CẤU TRÚC mô của các cơ QUAN TRÊN cá lóc cấu TRÚC mô của các cơ QUAN TRÊN cá lóc

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN NGUYỄN THỊ NGỌC HƯỜNG C CẤ ẤU UT TR RÚ ÚC CM MÔ ÔC CỦ ỦA AC CÁ ÁC CC CƠ ƠQ QU UA AN NT TR RÊ ÊN NC CÁ ÁL LÓ ÓC C ((C Chhaannnnaa SSttrriiaattaa B Blloocchh,, 11779933)) Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN CHUYÊN NGÀNH BỆNH HỌC THỦY SẢN 2008 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN NGUYỄN THỊ NGỌC HƯỜNG C CẤ ẤU UT TR RÚ ÚC CM MÔ ÔC CỦ ỦA AC CÁ ÁC CC CƠ ƠQ QU UA AN NT TR RÊ ÊN NC CÁ ÁL LÓ ÓC C ((C Chhaannnnaa SSttrriiaattaa B Blloocchh,, 11779933)) Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN CHUYÊN NGÀNH BỆNH HỌC THỦY SẢN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PHẠM THANH LIÊM ĐẶNG THỤY MAI THY 2008 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Chương I GIỚI THIỆU Đồng Bằng Sông Cửu Long (ĐBSCL) vùng hạ lưu châu thổ sông Mê-Kông, xem vùng trù phú không Việt Nam mà cịn khu vực Đơng Nam Á Nơi có đặc trưng châu thổ thuộc miền nhiệt đới ẩm điển hình Với hệ thống sơng ngịi chằng chịt, ĐBSCL cịn vùng ni thủy sản lớn nước, sản lượng nuôi trồng thủy sản chiếm khoảng 65%, diện tích ni trồng khoảng 60% giá trị xuất thủy sản chiếm đến 51% nước (Dương Nhựt Long, 2003) Nhiều mặt hàng thủy sản vùng không đáp ứng nhu cầu nước mà cịn có giá trị xuất cao Trong đó, cá lóc (Channa striata Bloch, 1973) lồi cá quen thuộc người dân, nuôi phổ biến khắp tỉnh ĐBSCL, không đặc điểm dễ ni, chất lượng thịt ngon mà cịn chúng có giá trị dinh dưỡng cao phù hợp với thị hiếu người tiêu dùng Thời gian qua hiệu lợi nhuận thu từ hoạt động nuôi đối tượng góp phần cải thiện nâng cao điều kiện sống nhiều bà nông thôn ĐBSCL Trung Trong năm gần đây, nghề thủy sản ngày phát triển người dân khơng ngừng đưa mơ hình ni thâm canh vào nuôi trông thủy sản để tâmtăng Học @đếnTài học nghiên năngliệu suất.ĐH Vấn Cần đề nàyThơ dẫn liệu gia tăng khảtập năngvà ô nhiễm môi cứu trường, tượng bệnh đối tượng ni…Trước tình hình đó, việc nghiên cứu cấu trúc vi thể chức hoạt động quan cá khỏe thay đổi cấu trúc cá nhiễm bệnh cần thiết Ngày với phát triển khoa học kỹ thuật, nhiều phương pháp áp dụng để hỗ trợ cho việc nghiên cứu cá đối tượng thủy sản khác, mô học xem phương pháp hiệu Phương pháp mô học nhà khoa học vận dụng vào nghiên cứu họ nhiều động vật khác Nó xem khoa học nghiên cứu phát triển, cấu tạo hoạt động mô, quan thể Bằng phương pháp này, ta quan sát cấu trúc vi thể quan thể cá nói riêng giai đoạn phát triển chúng, chẩn đốn phịng bệnh động vật thủy sản Vì lý trên, đề tài “Cấu trúc mô quan cá lóc (Channa striata Bloch, 1973)” thực nhằm mục đích: thành lập sưu tập cấu trúc vi thể quan cá lóc khỏe tạo tiền đề cho nghiên cứu LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Nội dung đề tài Dùng phương pháp mô học để quan sát cấu trúc quan cá lóc khỏe gồm: da, cơ, mang, tim, gan, thận, tỳ tạng, dày ruột Phân tích mơ tả cấu trúc vi thể quan quan sát Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Chương II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược nghiên cứu mô học Việc nghiên cứu tế bào mô học kỷ XVII đến gần cuối kỷ XIX, tế bào học mô học thực coi ngành khoa học Trung Malpighi (1624-1694), số nhà khoa học Châu Âu có hàng loạt phát có giá trị việc nghiên cứu tế bào mô Vào khoảng năm 1675-1680, ông mô tả cấu tạo da, thận, lách số quan khác thể, số cấu trúc mang tên ông Năm 1677, người thợ kính Hà Lan Anatolie Leeuwenhoek chế tạo kính hiển vi có độ phóng đại đối tượng quan sát tới 300 lần Từ đó, ơng có khả mơ tả hồng cầu vận chuyển chúng mao mạch máu, phát tinh bào, nhìn thấy vạch sáng, tối sợi vân, cấu tạo sợi thần kinh, sợi gân Tuy vậy, việc nghiên cứu cấu tạo vi thể thể động vật tiến hành muộn so với việc nghiên cứu thực vật Vào năm 1825-1827, Purkinje mô tả nhân nỗn trứng gà sau ơng mơ tả bào tương tế bào Ít năm sau, Brown (1831) mô tả nhân tâmtrong Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu tế bào thực vật Những kết nghiên cứu nhà khoa học kể cơng trình nghiên cứu Dutrochet, Valentin, Schleiden giúp cho Schwann xây dựng công bố học thuyết tế bào vào năm 1839 (trích dẫn Phạm Phan Địch, 2004) Xanvier Bichat (1771 -1802), giảng viên dạy giải phẩu học phẩu thuật trường đại học Pari, đưa khái niệm chung mơ học động vật, từ mơ học trở thành phần môn giải phẩu học dạy cho sinh viên y khoa Tiếp theo đó, nhà động vật học vận dụng công cụ vào nghiên cứu họ nhiều động vật khác Trước tiến nghiên cứu mô học, nhà sinh vật học nhận ngành khoa học khơng hữu ích để nghiên cứu quan bình thường mà cịn sở cho việc nghiên cứu thay đổi bệnh lý mơ, quan bệnh (trích dẫn Hibiya, 1982) Thêm vào đó, có mặt parrafin góp phần không nhỏ nghiên cứu mô học Năm 1830, Carl Reichenbach phát sáp parrafin, chất dùng cho việc cố định mẫu mô vào khung để cắt mẫu dễ dàng Nó chất sáp màu trắng, khơng mùi, khơng vị, nhiệt độ nóng chảy khoảng 470C640C Parrafin khơng tan nước tan ete, benzen, tan LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com este Vì nhiệt độ nóng chảy parrafin tương đối thấp đơng nhanh nên q trình đúc khối mẫu mơ thực cách dễ dàng (http://en.wikipedia.org/wiki/Paraffin) Những thành công kỹ thuật mô học kỷ XIX việc chế tạo máy cắt lát mỏng (microtome), cho phép người ta nghiên cứu tỉ mỉ cấu trúc vi thể tế bào mô Máy microtome có khả cắt mẫu mơ thành lát mỏng (vài micromet) để quan sát cấu trúc vi thể mơ, quan kính hiển vi Đến cuối kỷ XIX, sau học thuyết tế bào đời ngành mơ học mơ tả bắt đầu phát triển mạnh Những thành phần khác quan mô nghiên cứu cẩn thận Từ kết đạt lĩnh vực nghiên cứu cấu tạo vi thể tế bào cho phép người ta tách việc nghiên cứu tế bào thành phần riêng biệt mô học gọi Tế bào học Học thuyết tế bào không sở việc nghiên cứu cấu trúc mơ bình thường mà sở việc nghiên cứu thay đổi bệnh lý mô, quan đồng thời sở việc nghiên cứu hoạt động sinh lý (Phạm Thanh Liêm, 2004) Trung Rudolph Virchow (1821 -1902), nhà nghiên cứu bệnh người Đức đề ý tưởng: có thểThơ đặc cấp độ tế cứu tâmxuất Học liệu “bệnh ĐH Cần @ trưng Tài liệu học biến tậpđổi vàở nghiên bào” Ý tưởng ơng đóng góp to lớn cho học thuyết tế bào cho phát triển mơ bệnh học Từ đó, mơ học khơng ứng dụng nghiên cứu cấu trúc mô bình thường mà cịn áp dụng nghiên cứu biến đổi cấu trúc quan bị nhiễm bệnh Những tiến mặt kỹ thuật mô thúc đẩy ngành mô học ngày phát triển mạnh mẽ chuyên sâu nhiều đối tượng khác Và đến thủy sản trở thành ngành mũi nhọn nhiều quốc gia mơ học trở thành công cụ thiếu để nghiên cứu đối tượng thủy sản 2.2 Nghiên cứu mô học cá Trên cá, nghiên cứu mô học mô bệnh học tiến hành nhiều giới từ cuối kỷ XX như: Vào năm 1982, Hibiya dùng mô học để mơ tả cấu trúc bình thường tất quan số lồi cá, đồng thời ơng phân tích biến đổi quan cá bị tác nhân gây bệnh xâm nhập Tác giả nghiên cứu loài cá quan trọng cá chép, cá hồi, cá chình (Anguilla anguilla, Anguilla japonicus) LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Cũng năm 1982, Groman dùng mô học để nghiên cứu cấu trúc mơ bình thường cá chẽm Nghiên cứu tiến hành có ý nghĩa tiền đề cho nghiên cứu Ông quan sát cấu trúc vi thể bình thường hệ hơ hấp, hệ thần kinh, hệ tuần hồn, hệ tiêu hoá, hệ sinh dục, hệ tiết,…ở nhiều giai đoạn cá từ cá giống đến cá năm tuổi Nash ctv (1986) dùng phương pháp mô học để xác định thay đổi vi thể quan cá bị vi khuẩn cơng (trong nghiên cứu bệnh vi khuẩn có liên quan đến dịch bệnh cá chẽm (Lates calcarifer) cá bống mú (Epinephalus tauvina) Nghiên cứu cho thấy nhiều thay đổi như: lớp biểu bì da bị thối hóa, vẩy bị mất, lớp bì trung tâm bó xuất huyết hoại tử dội, tế bào bị viêm, sưng, chứa đầy khuẩn lạc lớn gram âm Trên thận tỳ tạng xuất vùng mô tạo máu bị hoại tử hết tế bào máu trưởng thành, viêm cầu thận có xâm nhập lympho bào Gan, tuyến tụy xuất dịch viêm, hoại tử rãi rác trung tâm hoại tử… (trích dẫn Bùi Châu Trúc Đan, 2003) Trung Cũng vào năm 1986, Miyazaki ctv mô tả biến đổi mô bệnh học cá nheo Mỹ bị Ictalurus punctatus công với Ichthyobodo necator, Ambiphyrya ameiuri, Apiosoma micropteri, Heteropolaria colisarum Sau quan sát biểu kiểm tra ký sinh trùng, họ tiến hành làm tâmmẫu Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu mô da, mang quan nội tạng Kết cho thấy sợi mang bị nhiễm I necator nặng có phát triển mức tế bào biểu mô mang, thay đổi làm rối loạn hoạt động hô hấp mang ảnh hưởng đến q trình trao đổi chất thể Cịn A ameiuri bám vào bề mặt thể gây thói hóa da, A micropteri bám chặt vào mang làm thói hóa biểu mơ hơ hấp, H colisarum xâm nhập vào da hình thành vết loét bề mặt thể kể vi Nối tiếp nghiên cứu bệnh cá, Shariff (1989) tiến hành nghiên cứu mô bệnh học mắt cá chép đầu lớn (Anristichthys nobilis) bị nhiễm trùng mỏ neo (Lernaea piscinae) Kết nghiên cứu cho thấy thay đổi mô bệnh học mắt cá trùng mỏ neo xâm nhập phát triển nhiều tế bào mô mắt Rukyani (1990) nghiên cứu thay đổi mô bệnh học mang cá chép (Cyprinus carpio) bị nhiễm thích bào tử trùng (Myxobolus) Kết cho thấy: phiến mang bị dính lại, sưng viêm, xung huyết hoại tử mang cá bị túi thích bào tử trùng ký sinh nhiều (trích dẫn Phạm Thị Như Sang, 2006) Chinabut ctv (1991) nghiên cứu mô tả cấu trúc vi thể tất quan cá trê trắng Clarias batrachus Họ tiến hành nghiên cứu cá trê LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com trắng khỏe mô tả cấu trúc bình thường hệ quan như: hệ cơ, xương, hệ tiêu hóa, hệ tuần hồn, hệ tiết, hệ hô hấp, hệ sinh dục… Kết nghiên cứu sở so sánh cá bệnh Nghiên cứu đối tượng cá khỏe nghiên cứu Herrera (1996) cá rơ phi (Oreochromis niloticus) Ơng dùng mơ học để nghiên cứu tiến hành mô tả cấu trúc vi thể quan hệ da, hệ cơ, hệ xương, hệ tiêu hóa, hệ hơ hấp, hệ tiết, hệ sinh dục, hệ thần kinh, quan cảm giác, hệ tuần hồn,… Đối tượng thí nghiệm ông nghiên cứu cá rô phi giai đoạn từ tuần tuổi (dài từ 1.0-1.3cm) đến cá trưởng thành (dài từ 15-20cm) Tiếp theo đó, phương pháp mơ học Chinabut Robert áp dụng họ nghiên cứu bệnh bệnh lở loét (Epizootic Ulcerative Syndrome- EUS) cá vào năm 1999 Họ mô tả biến đổi cấu trúc quan da, cơ, thận, ống mật,… lồi: cá lóc, cá chép Ấn Độ, cá rơ phi, cá hồi, Ở nước ta nói chung Đại học Cần Thơ nói riêng có nghiên cứu mơ học đối tượng thủy sản, đặc biệt cá tra như: Trung Nguyễn Quốc Thịnh (2002) với đề tài “Nghiên cứu mô bệnh đốm trắng tâmnộiHọc Cần hypophthalmus)” Thơ @ Tài liệu vàcứu nghiên tạng liệu cá tra ĐH (Pangasius tiếnhọc hànhtập nghiên mô học cứu cá tra nuôi ao, bè quan như: gan, thận, tỳ tạng, tim, mang, cá khỏe cá bệnh Tác giả so sánh đưa kết biến đổi cấu trúc mô cá bệnh so với cá khỏe tượng xung huyết, xuất huyết hoại tử Bùi Châu Trúc Đan (2003) dùng phương pháp mô học nghiên cứu cấu trúc vi thể cá tra khỏe cá tra bệnh phù mắt quan: da, cơ, mang, tim, gan, thận, dày, mắt… Dựa đặc điểm phân tích từ cá bệnh, tác giả kết kuận cá tra bị bệnh phù mắt có tổn thương chủ yếu xung huyết, xuất huyết Các quan bị tổn thương nặng gan, tỳ tạng mắt với vùng hoại tử cấu trúc Cũng vào năm 2003, Trần Hồng Ửng tiến hành nghiên cứu thay đổi mô tỳ tạng số lượng tế bào bạch cầu cá tra có dấu hiệu trắng gan Tác giả tiến hành quan sát cấu trúc vi thể tỳ tạng cá tra bình thường sau so sánh với tỳ tạng cá chúng có dấu hiệu trắng gan, đồng thời tác giả so sánh thành phần phần trăm loại tế bào bạch cầu cá bệnh cá khỏe Kết cho thấy tỳ tạng cá bệnh có phần tủy trắng chiếm nhiều so với cá khỏe, cá bị bệnh nặng xuất nhiều vùng hoại tử, tỳ tạng chức sản sinh tế bào hồng cầu, bạch cầu… LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Đến năm 2004, Phan Thị Hừng dùng mô học nghiên cứu cá tra bị bệnh vàng da quan như: gan, thận tỳ tạng, đồng thời chị nghiên cứu biến động số lượng tế bào hồng cầu chúng bị bệnh Sau so sánh với cấu trúc mô quan cá bệnh với cá khỏe, tác giả cho biết cá tra bị bệnh vàng da có cấu trúc mơ gan, thận, tỳ tạng khơng thay đổi nhiều so với cá khỏe Tuy nhiên, số lượng hồng cầu máu cá bệnh giảm 50% so với cá khỏe nên lượng hồng cầu mao mạch gan, thận, tỳ tạng cá bệnh so với cá khỏe Trần Thị Ngọc Hân (2006) tiến hành “Khảo sát mô học cá tra (Pangasius hypophthalmus) bị bệnh mủ gan điều kiện gây cảm nhiễm” Với đề tài này, tác giả mô tả biến đổi cấu trúc mô quan cá tra giống gây cảm nhiễm vi khuẩn Edwarsiella ictaluri, tiến hành so sánh biến đổi cấu trúc mô cá phương pháp gây cảm nhiễm: ngâm tiêm Kết cho thấy thận tỳ tạng quan biến đổi cá bị vi khuẩn gây bệnh xâm nhập Trong mật độ vi khuẩn, cấu trúc mô mẫu thu phương pháp tiêm có biến đổi nhanh mẫu thu phương pháp ngâm… Trung Phạm Thị Như Sang (2006) nghiên cứu đặc điểm mô học cá tra nuôi ao bè thâm canh quan: gan, thận, tỳ tạng Kết phân tích cho thấy: cá ni ao hay ni bè có biến đổi vi thể tương đối giống tâmbiểu Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu bệnh Trên quan khảo sát có xuất trùng bào tử sợi Myxozoa ký sinh làm cho quan bị hoại tử chức 2.4 Vài nét cá lóc 2.4.1 Đặc điểm sinh học cá lóc Theo Phạm Văn Khánh, 2000 cá lóc phân loại sau: Bộ cá vược Perciformes Họ cá Lóc Channidae Giống cá Lóc Channa Lồi cá Lóc Channa striata Bloch, 1793 Cá lóc sống phổ biến đồng ruộng, kênh rạch, ao, hồ, sông… thích nghi với mơi trường nước đục, nước tù, nước lợ chịu đựng nhiệt độ 30oC (Ngô Trọng Lư Thái Bá Hồ, 2001) Do có khả hơ hấp phụ nên chúng sống lâu cạn cần ẩm ướt toàn thân Cá sống chủ yếu nước gặp môi trường nước lợ -7 o/oo (Phạm Văn Khánh, 2000) LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Cá lóc lồi cá thể có hình dạng trịn dài, thực quản ngắn vách dày, bên thực quản có nhiều nếp nhăn Dạ dày dạng túi, to, hình chữ Y Quan sát ống tiêu hóa cá có chứa cá chiếm 63,01%, tép 35,94%, ếch nhái 1,03% 0,02% bọ gạo, côn trùng mùn bã hữu Đặc điểm chứng tỏ loài cá ăn động vật điển hình (Dương Nhựt Long, 2003) Cá lóc sinh sản quanh năm thường tập trung từ tháng 5-7 dương lịch hàng năm đẻ rộ sau mưa lớn Sức sinh sản cá phụ thuộc vào trọng lượng cá cái: cá có trọng lượng từ 1-1,5kg sức sinh sản từ 15000020000 trứng/ tổ cá từ 5000-10000 trứng/ tổ đẻ (Kiểm ctv., 2004) Cá thường đẻ vào sáng sớm sau trận mưa rào hai ngày nơi yên tĩnh có nhiều động vật thủy sinh Trước lúc đẻ, cá dùng miệng thu rong, cỏ nước làm tổ hình trịn, đường kính khoảng 40-50cm Sau đẻ, cá bố mẹ nằm bảo vệ tổ đẻ Ở nhiệt độ 20-35 oC sau ngày trứng nở thành cá bột Trong môi trường tự nhiên, sau ngày cá tiêu hết nỗn hồng, cá cỡ 4-5cm bắt đầu tách khỏi đàn sống độc lập (Ngô Trọng Lư Thái Bá Hồ, 2001) 2.4.2 Tình hình ni cá lóc ĐBSCL Trung Cá lóc loài cá quen thuộc với bà vùng ĐBSCL khơng lồi cá có chất lượng thịt ngon, dễ ni mà cịn góp phần giúp bà tâmnơng Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu dân thoát nghèo ngày nâng cao sống vật chất họ Có thể nói An Giang Đồng Tháp hai tỉnh ni cá lóc nhiều ĐBSCL với mơ hình ni ni cá lóc đăng quần, ni mùng mùa lũ Các hình thức nuôi hiệu quả, vừa dễ tiến hành, người dân lại khơng cần có diện tích đất ni nên nuôi phổ biến Theo kết điều tra thời điểm tháng 4/2005, sản lượng cá lóc ni toàn tỉnh An Giang 6.911 tấn, tập trung nhiều huyện như: Phú Tân 2.593 tấn, Chợ Mới 812 tấn, Châu Đốc 742 tấn, An Phú 687 tấn, Thoại Sơn 616 tấn, Long Xuyên 529 tấn, Châu Phú 494 tấn,… Các hình thức ni chủ yếu ni ao nuôi vèo, cụ thể sau: Nuôi ao có diện tích: 64,7 ha, sản lượng 2.543 tấn, chiếm 36,8 %, Ni có diện tích: 9,758 ha, sản lượng 2.721 chiếm 39,4 % Các hình thức nuôi khác như: Nuôi bè, nuôi chân ruộng 23,8 % (Trần Phùng Hồng Tuấn, 2005) Ngồi mơ hình ni mùa lũ nêu cá lóc cịn nhiều hộ dân Bến Tre nuôi lưới với qui mơ cơng nghiệp có hiệu LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com a b Hình 4.36 Đoạn thận cổ (H&E, 100X) a Đoạn thận cổ; b Tế bào biểu mô Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu c d b a Hình 4.37 Đoạn gần tâm thứ thứ hai (H&E, 100X) a Đoạn gần tâm thứ nhất; b Đoạn gần tâm thứ hai; c Vùng lược đoạn gần tâm thứ nhất; d Vùng lược đoạn gần tâm thứ hai 43 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com a b Hình 4.38 Đoạn thận xa (H&E, 100X) a Ống thận xa; b Tế bào biểu mô Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu a b c Hình 4.39 Ống góp chung (H&E, 100X) a Ống góp chung lớn; b Ống góp chung nhỏ; c Tế bào biểu mô 44 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 4.9 Tỳ tạng Cũng mô tả Herrera (1996) cá rô phi Chinabut ctv (1991) cá trê trắng, tỳ tạng cá lóc quan riêng biệt nằm gần ruột cá bao màng treo ruột Nó có dạng bầu dục với mặt phẳng mặt lồi phía ngược lại, có màu đỏ sậm hay đỏ tươi (Hình 3) Thành phần cấu tạo chủ yếu tỳ tạng gồm tủy đỏ, tủy trắng trung tâm đại thực bào sắc tố tương tự mô tả Hibiya (1991) số loài cá xương Bao phủ bên tỳ tạng lớp tế bào biểu mô vẩy đơn mô liên kết, bên có nhiều mao mạch (Hình 4.41) Khi vào tỳ tạng, động mạch rẽ nhánh hình thành mạch máu nhỏ cuối tạo thành mạng lưới mao mạch bên tỳ tạng Tủy đỏ tủy trắng tỳ tạng cá nhỏ gần đồng nhất, cịn cá lớn hai thành phần dễ dàng phân biệt kính hiển vi (Hibiya, 1982) Khi quan sát lát cắt ngang tỳ tạng phương pháp nhuộm Haematoxylin Eosin, phần tủy trắng nằm bên bắt màu sậm phần tủy đỏ, tủy đỏ tạo thành mạng lưới bao quanh tủy trắng (Hình 4.40) Các đặc điểm mô tả cá chẽm, cá trê trắng cá rô phi (Groman, 1982, Chinabut ctv., 1991 Herrera, 1996) Trung tâmTủy Học liệucấu ĐHtạoCần Thơ Tàichứa liệuđầyhọc và(Hình nghiên đỏ từ nhiều mao@ mạch tập tế máu 4.42) cứu Theo Hibiya (1982), tế bào máu có tủy đỏ bao gồm hồng cầu, nguyên hồng cầu đại thực bào Còn tủy trắng có tính ưa bazơ chứa tế bào lympho, tế bào hồng cầu đại thực bào (Hình 4.43) Ngồi ra, mẫu tỳ tạng cá lóc quan sát nhiều trung tâm đại thực bào sắc tố nằm phần tủy trắng (Hình 4.40, 4.43) Theo Roberts (1975), trung tâm đại thực bào sắc tố (TTĐTBST) điểm có màu nâu vàng nâu đen dễ nhận biết, tạo thành tập hợp tế bào sắc tố tỳ tạng, thận số gan Ơng cho biết vật chất sắc tố TTĐTBST gồm có số sắc tố melanin, sắc tố mỡ sắc tố máu (haemosiderin) (trích dẫn Bucke ctv., 1992) Nguồn gốc chức phận cấu thành TTĐTBST hồn tồn khơng rõ, nhiên người ta biết haemosiderin sắc tố chứa tế bào hồng cầu Khi tế bào hồng cầu suy yếu sản phẩm suy thối vật chất hư hỏng chúng thực bào tỳ tạng đại thực bào (Bucke ctv., 1992) Kranz (1989) nghiên cứu cá bơn cho biết TTĐTBST có chức quan bảo vệ không đặc hiệu, thay đổi số lượng TTĐTBST tỳ tạng cá phản ánh biến đổi hệ thống thực bào phần hệ thống miễn dịch tế bào không đặc hiệu (trích dẫn Bucke ctv., 1992) 45 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Ngoài ra, Ferguson (1976) tìm thấy tỳ tạng cá có tế bào máu nhiều đại thực bào thận trước thận sau Từ đặc điểm này, ông đưa kết luận chức tỳ tạng phân hủy tế bào hồng cầu già hình thành tế bào máu (trích dẫn Herrera, 1996) Bên cạnh đó, quan sát cấu trúc vi thể tỳ tạng cá lóc kính hiển vi cịn có diện nhiều trung tâm đại thực bào sắc tố, nói tỳ tạng cá đóng vai trò quan miễn dịch Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu 46 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com b a c Hình 4.40 Cấu tạo tỳ tạng cá lóc (H&E, 10X) a.Tủy đỏ; b Tủy trắng; c Các trung tâm đại thực bào sắc tố Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu b a Hình 4.41 Lớp biểu mơ quanh tỳ tạng cá lóc (H&E, 100X) a Lớp biểu mô; b Các mao mạch chứa hồng cầu 47 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com a Hình 4.42 Cấu trúc tủy đỏ (H&E, 100X) a Mao mạch chứa hồng cầu Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu b a Hình 4.43 Cấu trúc tủy trắng (H&E, 100X) a Trung tâm đại thực bào sắc tố; b Mao mạch chứa hồng cầu 48 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Chương V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 5.1 Kết luận Kết phân tích mơ học 30 cá lóc thành lập sưu tập với 114 tiêu bản, ghi nhận lại 44 hình ảnh đặc trưng minh họa cho cấu trúc vi thể quan gồm: da, cơ, dày, ruột, gan, mang, tim, thận tỳ tạng Cấu trúc vi thể hệ quan như: da, cơ, thận, tỳ tạng, dày, gan mang quan sát mơ tả gần hồn chỉnh Đới với ruột cá, phần ruột trước ruột sau chưa quan sát chưa mô tả thành phần cấu tạo Ngồi ra, cấu trúc xoang tĩnh mạch tim van tim chưa phân tích mơ tả 5.2 Đề xuất Tiếp tục nghiên cứu cấu trúc vi thể quan chưa mô tả đầy đủ đề tài ruột trước, ruột sau tim, hệ quan khác cá lóc để thành lập sưu tập hình ảnh phong phú Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu 49 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TÀI LIỆU THAM KHẢO Trung Bucke ctv., 1992 Quantitative assessment of melanomacrophage centres (MMCs) in dab Limanda limanda along a pollution transect in the German Bight http://www.fisheries.go.th/aahri/Healthnew/AAHRI/AAHRI/Topics/Newle tter/art29.htm (cập nhật ngày 26/05/2008) Bùi Châu Trúc Đan, 2003 Bước đầu nghiên cứu đăc điểm mô bệnh học bệnh phù mắt cá tra (Pangasius hypophthalmus) Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ Chinabut S and R.J Robert, 1999 Pathology and Histopathology of Epizootic Ulcerative Syndrome (EUS)” Aquatic Animal Health Research Insitute, Department of Fisheries, Kasetsart University Campus, Jatujak, Bangkok 10900, Thailand 116pp Chinabut S., C Limsuwan and P Kitsawat, 1991 Histology of the walking catfish, Clarias batrachus International Development Research Center, Canada, 96pp Đặng Thụy Mai Thy, 2002 “Bước đầu thử nghiệm ương cá lóc đen cá lóc mơi trề thức ăn có hàm lượng đạm khác nhau” Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ Dương Nhựt Long, 2003 Giáo trình Kỹ thuật ni thủy sản nước Khoa Thủy Sản trường Đại Học Cần Thơ Groman D., 1982 Histology of the Striped Bass Department of Pathobiology of @ Connectcut 06268 cứu tâm Học liệu ĐHUniversity Cần Thơ Tài liệuStorrs, học Connecticut tập nghiên Bethesda, Maryland, 115pp Herrera A.A , 1996 Histology of Tilapia (Oreochromis niloticus) Bureau of Fisheries & Agriculture, University of the Philippines, Quezon City, Philippines 1101, 86pp Hibyia T., 1982 An atlas of Fish Histology (Normal and Pathological Features) College of Agriculture and Veterinary Medicine, Nihon Univ Tokyo, Japan, 147pp 10 http://en.wikipedia.org/wiki/Paraffin cập nhật ngày 06/02/2008 11 Miyazaki T., W.A Rogers, and J.A Plumb, 1986 Histopathological Studies on Parasitic Protozoan Diseases of the Channel Catfish in the United States Faculty of Fisheries, Mie University Journal of fish diseases, No 13: 1-9, November 15, 1986 12 Ngô Thị Hạnh, 2001 Tiếp tục nghiên cứu số tiêu sinh học, biện pháp kích thích sinh sản nhân tạo ương ni cá lóc (Channa striatus Bloch, 1797) Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ 13 Ngô Trọng Lư Thái Bá Hồ, 2001 Kỹ thuật nuôi thủy đặc sản nước (tập 1) Nhà Xuất Bản Nông Nghiệp Hà Nội, 151trang 14 Nguyễn Quốc Thịnh, 2002 Bước đầu nghiên cứu mô bệnh học bệnh đốm trắng nội tạng cá tra (Pangasius hypophthalmus) Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ 50 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Trung 15 Nguyễn Văn Kiểm, 2004 Giáo trình Kỹ thuật sản xuất cá giống Khoa Thủy Sản trường Đại Học Cần Thơ 16 Phạm Phan Địch, Trịnh Bình Đỗ Kính, 2004 Mơ Học Nhà Xuất Bản Y Học Hà Nội, 739 trang 17 Phạm Thanh Liêm Trần Đắc Định, 2004 Giáo trình Phương pháp nghiên cứu sinh học cá Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ 18 Phạm Thị Như Sang, 2006 Khảo sát mô học số quan cá tra (Pangasius hypophthalmus) nuôi ao bè thâm canh Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ 19 Phạm Văn Khánh, 2000 Kỹ thuật ni số lồi cá xuất (Lóc, Lóc bơng, Bống tượng, Tra, Basa) Nhà Xuất Bản Nông Nghiệp Tp Hồ Chí Minh, 53 trang 20 Phan Phương Loan, 2000 Bước đầu thử nghiệm ương ni cá lóc đen (Ophiocephalus striatus) Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ 21 Phan Thị Hừng, 2004 “Nghiên cứu cấu trúc mô biến động số lượng tế bào hồng cầu cá tra (Pangasius hypophthalmus) bị bệnh vàng da” Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ 22 Trần Hồng Ửng, 2003 “Bước đầu xác định thay đổi số lượng tế bào bạch cầu mô tỳ tạng cá tra (Pangasius hypophthalmus) bệnh trắng gan” Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ 23 Trần Phùng Hồng Tuấn, 2005 Một số mơ hình ni thủy sản có hiệu kinh tế cao mùa nước http://sonongnghiep.angiang.gov.vn/wp_ctg_ud/mohinh%20hq/mohinhthu tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu ysan.htm Cập nhật ngày 29/01/2008 24 Trần Quốc, 2007 Nuôi cá lóc cơng nghiệp lưới http://www.bentre.gov.vn/index.php?option=com_content&task=view&id=419 &Itemid=42 Cập nhật ngày 29/01/2008 25 Trần Thị Ngọc Hân, 2006 Khảo sát mô học cá tra (Pangasius hypophthalmus) bị bệnh mủ gan điều kiện gây cảm nhiễm Luận văn tốt nghiệp đại học, Khoa Thủy Sản, trường Đại Học Cần Thơ 51 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PHỤ LỤC Trung tâm Cơng thức pha chế số hóa chất sử dụng Formol trung tính (Neutral buffered formalin: NBF) Formalin 100ml NaH2PO4 4g Na2HPO4 6,5g Nước cất 900ml Dung dịch cố định Buoin’s Acid picric bão hòa 750ml Formol 125ml Glacial acetic acid 50ml Harris’s haematoxyline Haematoxyline 5g 100% alcohol 50ml Potassium alum 50g Nước cất 1lít Mercuric oxide 2,5g Glacial acetic acid 40ml Hịa tan Potassium alum nước ấm Hòa tan Haematoxyline cồn, sau đổ vào dung dịch Potassium alum vừa pha trên, thêm Mercuric oxide vào khoấy Để ngụi, thêm Glacial acid vào lọc lại Eosin/Phloxine Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu Stock Eosin (1% Eosin Y nước) 100ml Stock Phloxine (1% Phloxine B nước) 10ml 95% Ethanol 780ml Glacial acetic acid 4ml Acid/ Alcohol Alcohol 70% 990ml Hydrochloric acid 10ml 2% Potassium acetate Potassium acetate 20g Nước cất 1lít 52 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM TẠ  Em xin gởi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến thầy Phạm Thanh Liêm cô Đặng Thụy Mai Thy tận tình hướng dẫn, giúp đỡ bảo em suốt thời gian thực đề tài Em thành thật biết ơn cô Nguyễn Thị Thu Hằng Bùi Thị Bích Hằng tạo điều kiện thuận lợi nhiệt tình giúp đỡ em hoàn thành tốt đề tài Xin cảm ơn anh Cao Tuấn Anh q thầy cơ- cán thuộc môn Sinh học Bệnh Thủy Sản, khoa Thủy Sản trường Đại Học Cần Thơ quan tâm giúp đỡ chia sẻ khó khăn em thực đề tài Cảm ơn gia đình, người thân thương em luôn bên cạnh ủng hộ chia sẻ với em khó khăn suốt bốn năm đại học khoảng thời gian thực đề tài Và em xin gởi lời cảm ơn chân thành đến bạn thuộc tập thể lớp Bệnh Học Thủy Sản- K30 quan tâm nhiệt tình giúp đỡ em suốt thời gian qua Xin chân thành cảm ơn! Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu i LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TÓM TẮT  Đề tài tiến hành từ tháng 02/2008 đến tháng 05/2008 với mục tiêu thành lập sưu tập cấu trúc vi thể quan cá lóc làm sở cho nghiên cứu mô bệnh học Mẫu cá lóc khỏe có trọng lượng từ 100-200g thu chợ Tân An, quận Ninh Kiều, TP Cần Thơ phân tích phịng thí nghiệm mơn Sinh học Bệnh Thủy Sản khoa Thủy Sản trường Đại học Cần Thơ Bằng phương pháp phân tích mơ học, cấu trúc vi thể quan cá lóc khỏe quan sát mô tả chi tiết Sau giải phẩu, mẫu quan da-cơ cố định dung dịch formol trung tính 10% cịn quan khác dày, ruột, gan, mang, tim, thận, tỳ tạng cố định dung dịch Bouin’s Các bước qui trình xử lý mẫu, đúc khối, cắt nhuộm mẫu thực theo qui trình phân tích phịng thí nghiệm Mơ bệnh học, khoa Thủy Sản Kết phân tích mơ học 30 cá lóc khỏe thành lập sưu tập với 114 tiêu hệ quan gồm: da, cơ, gan, dày, ruột, tim, mang, thận, tỳ tạng Luận văn ghi nhận lại 44 hình ảnh đặc trưng minh họa cho cấu trúc vi thể hệ quan kể Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu ii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC  Trang LỜI CẢM TẠ i TÓM TẮT ii MỤC LỤC .iii DANH SÁCH HÌNH v Chương I: GIỚI THIỆU Chương II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Sơ lược nghiên cứu mô học 2.2 Nghiên cứu mô học cá 2.4 Vài nét cá lóc 2.4.1 Đặc điểm sinh học cá lóc 2.4.2 Tình hình ni cá lóc ĐBSCL 2.4.3 Những nghiên cứu cá lóc .10 Chương III: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 3.1 Thời gian 11 Trung tâm Học 3.2 liệu Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu ĐịaĐH điểm 11 3.3 Phương pháp nghiên cứu 11 3.2.1 Vật liệu nghiên cứu 11 3.2.2 Phương pháp 11 Chương IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 4.1 Da 18 4.2 Cơ 21 4.3 Dạ Dày .24 4.4 Ruột 28 4.5 Gan 31 4.6 Mang 35 4.7 Tim 38 4.8 Thận 42 4.9 Tỳ tạng .47 Chương V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 49 5.1 Kết luận 49 5.2 Đề xuất .49 iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 PHỤ LỤC .52 Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập nghiên cứu iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH HÌNH Trang Trung Hình Các quan cá lóc khỏe 12 Hình 4.1 Cấu trúc da cá lóc (H&E, 40X) 17 Hình 4.2 Cấu trúc lớp biểu bì (H&E, 40X) 17 Hình 4.3 Cấu trúc lớp bì da cá lóc (H&E, 40X) 18 Hình 4.4 Cấu trúc lớp hạ bì da cá lóc (H&E, 100X) 18 Hình 4.5 Lát cắt ngang vân cá lóc (H&E, 100X) 20 Hình 4.6 Lát cắt dọc vân cá lóc (H&E, 100X) 20 Hình 4.7 Lắt cắt ngang phần dày cá lóc (H&E, 100X) 21 Hình 4.8 Lắt cắt ngang phần ruột cá lóc (H&E, 100X) 21 Hình 4.9 Cấu trúc thành dày cá lóc (H&E, 5X) 23 Hình 4.10 Các tế bào biểu mô niêm mạc dày (H&E, 100X) 23 Hình 4.11 Lớp trơn thành dày cá lóc (H&E, 20X) 24 Hình 4.12 Cấu trúc lớp niêm mạc dày cá lóc (H&E, 40X) 24 Hình 4.13 Tuyến dày cá lóc (H&E, 40X) 25 Hình 4.14 Các tế bào tuyến dày cá lóc (H&E, 100X) 25 Hình 4.15 Lát cắt ngang ruột cá lóc (H&E, 5X) 27 Hình 4.16 Cấu trúc thành ruột cá lóc (H&E, 20X) 27 Hình 4.17 Cấu trúc nếp gấp ruột cá lóc (H&E, 100X) 28 Hình 4.18 Cấu trúc lớp thành ruột cá lóc (H&E, 20X) 28 Hình 4.19 Cấu trúc màng ngồi gan cá lóc (H&E, 40X) 30 4.20liệu Các mao gan@ cá lóc (H&E, 30 tâmHình Học ĐHmạch Cầntrong Thơ Tài liệu100X) học tập nghiên Hình 4.21 Cấu trúc tuyến gan tụy (H&E, 100X) 31 Hình 4.22 Tĩnh mạch gan tuyến gan tụy (H&E, 100X) 31 Hình 4.23 Trung tâm đại tực bào sắc tố gan (H&E, 100X) 32 Hình 4.24 Ống tụy gan cá lóc (H&E, 100X) 32 Hình 4.25 Cấu trúc mang cá lóc (H&E, 5X) 34 Hình 4.26 Động mạch vào mang (H&E, 40X) 34 Hình 4.27 Phần sợi mang sơ cấp (H&E, 100X) 35 Hình 4.28 Cấu trúc sợi mang thứ cấp (H&E, 100X) 35 Hình 4.29 Thành tâm thất (H&E, 20X) 38 Hình 4.30 Thành tâm nhĩ (H&E, 100X) 38 Hình 4.31 Các sợi tim cá lóc (H&E, 100X) 39 Hình 4.32 Phần trơn bầu động mạch (H&E, 100X) 39 Hình 4.33 Thận trước cá lóc (H&E, 40X) 41 Hình 4.34 Mặt cắt dọc thận cá lóc (H&E, 40X) 42 Hình 4.35 Quản cầu thận cá lóc (H&E, 100X) 42 Hình 4.36 Đoạn thận cổ (H&E, 100X) 43 Hình 4.37 Đoạn gần tâm thứ thứ hai (H&E, 100X) 43 Hình 4.38 Đoạn thận xa (H&E, 100X) 44 Hình 4.39 Ống góp chung (H&E, 100X) 44 Hình 4.40 Cấu tạo tỳ tạng cá lóc (H&E, 10X) 46 Hình 4.41 Lớp biểu mơ quanh tỳ tạng cá lóc (H&E, 100X) 46 Hình 4.42 Cấu trúc tủy đỏ (H&E, 100X) 47 Hình 4.43 Cấu trúc tủy trắng (H&E, 100X) 47 cứu v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... cá lóc 2.4.1 Đặc điểm sinh học cá lóc Theo Phạm Văn Khánh, 2000 cá lóc phân loại sau: Bộ cá vược Perciformes Họ cá Lóc Channidae Giống cá Lóc Channa Lồi cá Lóc Channa striata Bloch, 1793 Cá lóc. .. chưa phân biệt quan lympho, mô tạo máu mô gian thận quan sát kính hiển vi, cấu trúc thận trước cá lóc trơng giống cấu trúc tỳ tạng cá Điều cho biết thận trước cá lóc giữ chức quan tạo máu Trung... động mô, quan thể Bằng phương pháp này, ta quan sát cấu trúc vi thể quan thể cá nói riêng giai đoạn phát triển chúng, chẩn đốn phịng bệnh động vật thủy sản Vì lý trên, đề tài ? ?Cấu trúc mô quan cá