3.2.2 Miễn dịch đặc hiệu 10 2.3.3 Khái niệm kháng nguyên (antigen) kháng thể (antibody) 11 LUAN VAN CHAT LUONG downloadvii: add luanvanchat@agmail.com 2.3.3.1 Kháng nguyên (antigen) 11 2.3.3.2 Kháng thể (antibody) 13 2.4 Auto-vaccine 16 2.4.1 Định nghĩa vaccine 16 2.4.2 Phân loại vaccine 16 2.4.2.1 Vaccine giảm độc lực (attenuated) 16 2.4.2.2 Vaccine bất hoạt (inactivated) 16 2.4.2.3 Các “toxoid” 17 2.4.2.4 Vaccine phần hay vaccine dƣới đơn vị (subunit) 17 2.4.2.5 Một số loại vaccine nghiên cứu 17 2.4.3 Định nghĩa auto-vaccine 18 2.4.4 Quy trình sản xuất auto-vacine 18 2.4.5 Ƣu điểm nhƣợc điểm việc sản xuất, sử dụng auto-vaccine 18 2.4.5.1 Ƣu điểm 18 2.4.5.2 Nhƣợc điểm 19 2.5 Chất bổ trợ 19 2.5.1 Định nghĩa chất bổ trợ 19 2.5.2 Tác dụng chat bổ trợ 20 2.5.3 Chất bổ trợ MONTANIDE (chất bổ trợ đƣợc sử dụng đề tài này) 20 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 21 LUAN VAN CHAT LUONG downloadviii: add luanvanchat@agmail.com 3.1 Thời gian địa điểm 21 3.1.1 Thời gian 21 3.1.2 Địa điểm 21 3.2 Vật liệu 21 3.2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 21 3.2.2 Vật liệu thiết bị 21 3.3 Nội dung 22 3.4 Phƣơng pháp tiến hành 22 3.4.1 Phƣơng pháp lấy mẫu 22 3.4.2 Nghiên cứu vi sinh vật 23 3.4.2.1 Nuôi cấy phân lập 23 3.4.2.2 Kiểm tra sinh hóa 23 3.4.3 Điều chế auto-vaccine 28 3.4.4 Kiểm tra độ vô trùng auto-vaccine 30 3.4.5 Bố trí thí nghiệm đánh giá hiệu auto-vaccine 30 3.4.5.1 Yếu tố thí nghiệm 30 3.4.5.2 Phân phối heo vào lơ thí nghiệm 30 3.4.6 Phƣơng pháp kiểm tra hiệu giá kháng thể phản ứng ngƣng kết chậm ống nghiệm 32 3.4.6.1 Lấy mẫu máu bảo quản 32 3.4.6.2 Chuẩn bị dịch kháng nguyên 33 LUAN VAN CHAT LUONG downloadix : add luanvanchat@agmail.com 3.4.6.3 Tiến hành phản ứng 34 3.4.6.4 Đọc kết 34 3.5 Các tiêu theo dõi 35 3.6 Xử lý số liệu 36 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 4.1 Kết lựa chọn chủng E coli làm auto-vaccine 37 4.2 Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm 38 4.3 Hiệu giá kháng thể 39 4.3.1 Thí nghiệm 39 4.3.1.1 Lần rút máu thứ 40 4.3.1.2 Lần rút máu thứ hai 40 4.3.1.3 Lần rút máu thứ ba 41 4.3.2 Thí nghiệm 43 4.3.2.1 Lần rút máu thứ 43 4.3.2.2 Lần rút máu thứ hai 44 4.3.2.3 Lần rút máu thứ ba 44 4.3.3 Kết tổng kết hiệu giá kháng thể 46 4.4 Tỷ lệ heo tiêu chảy 47 4.4.1 Thí nghiệm 47 4.4.2 Thí nghiệm 48 LUAN VAN CHAT LUONG downloadx : add luanvanchat@agmail.com 50 4.5 Tăng trọng tuyệt đối 4.5.1 Thí nghiệm Bảng 4.7 Kết thống kê tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ (thí nghiệm 1) Thí nghiệm Lơ ĐC Lơ Lơ Bầy (8 con) Bầy (8 con) Bầy (10 con) Bầy (9 con) Bầy (7 con) Bầy (10 con) Bầy (8 con) Bầy (10 con) Tổng trọng Tổng trọng lƣợng bắt lƣợng kết đầu TN thúc TN (kg) (kg) 38,1 130,3 44,2 131,6 53,6 165,7 43 143,4 36,8 114,6 36,6 150,1 37 130,1 57 173,7 Chỉ số P Tăng trọng trung Tăng trọng bình tuyệt đối trung bình bầy tuyệt đối (g/ngày/con) lô (g/ngày/con) 288,13 280,63 ± 10,6 273,13 280,25 278,89 279 ± 1,2 277,86 283,75 290,94 288,81 ± 4,4 291,75 0,168 Biểu đồ 4.11 Tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ (thí nghiệm 1) Dựa vào biểu đồ 4.11 bảng kết thống kê 4.6, nhận thấy tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ khơng có khác biệt phƣơng diện thống kê học Điều chứng tỏ auto-vaccine thực nghiệm khơng làm ảnh hƣởng đến tăng trọng heo LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 51 4.5.2 Thí nghiệm Bảng 4.8 Kết thống kê tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ (thí nghiệm 2) Thí nghiệm Lơ ĐC Lơ Lơ Bầy Bầy Bầy Bầy Bầy Bầy Bầy Bầy Trọng lƣợng Trọng lƣợng Tăng trọng trung Tăng trọng trung trung bình trung bình bình tuyệt đối bình tuyệt đối bắt đầu TN kết thúc TN bầy lô (kg) (kg) (g/ngày/con) (g/ngày/con) 43,4 170,8 289,55 286,36 ± 4,5 44,4 169 283,18 45,8 136,9 284,55 43,2 146,1 286,00 279,51 ± 9,9 45,4 152,6 268,00 43,1 159,7 291,75 35,4 127,4 287,38 288,25 ± 2,9 51,5 165,8 285,75 Chỉ số P 0,349 Biểu đồ 4.12 Tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ (thí nghiệm 2) Dựa vào biểu đồ 4.12 bảng kết thống kê 4.7, nhận thấy tăng trọng tuyệt đối lơ khơng có khác biệt phƣơng diện thống kê học Điều chứng tỏ auto-vaccine thực nghiệm không làm ảnh hƣởng đến tăng trọng heo LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 52 4.5.3 Tổng kết tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ qua thí nghiệm Bảng 4.9 Tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ qua TN Lơ ĐC Lơ Lơ Thí nghiệm Thí nghiệm Thí nghiệm Thí nghiệm Thí nghiệm Thí nghiệm Tăng trọng trung bình tuyệt đối TN 280,63 286,36 279 279,51 288,81 288,25 Tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ P 283,5 ± 4,05 279,26 ± 0,36 0,065 288,53 ± 0,4 Theo kết thống kê bảng 4.8, nhận thấy tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ qua thí nghiệm khơng có khác biệt phƣơng diện thống kê học Điều chứng tỏ auto-vaccine thực nghiệm không gây ảnh hƣởng đến tăng trọng heo thí nghiệm 4.6 Các số khác Trong q trình tiến hành thí nghiệm, chúng tơi quan sát heo khơng bị run rẩy, ói mửa, ủ rủ, bỏ bú, khơng có phản ứng cục chỗ tiêm Heo ăn uống, vận động, hơ hấp bình thƣờng Điều chứng tỏ auto-vaccine thực nghiệm không gây phản ứng phụ không ảnh hƣởng đến sức khỏe heo 4.7 Kết chung Auto-vaccine thực nghiệm tạo đáp ứng miễn dịch cao kéo dài Auto-vaccine tạo đáp ứng miễn dịch cao sau lần tiêm Chƣa thể đánh giá đƣợc xác hiệu phịng ngừa tiêu chảy E coli auto-vaccine thực nghiệm LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 53 Auto-vaccine thực nghiệm không gây tác động xấu đến tăng trọng heo Auto-vaccine thực nghiệm không ảnh hƣởng đến sức ăn, vận động hô hấp heo Auto-vaccine không gây phản ứng phụ nhƣ ói mửa, ủ rủ, run rẩy hồn hồn khơng gây phản ứng cục nơi tiêm LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 54 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Auto-vaccine thực nghiệm tạo đáp ứng miễn dịch cao kéo dài Auto-vaccine thực nghiệm không gây tác dụng phụ sau tiêm không ảnh hƣởng đến tăng trọng heo Chƣa thể đánh giá xác đƣợc hiệu bảo hộ tiêu chảy E coli auto-vaccine 5.2 Đề nghị Cần sử dụng kit với nhiều type huyết định type chọn chủng E coli sản xuất auto-vaccine Heo thí nghiệm cần đồng độ tuổi Đảm bảo điều kiện chăm sóc tốt cho heo thí nghiệm nhằm tránh nguyên gây tiêu chảy khác ngồi E coli giúp heo thí nghiệm đƣợc khỏe mạnh để đáp ứng miễn dịch đồng với auto-vaccine Thiết kế thí nghiệm tiêm auto-vaccine cho heo mẹ mang thai để đánh giá hiệu bảo hộ heo LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO  TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Trần Linh Thƣớc Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mĩ phẩm NXB Giáo Dục Nguyễn Đức Hùng, Lê Đình Hùng, Huỳnh Lê Tâm Sổ tay kiểm nghiệm vi sinh thực phẩm thủy sản NXB Nông Nghiệp-Hà Nội, 2004 Nguyễn Ngọc Hải Phân lập vi khuẩn E coli gây bệnh phù đầu heo sau cai sữa khảo sát khả nhạy cảm chúng số kháng sinh Luận án Thạc sĩ Khoa Học Nông Nghiệp, 1999 Tủ sách ĐH Nông Lâm Tp HCM Thái Quốc Hiếu Ảnh hưởng việc bổ sung kháng sinh chế phẩm sinh học vào thức ăn để phòng tiêu chảy E coli heo tỉnh Tiền Giang Luận án Thạc sĩ Khoa Học Nông Nghiệp, 2002 Tủ sách ĐH Nông Lâm Tp HCM Nguyễn Đình Bảng, Nguyễn Thị Kim Hƣơng Vaccine & chế phẩm miễn dịch phòng & điều trị NXB Y Học, 2003 Nguyễn Đình Giậu Sinh lý học người động vật NXB Đại Học Quốc Gia Tp HCM, 2000 “Vắc-xin”, Wikipedia, 08/03/2007 “E coli”, Wikipedia, 13/03/2007  TÀI LIỆU NƢỚC NGOÀI “Escherichia coli”, Wikipedia, 17/05/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 56 10 ”Vaccine”, Wikipedia 11 “Diarrhea”, Wikipedia, 09/07/2007 12 “Autovaccination”, Wikipedia, 14/05/2007 13 “Immunologic adjuvant”, Wikipedia, 28/07/2007 14 “Montanide for antibodies production”, SEPPIC company LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 57 PHỤ LỤC  THÀNH PHẦN CÁC MƠI TRƢỜNG – HĨA CHẤT EMB (pH: 7,2) Pepton 10 g Lactose 5g Succrose 5g K2HPO4 2g Agar 13,5 g Eosin 0,4 g Methylen Blue 0,065 g Nƣớc cất 1000 ml KIA (pH: 7,4 +/- 0,2) Polypepton peptone 20 g Lactose 20 g Dextrose 1g NaCl 5g Ferric ammonium citrate 0,5 g Sodium thiosulfate 0,5 g Agar 15 g Phenol red 0,025 g Nƣớc cất 1000 ml TSA (pH: 7,3 +/- 0,2) Soya peptone 15 g Tryptone peptone 5g NaCl 5g LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 58 Agar 18 g Nƣớc cất 1000 ml Soya peptone 15 g Tryptone peptone 5g NaCl 5g Nƣớc cất 1000 ml TSB Canh tryptone Cao thịt 5g Peptone 10 g NaCl 5g Nƣớc cất 1000 ml Clark – Lubs Peptone 5g Glucose 5g Phosphate buffer 5g Nƣớc cất 1000 ml Simmons Citrate Agar (pH: 6,9) Sodium citrate 2g K2PO4 1g MgSO4 0,2 g Brothynol blue 0,08 g NaCl 5g NH4H2PO4 1g Agar 18 g Nƣớc cất 1000 ml LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 59 Nƣớc muối sinh lý NaCl 9g Nƣớc cất 1000 ml Thuốc thử Kovac’s p-Dimethylaminobenzaldehyde 10 g Isoamyl alcohol 150 ml HCl đậm đặc 50 ml 10 Thuốc thử Methyl Red Methyl red 0,1 g Ethanol 95% 300 ml Nƣớc cất (vừa đủ) 500 ml 11 Crystal violet Crystal violet 0,4 g Cồn 960 10 ml Phenol 1g Nƣớc cất 100 ml 12 Lugol KI 2g Iod tinh thể 1g Nƣớc cất 300 ml 13 Fuschine Fuschine kiềm 0,3 g Cồn 960 10 ml Phenol 5g Nƣớc cất 35 ml LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 60  CÁC PHẢN ỨNG SINH HĨA Phản ứng Indol Chuẩn bị mơi trƣờng canh tryptone Cấy vi khuẩn, ủ 370C, 24 – 48 Thuốc thử Kovacs, nhỏ – giọt vào mơi trƣờng sau cấy ủ Kết quả: Dƣơng tính: màu đỏ xuất bề mặt môi trƣờng Âm tính: bề mặt mơi trƣờng giữ ngun màu vàng thuốc thử Phản ứng Methyl Red Chuẩn bị môi trƣờng Clark – Lubs Cấy vi khuẩn, ủ 370C, 24 – 48 Thuốc thử Methyl Red, nhỏ – giọt vào môi trƣờng sau cấy ủ Kết quả: Dƣơng tính: dịch cấy màu đỏ Âm tính: dịch cấy màu vàng Phản ứng Voges Proskauer Chuẩn bị môi trƣờng Clark – Lubs Cấy vi khuẩn, ủ 370C, 24 – 48 Thuốc thử α-naphtol KOH 40% Kết quả: Dƣơng tính: mơi trƣờng có màu đỏ hồng Âm tính: mơi trƣờng khơngcó màu đỏ hồng Phản ứng Citrate Chuẩn bị môi trƣờng thạch nghiêng Simmons Citrate Agar Cấy vi khuẩn, ủ 370C, 24 – 48 Kết quả: Dƣơng tính: có khuẩn lạc, mơi trƣờng chuyển màu xanh dƣơng Âm tính: mơi trƣờng giữ ngun màu xanh lục LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 61  KẾT QUẢ THỐNG KÊ Hiệu giá KT lần rút máu thứ thí nghiệm Analysis of Variance for HGKT Source DF SS MS Lo 356 178 Error 10667 1778 Total 11022 Level dc N 3 Pooled StDev = Mean 80,00 80,00 66,67 StDev 0,00 69,28 23,09 42,16 F 0,10 P 0,906 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) -+ -+ -+ 40 80 120 Hiệu giá KT lần rút máu thứ hai thí nghiệm Analysis of Variance for HGKT Source DF SS MS Lo 1692800 846400 Error 592000 98667 Total 2284800 Level dc N 3 Pooled StDev = Mean 1066,7 1066,7 146,7 StDev 369,5 369,5 151,4 314,1 F 8,58 P 0,017 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) + -+ -+ -+ 500 1000 1500 Hiệu giá KT lần rút máu thứ ba thí nghiệm Analysis of Variance for HGKT Source DF SS MS Lo 295822 147911 Error 887467 147911 Total 1183289 Level dc N 3 Pooled StDev = Mean 1280,0 853,3 960,0 384,6 StDev 0,0 369,5 554,3 F 1,00 P 0,422 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+-( * -) ( * ) ( * ) + -+ -+ -+-500 1000 1500 2000 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 62 Hiệu giá KT lần rút máu thứ thí nghiệm Analysis of Variance for HGKT Source DF SS MS Lo 348800 174400 Error 1004800 167467 Total 1353600 Level dc N 3 Pooled StDev = Mean 546,7 346,7 66,7 409,2 F 1,04 P 0,409 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev StDev -+ -+ -+ -+ 650,3 ( -* ) 281,0 ( -* ) 23,1 ( * -) -+ -+ -+ -+ -500 500 1000 Hiệu giá KT lần rút máu thứ hai thí nghiệm Analysis of Variance for HGKT Source DF SS MS Lo 15382756 7691378 Error 9352533 1558756 Total 24735289 Level dc N 3 Pooled StDev = Mean 3413 3413 640 StDev 1478 1478 554 1249 F 4,93 P 0,054 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) + -+ -+ -+ 2000 4000 6000 Hiệu giá KT lần rút máu thứ ba thí nghiệm Analysis of Variance for HGKT Source DF SS MS Lo 21334756 10667378 Error 7001600 1166933 Total 28336356 Level dc N 3 Pooled StDev = Mean 1493 4267 667 1080 StDev 978 1478 600 F 9,14 P 0,015 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+( * -) ( * -) ( * -) -+ -+ -+ -+0 2000 4000 6000 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 63 Số heo tiêu chảy lơ thí nghiệm Expected counts are printed below observed counts Tchay Kotchay Total Lo 11 12,63 Lo 12 13,60 Lo DC 11 7,77 Total 34 15 13,37 16 14,40 8,23 36 26 28 16 70 Chi-Sq = 0,210 + 0,188 + 0,198 + 0,178 + DF = 2, P-Value = 0,184 1,341 + 1,267 = 3,382 Số heo tiêu chảy lơ thí nghiệm Expected counts are printed below observed counts Tchay Kotchay Total Lo DC 7,90 Lo 10,05 Lo 10 10,05 Total 28 13 14,10 19 17,95 18 17,95 50 22 28 28 78 Chi-Sq = 0,154 + 0,110 + 0,086 + 0,062 + DF = 2, P-Value = 0,814 0,000 + 0,000 = 0,412 Tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ thí nghiệm Analysis of Variance for Tang tro Source DF SS MS Lo 160,6 80,3 Error 154,2 30,8 Total 314,7 Level DC N 3 Pooled StDev = Mean 279,00 288,81 280,63 5,55 F 2,60 P 0,168 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev StDev + -+ -+ -+ -1,20 ( * -) 4,40 ( -* -) 10,61 ( * -) + -+ -+ -+ -272,0 280,0 288,0 296,0 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 64 Tăng trọng trung bình tuyệt đối lơ thí nghiệm Analysis of Variance for Tang tro Source DF SS MS Lo 123,9 62,0 Error 236,9 47,4 Total 360,9 Level DC N 3 Mean 279,51 288,25 286,36 Pooled StDev = StDev 9,98 2,95 4,50 6,88 F 1,31 P 0,349 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+-( -* ) ( -* ) ( -* -) + -+ -+ -+-272,0 280,0 288,0 296,0 Tăng trọng trung bình tuyệt đối lô qua TN Analysis of Variance for TTTBTD Source DF SS MS Lo 86,24 43,12 Error 16,70 5,57 Total 102,94 Level DC N 2 Pooled StDev = Mean 279,26 288,53 283,50 2,36 StDev 0,36 0,40 4,05 F 7,74 P 0,065 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+-( -* ) ( * ) ( -* ) + -+ -+ -+-276,0 282,0 288,0 294,0 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... tài: “THỬ NGHIỆM ĐIỀU CHẾ AUTO- VACCINE PHÕNG BỆNH TIÊU CHẢY DO E coli TRÊN HEO SAU CAI SỮA” 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích Thử điều chế auto- vaccine phịng tiêu chảy E coli heo sau cai sữa. .. E coli gây bệnh tiêu chảy cho heo - Sản xuất auto- vaccine tiêm thử nghiệm heo sau cai sữa - Theo dõi đáp ứng miễn dịch heo thí nghiệm auto - vaccine điều chế - Theo dõi ảnh hƣởng auto- vaccine. .. isolate E coli from the diarrhoea feces and identify them by IMViC test, then serotype with F4, F5, F6 antiserum Second, selecte E coli isolates of serotype F4 or F5 to produce the autovaccine Third,