TUYỂN CHỌN MỘT SÓ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ HOẠT TÍNH CELLULASE VÀ PECTINASE. NHẰM XỬ LÝ NHANH VỎ CÀ PHÊ

Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ TỔNG LIÊN ĐỒN LAO ĐỘNG VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC TƠN ĐỨC THẮNG KHOA KHOA HỌC ỨNG DỤNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ HOẠT TÍNH CELLULASE VÀ PECTINASE NHẰM XỬ LÝ NHANH VỎ CÀ PHÊ Người hướng dẫn : ThS BÙI ANH VÕ Người thực hiện: TRƯƠNG THỊ XUÂN THU Lớp : 08SH1D Khố : 2008 - 2013 TP Hồ Chí Minh, năm 2012 SVTH: Trương Thị Xuân Thu i Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ LỜI CẢM ƠN “Một chữ thầy, chữ th ầy” – câu nói dường in sâu tâm trí hệ học trò Đối với riêng thân em, nhận quan tâm, lo lắng cha mẹ, dìu dắt, dạy bảo tận tình thầy cô, động viên giúp đỡ bạn bè điều em thật hạnh phúc Em xin gởi tới gia đình, thầy bạn bè lời cảm ơn sâu sắc Lời em xin cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Tôn Đức Thắng, Ban chủ nhiệm khoa Khoa học ứng dụng Bộ môn cơng nghệ sinh học tồn thể q thầy tận tình giảng dạy truyền đạt cho em kiến thức quý báu, kỹ chuyên ngành để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp chuẩn bị cho công việc sau Em xin gởi lời cảm ơn chân thành đến thầy Bùi Anh Võ, giảng viên Khoa khoa học ứng dụng, trường Đại học Tôn Đức Thắng Mặc dù công việc bận rộn suốt q trình làm khóa luận tốt nghiệp này, thầy dành thời gian tâm huyết việc hướng dẫn, với việc truyền đạt kiến thức chuyên môn phương pháp nghiên cứu khoa học, thầy ln góp ý, sửa chữa định hướng cho đề tài em thực Cảm ơn cô phụ trách phịng thí nghiệm tận tình nhắc nhở, góp ý suốt thời gian em thực đề tài Xin cảm ơn tất bạn lớp 08SH1D, người bạn thân thương đồng hành suốt chặng đường ngồi giảng đường đại học Với khóa luận tốt nghiệp này, em mong muốn đóng góp phần nhỏ cơng sức việc nghiên cứu, ứng dụng công nghệ sinh học vào thực tiễn Tuy nhiên, đề tài không tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận đóng góp, sửa chữa thơng cảm từ phía thầy Em xin chân thành cảm ơn SVTH: Trương Thị Xuân Thu Tp HCM tháng 12 năm 2012 Trương Thị Xuân Thu i Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ TĨM TẮT TRƯƠNG THỊ XUÂN THU, Đại học Tôn Đức Thắng TP Hồ Chí Minh Tháng 12/2012 “TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CĨ HOẠT TÍNH CELLULASE VÀ PECTINASE NHẰM XỬ LÝ NHANH VỎ CÀ PHÊ” Giáo viên hướng dẫn: ThS BÙI ANH VÕ Hằng năm, nước ta thải lượng vỏ cà phê lên đến hàng chục nghìn trình chế biến Tuy nhiên, vấn đề xử lý nguồn vỏ chưa hiệu gây ảnh hưởng cho mơi trường Vì vậy, tiến hành nghiên cứu chọn lọc số chủng nấm mốc phân lập ngồi tự nhiên có sẵn phịng thí nghiệm có hoạt tính enzyme cellulase pectinase tốt nhằm thu nhận chế phẩm, đồng thời khảo sát hiệu phân hủy cellulose pectin có vỏ cà phê Những kết thu được:  Trong chủng Trichoderma sp Aspergillus oryzae khảo sát có khả sinh tổng hợp enzyme cellulase pectinase Trong đó, chủng Trichoderma hazianum có khả sinh tổng hợp cellulase tốt Aspergillus oryzae có khả sinh tổng hợp pectinase tốt chủng lại  Chọn thành phần môi trường nuôi cấy chủng T.hazianum A oryzae thích hợp để thu nhận enzyme có hoạt tính cao nhất, ứng dụng tạo chế phẩm  Ứng dụng chế phẩm việc khảo sát phân hủy vỏ cà phê, hàm lượng cellulose pectin giảm đáng kể (cellulose 78,08%, pectin 59,75%) Đề tài giúp nhà nghiên cứu tận dụng nguồn vỏ cà phê việc sản xuất phân hữu cơ, vừa mang lại hiệu kinh tế, vừa tránh vấn đề nhiễm mơi trường lãng phí nguồn nguyên liệu SVTH: Trương Thị Xuân Thu ii Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ MỤC LỤC Trang tựa Trang LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC BIỂU ĐỒ ix DANH MỤC HÌNH x CHƯƠNG I : MỞ ĐẦU CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 TUYỂN CHỌN VI SINH VẬT CĨ HOẠT TÍNH CELLULASE VÀ PECTINASE 2.1.1 Mục đích 2.1.2 Các đặc tính vi sinh vật cần tuyển chọn 2.1.3 Ưu điểm việc tuyển chọn vi sinh vật 2.2 ĐẶC ĐIỂM VI NẤM TRICHODERMA .4 2.2.1 Vị trí phân loại 2.2.2 Đặc điểm hình thái 2.2.3 Đặc điểm sinh lý, sinh hóa 2.2.4 Các nghiên cứu ứng dụng Trichoderma 2.2.5 TRICHODERMA HARZIANUM 2.3 2.2.5.1 Phân loại 2.2.5.2 Đặc điểm 2.2.5.3 Ứng dụng Trichoderma hazianum ĐẶC ĐIỂM CỦA VI NẤM APSERGILLUS ORYZAE SVTH: Trương Thị Xuân Thu iii Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ 2.3.1 Phân loại 2.3.2 Đặc điểm 2.3.3 Ứng dụng Aspergillus oryzae 2.4 SƠ LƯỢC VỀ HỆ ENZYME CELLULASE VÀ PECTINASE 10 2.4.1 2.4.1.1 Định nghĩa 10 2.4.1.2 Phân loại .10 2.4.1.3 Cơ chế tác động 11 2.4.2 2.5 Enzyme cellulase 10 Enzyme pectinase 11 2.4.2.1 Định nghĩa 11 2.4.2.2 Phân loại .11 2.4.2.3 Cơ chế tác động 13 VỎ CÀ PHÊ 17 2.5.1 Vài nét cà phê 17 2.5.1.1 Lịch sử cà phê 17 2.5.1.2 Phân loại học cà phê 18 2.5.1.3 Tình hình sản xuất cà phê Việt Nam 18 2.5.2 Cấu tạo trái cà phê 22 2.5.3 Vỏ cà phê .23 2.5.3.1 Thành phần hóa học vỏ 23 2.5.3.2 Thành phần hóa học vỏ thịt .24 2.5.3.3 Thành phần hóa học vỏ trấu 24 2.5.3.4 Các nghiên cứu sử dụng xử lý vỏ cà phê 25 2.5.4 Nguồn vỏ cà phê nước .27 SVTH: Trương Thị Xuân Thu iv Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ CHƯƠNG 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 28 3.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM 28 3.2 VẬT LIỆU THÍ NGHIỆM 28 3.2.1 Chủng vi sinh vật nghiên cứu .28 3.2.2 Vật liệu 28 3.2.3 Dụng cụ thiết bị 29 3.2.4 Môi trường sử dụng 29 3.3 PHƯƠNG PHÁP 30 3.3.1 Phương pháp xác định độ ẩm 30 3.3.2 Phương pháp cấy chuyền giữ giống .30 3.3.3 Phương pháp quan sát vi thể, đại thể chủng nấm mốc 31 3.3.4 Xác định bào tử nấm mốc phương pháp đếm trực tiếp buồng đếm hồng cầu phương pháp Optical Density (OD) .31 3.3.5 Xác định hoạt lực enzyme cellulase theo phương pháp CMCase 32 3.3.6 Xác định hoạt tính enzyme pectinase theo phương pháp so màu 34 3.3.7 Xác định hàm lượng cellulose theo phương pháp định lượng cellulose thô 36 3.3.8 3.4 Xác định hàm lượng pectin theo phương pháp calci pectat 37 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .38 3.4.1 Phương pháp định tính khả sinh tổng hợp enyzyme cellulase pectinase .38 3.4.2 Phương pháp tuyển chọn chủng nấm mốc có hoạt tính enzyme cellulase pectinase tốt 38 3.4.3 Khảo sát ảnh hưởng thành phần môi trường đến khả sinh tổng hợp enzyme cellulase pectinase tốt 39 SVTH: Trương Thị Xuân Thu v Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ 3.4.4 Thử nghiệm tạo chế phẩm sinh học 40 3.4.5 Khảo sát khả phân giải vỏ cà phê .41 CHƯƠNG 4:KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 42 4.1 Quan sát đại thể chủng nấm mốc 42 4.1.1 Chủng Trichoderma 42 4.1.2 Chủng Aspergillus oryzae 43 4.2 Quan sát vi thể .44 4.3 Định tính khả sinh tổng hợp enyzyme cellulase pectinase 45 4.4 Tuyển chọn chủng nấm mốc có hoạt tính enzyme cellulase pectinase tốt .48 4.5 Khảo sát ảnh hưởng thành phần môi trường đến khả sinh tổng hợp enzyme cellulase pectinase tốt .50 4.6 Khảo sát khả phân giải vỏ cà phê .53 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .58 5.1 KẾT LUẬN 58 5.2 KIẾN NGHỊ .58 SVTH: Trương Thị Xuân Thu vi Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT PGA: Potatoes glucose agar PEL: Pectinesterase PG: Polygalacturonase PMG: Polymethylgalacturonase PTE: Pectin-transeliminase PGTE: Polygalacturonase-transeliminase PEL: Pectate lyase T09: Trichoderma 09 T10: Trichoderma 10 T11: Trichoderma 11 T12: Trichoderma 12 T13: Trichoderma 13 T hazianum: Trichoderma hazianum A oryzae: Aspergillus oryzae OD: Optical density NT1: Nghiệm thức NT2: Nghiệm thức NT3: Nghiệm thức NT4: Nghiệm thức CMC: Carboxyl metyl cellulose ĐC: Đối chứng SVTH: Trương Thị Xuân Thu vii Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Sự phân bố diện tích sản lượng cà phê Việt Nam 19 Bảng 2.2 Thời vụ thu hoạch cà phê Việt Nam 20 Bảng 2.3 Tỷ lệ thành phần cấu tạo trái cà phê 23 Bảng 2.4 Thành phần hóa học vỏ cà phê 23 Bảng 2.5 Thành phần hóa học vỏ thịt 24 Bảng 2.6 Thành phần hóa học vỏ trấu 24 Bảng 4.1 Đường kính vịng phân giải CMC pectin 46 Bảng 4.2 Bảng kết xác định hoạt tính enzyme cellulase 48 Bảng 4.3 Bảng kết xác định hoạt tính enzyme pectinase 49 Bảng 4.4 Bảng kết ảnh hưởng thành phần môi trường đến khả sinh tổng hợp enzyme cellulase pectinase 51 Bảng 4.5 Hàm lượng cellulose thủy giải vỏ cà phê 53 Bảng 4.6 Lượng pectin thủy giải vỏ cà phê 55 SVTH: Trương Thị Xuân Thu viii Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 2.1 Diễn biến diện tích cà phê Việt Nam từ 1995 - 2011 21 Biểu đồ 2.2 Sản lượng cà phê Việt Nam từ 1995 - 2011 21 Biểu đồ 4.1 Đường kính vòng phân giải CMC pectin chủng nấm mốc 46 Biểu đồ 4.2 Hoạt tính enzyme cellulase chủng nấm mốc 48 Biểu đồ 4.3 Hoạt tính enzyme pectinase chủng nấm mốc 49 Biểu đồ 4.4 Ảnh hưởng thành phần môi trường đến khả sinh tổng hợp enzyme pectinase A oryzae 51 Biểu đồ 4.5 Ảnh hưởng thành phần môi trường đến khả sinh tổng hợp enzyme cellulase T hazianum 52 Biểu đồ 4.6 Hàm lượng cellulose lại phân giải vỏ cà phê để nguyên 54 Biểu đồ 4.7 Hàm lượng cellulose lại phân giải vỏ cà phê nghiền nhỏ 54 Biểu đồ 4.8 Hàm lượng pectin lại phân giải vỏ cà phê để nguyên 55 Biểu đồ 4.9 Hàm lượng pectin lại phân giải vỏ cà phê nghiền nhỏ 56 SVTH: Trương Thị Xuân Thu ix Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn, Cục Trồng Trọt, 10/2012 Báo cáo trạng sản xuất, giải pháp phát triển trồng tái canh cà phê thời gian tới Trần Quỳnh Chi cộng sự, tháng năm 2007 Hồ sơ ngành cà phê Việt Nam Việt Chương, 2000 Kỹ thuật trồng cà phê Nhà xuất Thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đăng Đức, Đặng Hồng Miên, Nguyễn Vĩnh Phước, Nguyễn Đình Quyến, Nguyễn Phùng Tiến Phạm Văn Ty, 1976 Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật, tập 2, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Đức Lượng (chủ biên), Phan Thị Huyền, Nguyễn Ánh Tuyết, 2006 Thí nghiệm cơng nghệ sinh học tập – Thí nghiệm vi sinh vật học Tái lần thứ nhất, Nhà xuất Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh, Trường Đại học Bách Khoa Nguyễn Văn Mùi Thực hành hóa sinh học In lần thứ 2, có sửa chữa bổ sung, Nhà xuất Đại học Quốc Gia Hà Nội Phạm Như Ngọc, 2009 Tối ưu hóa mơi trường ni cấy Trichoderma hazianum ứng dụng sản xuất chế phẩm nơng nghiệp Khóa luận tốt nghiệp, Trường Đại học Tơn Đức Thắng TP Hồ Chí Minh Lương Đức Phẩm Hồ Sưởng, 1978 Vi sinh tổng hợp Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Lê Hồng Phú, 2009 Nghiên cứu thu nhận chế phẩm vi sinh vật tổng hợp enzyme pectinase, cellulase ứng dụng sản xuất cà phê nhân theo phương pháp lên men Luận án tiến sĩ, Trường Đại học Khoa học tự nhiên TP Hồ Chí Minh SVTH: Trương Thị Xuân Thu 59 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ 10 Đồng Thị Thanh Thu, 1996 Giáo trình sinh hóa Đại học Tổng Hợp TP Hồ Chí Minh 11 Bùi Anh Võ, 2008 Nghiên cứu thu nhận pectin từ vỏ cà phê Luận văn thạc sĩ, Trư ờng Đại học Bách khoa TP Hồ Chí Minh 12 Giáo trình thí nghiệm chế phẩm sinh học, Trường Đại họcTôn Đức Thắng TÀI LIỆU TIẾNG ANH 13 Álvarez D and Sánchez O, 2008 Evaluation of orange peel and green soybean as a subtrate for the production of α-galactosidase by a soil isolated Aspergillusoryzae in solid stases fermentation Chemical engineering transaction, 14: 337 – 344 14 Ainsworth, G S and Susman, A S 1968 The fungi, an advance treatise Vol III The fungal population Acad press Inc New York, USA 15 Christian P.Kubicek and Gary E.Harman, 2002.Trichoderma and Gliocladium, Vol Basic biology, taxonomy and genetics Taylor & Francis e-Library 16 Xiang Jing meng, Li Li Lu, Guo Feng Gu, and Min Xiao, 2010 A novel pathway for nicotine degradation by Aspergillusoryzae 112822 isolated from tobacco leaves Research in Microbiology, – TÀI LIỆU INTERNET 17 www.agroviet.gov.vn-l556.html 18 http://www.biocontrol.entomology.cornell.edu/pathogens/trichoderma.html 19 http://www.doctorfungus.org/thefungi/Trichoderma Species.html 20 http://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Aspergillus 21 http://www.myebook.vn/ebook/cong-nghe-thuc-pham/chung-nam-mocaspergillus-oryzae.196284.html?cate_parent=ebook 22 http://www.slideshare.net/pjgeon1990/trichoderma 23 http://s4.zetaboards.com/BioFood_Tech/topic/8511715/1/ SVTH: Trương Thị Xuân Thu 60 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ 24 http://vcf/Default.aspx?tabid=142&language=vi-VN Lượcsửngànhcàphê 25 http://www.vietrade.gov.vn ThịtrườngcàphêViệt Nam mùavụ 2011 – 2012 SVTH: Trương Thị Xuân Thu 61 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: TƯƠNG QUAN GIỮA OD VÀ LOG10 CỦA MẬT ĐỘ BÀO TỬ CÁC CHỦNG NẤM MỐC 1.1 Kết số lượng bào tử T09 đếm tương ứng với ΔOD ΔOD 0,104 0,201 0,299 0,4 0,502 a 10,6 22,4 32,4 51,6 71,2 N (bàotử/ml) Log N 9,0.106 6,955 1,3.107 1,6.107 7,110 2,2.107 7,210 2,7.107 7,341 7,427 7.50 7.40 LogN 7.30 7.20 7.10 7.00 6.90 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 ΔOD Đồ thị phụ lục 1.1: Đường cong tuyến tính OD log mật độ bào tử chủng T09 1.2 Kết số lượng bào tử T10 đếm tương ứng với ΔOD ΔOD 0,103 0,201 0,304 0,402 0,501 a 18,2 27,6 45 66 84,2 N (bàotử/ml) 1,4.106 1,7.106 2,0.106 2,5.106 3,2.106 Log N 7,111 7,169 7,306 7,382 7,484 SVTH: Trương Thị Xuân Thu 62 LogN Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ 7.55 7.50 7.45 7.40 7.35 7.30 7.25 7.20 7.15 7.10 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 ΔOD Đồ thị phụ lục 1.2: Đường cong tuyến tính OD log mật độ bào tử chủng T10 1.3 Kết số lượng bào tử T11 đếm tương ứng với ΔOD 0,102 0,201 0,303 0,402 0,5 a 23,8 33 49,4 66,4 89,6 N (bàotử/ml) 1,5.106 1,7.106 1,9.106 2,0.106 2,2.106 Log N 7,172 7,217 7,268 7,299 7,350 LogN ΔOD 7.36 7.34 7.32 7.30 7.28 7.26 7.24 7.22 7.20 7.18 7.16 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 ΔOD Đồ thị phụ lục 1.3: Đường cong tuyến tính OD log mật độ bào tử chủng T11 SVTH: Trương Thị Xuân Thu 63 Khóa luận tốt nghiệp 1.4 GVHD: ThS Bùi Anh Võ Kết số lượng bào tử T12 đếm tương ứng với ΔOD ΔOD 0,103 0,204 0,3 0,402 0,503 a 11,8 21,2 33,8 52 84 N (bàotử/ml) 1,2.106 1,9.106 2,5.106 3,3.106 4,2.106 Log N 7,093 7,268 7,404 7,512 7,623 7.7 7.6 LogN 7.5 7.4 7.3 7.2 7.1 7.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 ΔOD Đồ thị phụ lục 1.4: Đường cong tuyến tính OD log mật độ bào tử chủng T12 1.5 Kết số lượng bào tử T13 đếm tương ứng với ΔOD ΔOD 0,1 0,203 0,3 0,4 0,499 a 12,4 21 34,2 60 99,2 N (bàotử/ml) 7,8.106 1,2107 1,5.107 2,1.107 2,5.107 Log N 6,889 7,063 7,187 7,322 7,394 SVTH: Trương Thị Xuân Thu 64 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ 7.50 7.40 LogN 7.30 7.20 7.10 7.00 6.90 6.80 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 ΔOD Đồ thị phụ lục 1.5: Đường cong tuyến tính OD log mật độ bào tử chủng T10 1.6 Kết số lượng bào tử T hazianum đếm tương ứng với ΔOD 0,103 0,201 0,301 0,399 0,5 a 3,6 5,8 9,4 15,6 25,2 N (bàotử/ml) 3,6.106 4,8.106 5,9.106 7,8.106 9,5.106 Log N 6,556 6,680 6,769 6,892 6,975 LogN ΔOD 7.1 7.0 7.0 6.9 6.9 6.8 6.8 6.7 6.7 6.6 6.6 6.5 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 ΔOD Đồ thị phụ lục 1.6: Đường cong tuyến tính OD log mật độ bào tử chủng T Hazianum SVTH: Trương Thị Xuân Thu 65 Khóa luận tốt nghiệp 1.7 GVHD: ThS Bùi Anh Võ Kết số lượng bào tử A oryzae đếm tương ứng với ΔOD ΔOD 0,102 0,204 0,302 0,401 0,504 a 3,4 9,8 15,6 22,6 N (bàotử/ml) 7,5.106 1,1.107 1,6.107 2,3.107 2,8.107 Log N 6,875 7,041 7.206 7,359 7,451 7.6 7.5 7.4 LogN 7.3 7.2 7.1 6.9 6.8 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 ΔOD Đồ thị phụ lục 1.7: Đường cong tuyến tính OD log mật độ bào tử chủng A oryzae SVTH: Trương Thị Xuân Thu 66 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ PHỤ LỤC Hình 2.1 Vịng phân giải CMC chủng nấm mốc sau 48 nuôi cấy Trichoderma 09 Trichoderma 12 Trichoderma 10 Trichoderma 13 Trichoderma 11 T hazianum A Oryzae SVTH: Trương Thị Xuân Thu 67 Khóa luận tốt nghiệp Hình 2.2 GVHD: ThS Bùi Anh Võ Vịng phân giải mơi trường pectin chủng nấm mốc sau 48 nuôi cấy Trichoderma 09 Trichoderma 12 Trichoderma 10 Trichoderma 13 Trichoderma 11 T hazianum A oryzae SVTH: Trương Thị Xuân Thu 68 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ PHỤ LỤC 3: XỬ LÝ SỐ LIỆU PHÂN GIẢI VỎ CÀ PHÊ 3.1 Khảo sát phân giải cellulose  Vỏ cà phê để nguyên có bổ sung nấm T hazianum A oryzae Anova: Single Factor: SUMMARY Groups ngày 14 ngày 21 ngày Count 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 5.357136 1.503996 Total 6.861131 Sum 64.06887 61.46953 58.40575 Average 21.35629 20.48984 19.46858 Variance 0.150106 0.375526 0.226367 df MS 2.678568 0.250666 F 10.68581 P-value 0.010533 F crit 5.143253  Vỏ cà phê để nguyên có bổ sung chế phẩm Anova: Single Factor SUMMARY Groups ngày 14 ngày 21 ngày Count 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 9.029215 0.832656 Total 9.861871 Sum Average Variance 63.96154 21.32051 0.285768 59.75474 19.91825 0.055498 56.6276 18.87587 0.075061 SVTH: Trương Thị Xuân Thu df MS F P-value F crit 4.514607 32.53162 0.000602 5.143253 0.138776 69 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ  Vỏ cà phê xay nhỏ có bổ sung nấm T hazianum A oryzae Anova: Single Factor SUMMARY Groups ngày 14 ngày 21 ngày Count 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 15.53358 1.363767 Total 16.89734 Sum Average Variance 64.23932 21.41311 0.383612 57.74192 19.24731 0.207979 54.80685 18.26895 0.090293 df MS F P-value F crit 7.766788 34.17058 0.000526 5.143253 0.227295  Vỏ cà phê xay nhỏ có bổ sung chế phẩm Anova: Single Factor SUMMARY Groups ngày 14 ngày 21 ngày Count 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 12.37965 0.475098 Total 12.85474 Sum Average Variance 62.78303 20.92768 0.042578 59.87351 19.95784 0.07603 54.30264 18.10088 0.118942 SVTH: Trương Thị Xuân Thu df MS F 6.189823 78.17116 0.079183 P-value 5.05E-05 F crit 5.143253 70 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ Bảng 3.1: Hàm lượng cellulose lại sau xử lý Nghiệm thức 3.2 Hàm lượng cellulose lại sau phân giải (%) Ban đầu ngày 14 ngày 21 ngày NT1 23.18 21.32 19.92 18.88 NT2 23.18 21.36 20.49 19.47 ĐC 23.18 22.17 20.51 19.54 NT3 23.18 20.93 19.96 18.10 NT4 23.18 21.41 19.25 18.27 ĐC 23.18 22.07 20.55 19.50 Khảo sát phân giải pectin  Vỏ cà phê xay nhỏ có bổ sung chế phẩm Anova: Single Factor SUMMARY Groups ngày 14 ngày 21 ngày ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total Count 3 Sum Average Variance 29.98123 9.993743 0.015888 25.23416 8.411386 0.180813 21.29804 7.099348 0.001139 SS 12.60282 0.395678 12.9985 SVTH: Trương Thị Xuân Thu df MS F 6.301408 95.55351 0.065946 P-value 2.82E-05 F crit 5.143253 71 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ  Vỏ cà phê xay nhỏ có bổ sung nấm T hazianum A oryzae Anova: Single Factor SUMMARY Groups ngày 14 ngày 21 ngày Count 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 12.8861 0.101249 Total 12.98735 Sum Average Variance 32.11968 10.70656 0.017251 26.59205 8.864017 0.014201 23.43375 7.811249 0.019172 df MS 6.44305 0.016875 F 381.816 P-value 4.74E-07 F crit 5.143253 P-value F crit 7.39E-05 5.143253  Vỏ cà phê để nguyên có bổ sung chế phẩm Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 31.8379 10.61263 0.15252 ngày 14 ngày 25.46889 8.489631 0.093511 21 ngày 23.72267 7.907557 0.020405 ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 12.16338 6.081688 68.47801 Within Groups 0.532874 0.088812 Total 12.69625 SVTH: Trương Thị Xuân Thu 72 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ  Vỏ cà phê để nguyên có bổ sung nấm T hazianum A oryzae Anova: Single Factor SUMMARY Groups ngày 14 ngày 21 ngày Count 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 8.532762 0.097475 Total 8.630237 Sum Average Variance 32.82672 10.94224 0.008401 27.67553 9.225177 0.030878 25.95039 8.650131 0.009458 df MS F 4.266381 262.6145 0.016246 P-value 1.44E-06 F crit 5.143253 Bảng 3.1: Hàm lượng cellulose lại sau xử lý Nghiệm thức Hàm lượng pectin sau phân giải Ban đầu ngày 14 ngày 21 ngày NT1 11.88 10.61 8.49 7.91 NT2 11.88 10.94 9.23 8.65 ĐC 11.88 11.18 10.25 9.07 NT3 11.88 9.99 8.41 7.10 NT4 11.88 10.71 8.86 7.81 ĐC 11.88 10.41 9.22 8.16 SVTH: Trương Thị Xuân Thu 73 ... Trương Thị Xuân Thu 19 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Bùi Anh Võ Ở nước ta thời vụ thu hoạch cà phê vùng sau: Bảng 2.2 Thời vụ thu hoạch cà phê Việt Nam Vùng Thu hoạch cà Thu hoạch cà Thu hoạch phê... SO2 Việc sử dụng phương pháp hóa học địi hỏi trang thi? ??t bị kỹ thu? ??t cao, tốn mà đem lại hiệu kinh tế không cao Với xu hướng tiết kiệm thân thi? ??n với môi trường, nghiên cứu ứng dụng cơng nghệ... Pectinesterase thu từ nguồn khác có giá trị pH tối ưu khác Nếu nguồn thu từ vi sinh vật pH tối ưu từ 4,5 – 5,5, cịn từ thực vật có pH tối ưu từ 5,0 – 8,5 SVTH: Trương Thị Xuân Thu 13 Khóa luận