TIỂU LUẬN BỆNH học PHÂN tử NIPT

MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG I CÁC BIỆN PHÁP CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH GIÚP PHÁT HIỆN DỊ TẬT THAI NHI 2 CHƯƠNG II ỨNG DỤNG KỸ THUẬT NIPT TẠI VIỆT NAM 5 KẾT LUẬN 9 LỜI MỞ ĐẦU Dị tật thai nhi là những khiếm k.

MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU .1 CHƯƠNG I CÁC BIỆN PHÁP CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH GIÚP PHÁT HIỆN DỊ TẬT THAI NHI .2 CHƯƠNG II ỨNG DỤNG KỸ THUẬT NIPT TẠI VIỆT NAM .5 KẾT LUẬN LỜI MỞ ĐẦU Dị tật thai nhi khiếm khuyết thể em bé mắc phải bụng mẹ Nhờ có phát triển y học đại việc phát dị tật thai nhi từ bụng mẹ nhờ vào xét nghiệm sàng lọc trước sinh có độ xác cao với nhiều phương pháp y học Chẩn đoán trước sinh giúp thai phụ phát sớm thai kỳ bị dị tật bẩm sinh, bệnh lý gen trẻ giảm thiểu trí tuệ: hội chứng Down, Trisomy 13 (3 nhiễm sắc thể số 13), Trisomy 18 (3 nhiễm sắc thể số 18), bệnh Thalassemia từ bác sĩ tư vấn cho thai phụ gia đình phương hướng theo dõi thai kỳ chấm dứt thai kỳ Việc chẩn đốn sớm dị tật thai nhi sửa chữa sau sinh sứt mơi, chẻ vịm, tay chân khoèo giúp cho việc chuẩn bị tâm lý tốt cho thai phụ gia đình Hiện có 07 biện pháp chẩn đốn trước sinh phát sớm dị tật thai nhi: Chẩn đoán di truyền tiền làm tổ; Siêu âm; Sinh thiết gai rau; Chọc hút nước ối; Chọc hút máu cuống rốn; Xét nghiệm máu mẹ (triple test, quadtro test); Xét nghiệm DNA tự máu mẹ (xét nghiệm di truyền không xâm lấn NIPT) Trong biện pháp chẩn đoán trước sinh, xét nghiệm di truyền không xâm lấn NIPT xem biện pháp tốt phát dị tật thai nhi từ lúc tuổi thai nhỏ, - 10 tuần tuổi Xuất phát từ thực tiễn đó, em xin chọn đề tài “Ứng dụng kỹ thuật NIPT Việt Nam” CHƯƠNG I CÁC BIỆN PHÁP CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH GIÚP PHÁT HIỆN DỊ TẬT THAI NHI 1.1 Xét nghiệm di truyền tiền làm tổ Kỹ thuật xét nghiệm di truyền tiền làm tổ sử dụng để xác định bất thường di truyền phôi tạo nhờ thụ tinh ống nghiệm/tiêm tinh trùng vào bào tương (IVF/ICSI) trước chuyển phôi vào tử cung mẹ Xét nghiệm di truyền tiền làm tổ giúp sàng lọc phơi có chất lượng tốt để cấy vào tử cung, tăng khả thành công, giảm số chu kỳ thụ tinh nhân tạo, chẩn đoán bệnh di truyền liên kết NST X đồng thời xác định giới tính 1.2 Siêu âm Siêu âm chẩn đốn giúp phát hiện:  Dị tật đầu: Giãn não thất, não úng thuỷ, dị tật ống thần kinh (thoát vị não, màng não), thai vô sọ  Dị tật tim: Thiểu sản thất trái, đảo gốc động mạch, thiểu sản vách ngăn, hội chứng Ebstein, tứ chứng Fallot, động mạch chủ cưỡi ngựa  Dị tật lồng ngực: Thốt vị hồnh, phổi tuyến nang  Dị tật hệ tiêu hoá: Teo thực quản, thoát vị rốn, khe hở thành bụng  Dị tật thận - tiết niệu: Thận ứ nước, thận đa nang, u buồng trứng  Các dị tật khác: Loạn sản sụn xương, thiểu sản sụn xương, khe hở đốt sống  Siêu âm đo độ mờ da gáy xương mũi đạt kết xác thời điểm đo từ 11 tuần đến 13 tuần ngày, tầm sốt ban đầu xem thai nhi có gặp bất thường nhiễm sắc thể hay mắc hội chứng Down hay không 1.3 Sinh thiết gai rau Sinh thiết rau thai thực giai đoạn đầu thai kỳ, từ 12 – 14 tuần tuổi, giúp kiểm tra dị tật thai nhi bố mẹ mắc bệnh di truyền theo gia đình, người mẹ 35 tuổi Phương pháp thực cách lấy mẫu bánh rau từ tử cung catheter (một ống dài) hay kim chọc qua đường bụng hay đường âm đạo thai phụ hướng dẫn siêu âm 1.4 Chọc hút nước ối Chọc ối thường thực thai 16 tuần tuổi trở lên Chọc ối sinh thiết gai rau thực thai phụ có nguy cao sinh em bé có rối loạn di truyền, bố và/hoặc mẹ có bệnh di truyền, tiền sử sinh mắc dị tật thai phụ 35 tuổi Chọc ối thực cách dùng kim nhỏ, tiêm xuyên qua thành bụng vào tử cung hướng dẫn siêu âm hút lượng nhỏ nước ối cần thiết đủ để chẩn đoán Cơ thể thai phụ tái tạo lại lượng nước ối hút Phần lớn, em bé không bị ảnh hưởng sau trình làm thủ thuật Một số thai phụ bị đau bụng nhẹ sau trình thực 1.5 Chọc hút máu cuống rốn Phương pháp chọc dò lấy máu cuống rốn để chẩn đoán bất thường di truyền thai nhi theo định bác sĩ khám thai Kỹ thuật thực thai 11 - 13 tuần tuổi Dưới hướng dẫn siêu âm, đầu kim tiêm đưa qua vách bụng thai phụ vào tử cung, tiếp đến vào mạch máu dây rốn, khoảng 1cm từ chỗ Một lượng máu nhỏ lấy để xét nghiệm cho kết chẩn đoán trường hợp nghi ngờ thai bị thiếu máu, thai nhiễm bệnh sởi, nhiễm toxoplasma, mụn rộp thai chậm phát triển Nguy xảy tai biến cho thai nhi thực phương pháp cao, từ 1-2% 1.6 Xét nghiệm máu mẹ Double test Triple test, Quadtro test Double test: PAPP-A + β-hCG tự Triple test: AFP + hCG + Estriol Quadtro test: AFP + hCG + Estriol + Inhibin A Trong đó:  PAPP-A (Pregnancy Associated Plasma Protein A) loại glycoprotein thai tiết có huyết mẹ  AFP: Alpha-fetoprotein loại protein gan bé tiết  Hormone hCG: sinh từ thai  Estriol: nội tiết tố thai gan bé  Inhibin A: hormone sản xuất thai buồng trứng Double test kết hợp đo độ mờ da gáy siêu âm, tuổi mẹ , tuổi thai, nhằm đánh giá nguy bệnh bất thường nhiễm sắc thể hội chứng Down, Edwards (Trisomy 18) Patau (Trisomy 13) Xét nghiệm sàng lọc Double test thường thực vào quý I, tức khoảng tháng đầu thai kỳ Double thực tốt khoảng tuần thứ 11 - 13 thai kỳ, tốt tuần thai thứ 12 - 13 Triple test thực thai nhi 15 - 20 tuần tuổi để tìm nguy bị dị tật ống thần kinh Tuy nhiên, để có kết xác nên thực xét nghiệm vào tuần thai thứ 16 - 18 Quadtro test (còn gọi tắt Quad test) thực tuần 15 tuần 20 thai kỳ cách lấy máu từ tĩnh mạch cánh tay thai phụ Kết quadtro test cho thấy nguy dị tật thai nhi sai lệch nhiễm sắc thể, chẳng hạn tật nứt đốt sống hay hội chứng Down (3 NST số 21), Hội chứng Edwards (3 NST số 18) Đối tượng cần xét nghiệm Quad test tương tự Triple test nêu 1.7 Xét nghiệm DNA máu mẹ Xét nghiệm DNA máu mẹ gọi xét nghiệm di truyền không xâm lấn NIPT NIPT xét nghiệm DNA thai máu mẹ để sàng lọc bất thường NST thai: NST 21, NST số 13, NST số 18, CHƯƠNG II ỨNG DỤNG KỸ THUẬT NIPT TẠI VIỆT NAM Trước đây, phương pháp sàng lọc NIPT chưa đời, xét nghiệm sàng lọc truyền thống (Double test, Triple test) thực để tầm sốt thai nhi có nguy bị dị tật hay không vào tuần thai thứ 12 trở Tuy nhiên, phát dị tật bẩm sinh thai nhi trễ khiến việc can thiệp, khắc phục trở nên khó khăn khơng cịn đạt hiệu cao Theo kết thống kê dân số Việt Nam năm 2017, năm nước ta có 41.000 trẻ bị dị tật bẩm sinh, tương đương 13 phút có trẻ mắc dị tật bẩm sinh chào đời Trong có khoảng 2.200 trẻ mắc bệnh tan máu bẩm sinh Thalassemia, 15.000-30.000 trẻ bị thiếu men G6PD, 1.4001.800 trẻ mắc hội chứng Down, 200-250 trẻ mắc hội chứng Edwards nhiều bệnh lý di truyền, dị tật bẩm sinh khác Trong 4.000 bệnh đơn gen phát có 25 bệnh di truyền trội phổ biến ảnh hưởng nghiêm trọng đến chất lượng sống trẻ Tần suất cộng gộp 25 bệnh di truyền trội theo ước tính 1/600, cao hội chứng Down (1/700) Khác với bệnh di truyền lặn, bệnh di truyền trội nguy hiểm cần bố mẹ mang gen di truyền bệnh cho với tỷ lệ 50% Nhóm bệnh chiếm gần 60% bệnh trội đơn gen nặng sau sinh với phần lớn nguyên nhân đột biến xuất thai hình thành, khơng di truyền từ cha mẹ sang (de novo) Đột biến de novo thai gia tăng theo tuổi cha (không liên quan đến tuổi mẹ), nghĩa cha lớn tuổi (> 40 tuổi), nguy sinh mắc bệnh di truyền trội đột biến de novo cao Đó lý cần sàng lọc, tầm soát sớm bệnh di truyền trội để phát sớm, can thiệp kịp thời điều trị hiệu cho trẻ sau sinh, có phương án quản lý thai kỳ tốt Một số dị tật bẩm sinh nhẹ, trẻ sinh giống trẻ bình thường cần can thiệp, hỗ trợ điều trị Nhưng có số dị tật bất thường di truyền gây hậu nghiêm trọng cho phát triển thể chất trí tuệ khiến trẻ cần chăm sóc can thiệp y tế suốt đời Sau nhiều năm, phương pháp sàng lọc NIPT giúp giải mặt hạn chế phương pháp sàng lọc truyền thống Xét nghiệm NIPT cho phép sàng lọc phát dị tật thai nhi từ sớm, từ tuần thai thứ 09 Từ phát nguy dị tật thai nhi sớm, can thiệp kịp thời Phương pháp sàng lọc NIPT an toàn không gây ảnh hưởng xấu đến thai phụ thai nhi Bởi xét nghiệm NIPT cần lấy 7-10ml máu thai phụ để tách chiết DNA ngoại bào, sau giải trình tự DNA ngoại bào phân tích phương pháp đếm nhằm phát dị tật bẩm sinh phổ biến bất thường số lượng nhiễm sắc thể Phương pháp sàng lọc NIPT cịn đánh giá cao độ xác so với phương pháp sàng lọc truyền thống Nghiên cứu cho thấy, Double test, Triple test cho kết xác khoảng 80-90%, tỷ lệ bỏ sót bệnh cao Trong đó, phương pháp sàng lọc NIPT xét nghiệm dựa vật liệu di truyền DNA nên không bị ảnh hưởng nhiều từ yếu tố mơi trường Đồng thời, phương pháp cịn thực thuật tốn phân tích giải trình tự gen hệ hệ thống thiết bị xét nghiệm cơng nghệ cao với tỉ lệ xác ấn tượng 99% Vì thế, thai phụ hồn tồn tin tưởng áp dụng phương pháp Phương pháp sàng lọc NIPT có thời gian thực ngắn, sau từ đến ngày kể từ sau ngày nhận mẫu máu thai phụ có kết xét nghiệm Ngồi phương pháp sàng lọc NIPT tồn số nhược điểm như: Kết âm tính có nghĩa gần thai nhi không bị ảnh hưởng rối loạn NST mà xét nghiệm tìm kiếm Tuy nhiên có tỷ lệ bỏ sót < 1% trisomy 21 cao bất thường NST gặp khác Ngồi thai mắc bất thường NST không thuộc khả phát xét nghiệm bất thường không liên quan NST Vì tất sản phụ cần siêu âm kiểm tra hình thái thai nhi khoảng 18-22 tuần để phát dị tật thai; Đây xét nghiệm sàng lọc nên kết dương tính phải làm sinh thiết gai chọc ối để kết luận thai có bị bất thường NST hay khơng; Một số trường hợp gặp (90%) Xét nghiệm NIPT đơn gen sử dụng cơng nghệ giải trình tự hệ NGS với độ phủ sâu (ultra deep sequencing) giúp phát phổ rộng bệnh đơn gen trội Đặc biệt, kỹ thuật Viện phát triển dựa liệu gen người Việt, cho độ xác vượt trội Về quy trình lấy mẫu, giống xét nghiệm NIPT thông thường, NIPT đơn gen thu máu mẹ, an tồn khơng xâm lấn Phương pháp thực cho thai phụ có chồng 40 tuổi, siêu âm bất thường, tiền gia đình mắc bệnh di truyền thai phụ muốn sàng lọc tồn diện cho Tích hợp sàng lọc bệnh di truyền trội xét nghiệm NIPT xem bước tiến ứng dụng kỹ thuật NIPT Việt Nam Việc mở rộng giúp xây dựng phương pháp xét nghiệm tiền sinh khơng xâm lấn đại, tồn diện giúp bác sĩ thai phụ có thêm lựa chọn để tầm soát trọn vẹn bất thường di truyền nghiêm trọng phổ biến cho thai nhi thai kỳ KẾT LUẬN Việc sàng lọc dị tật thai nhi mang thai phát can thiệp sớm bào thai hay điều trị sớm sau sinh, giúp trẻ phát triển bình thường Một số trường hợp, thai nhi mang khuyết tật nặng, khó sống sót giúp thai phụ đưa định giữ hay bỏ thai nhi Vì vậy, kết sàng lọc dị tật thai nhi đóng vai trị quan trọng, nên lựa chọn sở khám thai, thai phụ nên lựa chọn sở y tế uy tín an tồn để việc chẩn đốn xác NIPT xu hướng tất yếu sàng lọc chẩn đoán trước sinh ứng dụng NIPT Việt Nam: nhiều vấn đề kinh tế, xã hội, luật pháp, kỹ thuật…Cần đẩy mạnh nghiên cứu ứng dụng cffDNA,làm sở cho xây dựng hành lang pháp lý, hướng dẫn thực hành NIPT Việt Nam ... hội chứng Down (1/700) Khác với bệnh di truyền lặn, bệnh di truyền trội nguy hiểm cần bố mẹ mang gen di truyền bệnh cho với tỷ lệ 50% Nhóm bệnh chiếm gần 60% bệnh trội đơn gen nặng sau sinh với... xâm lấn NIPT NIPT xét nghiệm DNA thai máu mẹ để sàng lọc bất thường NST thai: NST 21, NST số 13, NST số 18, CHƯƠNG II ỨNG DỤNG KỸ THUẬT NIPT TẠI VIỆT NAM Trước đây, phương pháp sàng lọc NIPT chưa... siêu âm 1.4 Chọc hút nước ối Chọc ối thường thực thai 16 tuần tuổi trở lên Chọc ối sinh thiết gai rau thực thai phụ có nguy cao sinh em bé có rối loạn di truyền, bố và/hoặc mẹ có bệnh di truyền,