Bài viết Nghiên cứu tạo chế phẩm phân hủy rơm rạ từ chủng trichoderma đột biến bởi phóng xạ trình bày kết quả nghiên cứu và sản xuất chế phẩm phân hủy cellulose từ các chủng Trichoderma đột biến bởi phóng xạ cũng như hiệu quả phân hủy rơm rạ của chế phẩm tạo được ở quy mô phòng thí nghiệm.
THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN NGHIÊN CỨU TẠO CHẾ PHẨM PHÂN HỦY RƠM RẠ TỪ CHỦNG TRICHODERMA ĐỘT BIẾN BỞI PHÓNG XẠ Trần Băng Diệp cộng Trung tâm chiếu xạ Hà Nội Phương pháp lên men bán rắn chất có thành phần phế phụ phẩm lúa gạo thực với hai chủng Trichoderma đột biến phóng xạ có khả sinh cellulase cao Đó chủng VTCC(k) I-1 VTCC(r) I-1 sàng lọc từ chủng tự nhiên T koningiopsis T reesei qua xử lý chiếu xạ Lên men với thông số kỹ thuật tối ưu, mật độ bào tử đạt (1,43±0,06) x1010 CFU/g (1,79±0,07)x1010 CFU/g tương ứng với chủng VTCC(k) I-1 VTCC(r) I-1 Sau lên men, bào tử chủng nấm đột biến phối trộn với theo tỷ lệ 1:1 để tạo hỗn hợp có mật độ lớn 1010 CFU/g Chế phẩm IRTr sản xuất cách phối trộn hỗn hợp bào tử với chất mang (có thành phần tinh bột xanthan chiếu xạ khử trùng liều 15 kGy) Chế phẩm IRTr tạo có tiêu kỹ thuật đáp ứng TCVN 6168 : 2002, đồng thời chất lượng trì tháng sau sản xuất Thử nghiệm quy mơ phịng thí nghiệm cho thấy, rơm rạ xử lý chế phẩm IRTr phân hủy nhanh hiệu so với sử dụng số loại chế phẩm thương mại có nguồn gốc Trichoderma MỞ ĐẦU Việt Nam nước nông nghiệp với sản lượng lúa gạo đứng hàng đầu giới Mỗi năm, hàng triệu rơm rạ để lại sau thu hoạch nguồn hữu lớn Tuy nhiên, rơm rạ để tự nhiên cần thời gian phân hủy lâu, tỷ lệ C/N cao nên cày vùi rơm rạ trực tiếp vào đất, gây tượng bất động dinh dưỡng đất, trình phân hủy gây tượng ngộ độc hữu cho lúa [1, 2] Do đó, đại đa số nơng dân thường có tập quán đốt bỏ rơm rạ dùng phân hóa học để “bổ sung” thứ vừa bị đốt chuẩn bị đất cho vụ mùa Trong đó, theo ước tính đốt rơm thải 36,32 kg khí CO, 4,54 kg hydrocarbon, 3,18 kg bụi tro 56,00 kg CO2 [3], chất gây ô nhiễm, ảnh hưởng xấu đến môi trường sống Để giải vấn đề đồng thời giảm lượng phân bón sử dụng phân hủy rơm rạ đồng ruộng theo cách tự nhiên lựa chọn Việc bổ sung thêm lồi vi sinh vật có khả phân hủy cellulose mạnh Tricho- 12 Số 70 - Tháng 3/2022 derma, xạ khuẩn, vi khuẩn… vào nguyên liệu chứa cellulose hay rơm rạ đồng sau thu hoạch giúp việc phân hủy nhanh chóng triệt để Sử dụng chế phẩm sinh học nói chung chế phẩm có nguồn gốc từ Trichoderma cho hiệu lâu dài không gây ô nhiễm cho môi trường mà thuốc hóa học khó sánh kịp Trên thị trường nay, chế phẩm sinh học phân hủy phế phụ phẩm nơng nghiệp có nguồn gốc Trichoderma chủ yếu nhập sản xuất từ chủng giống có hoạt tính cao thu qua q trình phân lập, tuyển chọn chủng nấm tự nhiên Việc tạo chủng Trichoderma đột biến có hoạt tính vượt trội giúp chủ động nguồn giống chất lượng, ứng dụng cho sản xuất chế phẩm chưa quan tâm nghiên cứu phát triển cách Trong nghiên cứu trước đây, phương pháp xử lý chiếu xạ gamma, sàng lọc tạo số chủng Trichoderma đột biến có khả sinh cellulase cao chủng tự nhiên từ 1,8-2,5 lần làm nguồn nguyên liệu để sản xuất THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN chế phẩm [4] Bài báo trình bày kết nghiên cứu sản xuất chế phẩm phân hủy cellulose từ chủng Trichoderma đột biến phóng xạ hiệu phân hủy rơm rạ chế phẩm tạo quy mơ phịng thí nghiệm NỘI DUNG 2.1 Đối tượng phương pháp 2.1.1 Nguyên vật liệu - Chủng VTCC(k) I-1và VTCC(r) I-1 chủng Trichoderma đột biến phóng xạ (sàng lọc từ chủng gốc T koningiopsis T reesei) có khả sinh cellulase vượt trội tây thu được, đun sôi lại 10-15 phút, thêm nước đến 1000 ml khử trùng nhiệt độ 121oC thời gian 20 phút - MT TSM (Trichoderma Selective Medium): 0,2 g MgSO4.7H2O, 0,9 g KH2PO4, 0,15 g KCl, g NH4NO3, g glucose, 0,25 g chloram phenicol, 0,15 g rose bengal, 15g agar thêm nước tới 1000 ml 2.1.2 Phương pháp 2.1.2.1 Bảo quản giữ giống Hai chủng Trichoderma đột biến VTCC(k) I-1và VTCC(r) I-1 bảo quản theo phương pháp cấy truyền ống thạch nghiêng chứa MT - Các nguyên liệu như: khoai tây, cám gạo, trấu, PDA Sau cấy, nấm nuôi tủ ấm o cám ngô, tinh bột sắn, xanthan sử dụng để 28 C 5-7 ngày bảo quản tối đa 30 ngày 4oC trước cấy truyền đợt nghiên cứu sản xuất chế phẩm vi sinh - Rơm rạ sau thu hoạch sử dụng để thử 2.1.2.2 Xác định thông số lên men nghiệm, đánh giá hiệu xử lý chế phẩm chủng Trichoderma đột biến vi sinh • Chuẩn bị giống sơ cấp thứ cấp - Các loại chế phẩm nấm Trichoderma thương Nấm từ ống giống cấy vào đĩa petri chứa mại sử dụng để so sánh: 15 ml MT PDA ủ 28oC Sau 5-7 ngày, dùng dụng + Chế phẩm TRICHO (do công ty TNHH cụ vô trùng khoan miếng thạch đường kính Điền Trang sản xuất) ký hiệu TM-1 Chế phẩm 1cm chuyển vào bình tam giác chứa150 ml dạng bột, gồm tập đồn vi sinh vật (VSV) có ích MT nước chiết khoai tây Tiếp tục nuôi cấy lắc (Trichoderma spp.:1 x 108 CFU/g, Bacillus subti- 150 vòng/phút ngày 28oC (với chủng lis: x 108 CFU/g), độ ẩm ≤ 30% Liều lượng sử VTCC(k) I-1) 33oC (với chủng VTCC(r) I-1) dụng: 2-3 kg/tấn nguyên liệu Tiến hành kiểm tra mật độ bào tử dịch nuôi + Chế phẩm TRICHODERMA (do công ty cấy MT TSM TNHH Tấn Đức sản xuất) ký hiệu TM-2 Chế • Khảo sát lựa chọn chất lên men bán rắn phẩm dạng bột, Trichoderma spp.:1 x 106 CFU/g, bổ sung 109 loại VSV hữu ích khác (Bacillus Bở sung ml dịch thứ cấp (mật độ108 CFU/ml) subtilis, Actinomycetes sp., Saccharomyces cer- vào hộp nhựa chứa 50 g MT bán rắn với o evisise), hữu 15%, độ ẩm ≤ 30% Liều lượng sử loại chất khác (đã khử trùng 121 C, 30 phút) Trong đó, tỷ lệ thành phần: dụng:1kg/ 2-3 nguyên liệu chất cung cấp dinh dưỡng/cơ chất tạo độ xốp/rỉ - NaNO3, KCl, Glucose (Việt Nam), Streptomycin đường 7: 2,5: 0,5 độ ẩm 50% (Sigma - Mỹ) • Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ chất tới - Môi trường (MT) PDA (Potato Dextrose Agar) trình lên men bán rắn - Merck - Đức Nuôi cấy chủng Trichoderma môi trường - MT nước chiết khoai tây: 200 g khoai tây bán rắn có thành phần tối ưu (được chọn mục 900 ml nước cất, đun sôi 40 phút lọc lấy nước trên) với thay đổi tỷ lệ chất tạo độ xốp Thêm 20 g glucose vào phần dịch khoai Số 70 - Tháng 3/2022 13 THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN chất cung cấp dinh dưỡng là: 9: 0,5; 8: 1,5; • Bảo quản chế phẩm 7: 2,5; 6: 3,5 5: 4,5 Rỉ đường có tỷ lệ 0,5 tất Sau phối trộn, chế phẩm đóng gói nghiệm thức, độ ẩm 50% túi nhơm kín, bảo quản điều kiện phịng thí • Khảo sát ảnh hưởng độ ẩm chất tới trình nghiệm (25oC) Kiểm tra mật độ bào tử giờ, lên men bán rắn tháng, tháng tháng Bổ sung ml dịch thứ cấp bào vào hộp nhựa chứa 50g chất có thành phần tỉ lệ tối ưu (được chọn mục trên) Hàm lượng nước bổ sung vào chất tính tốn để độ ẩm đạt 40%, 50%, 60%, 70% 80% Ở khảo sát nêu trên, mỡi nghiệm thức thí nghiệm lặp lại lần Hai chủng Trichoderma đột biến nuôi cấy ngày nhiệt độ 28oC 33oC Tiến hành theo dõi ngày bắt đầu xuất bào tử (sau cấy) mật độ bào tử (CFU/g) nghiệm thức thí nghiệm khác • Thu hồi bào tử nấm Cơ chất sau lên men chủng đột biến sấy khô, nghiền bằng máy xay để thu nhận bào tử nấm lẫn chất dạng bột mịn Sau thu nhận bào tử phối trộn với theo tỷ lệ 1:1 kiểm tra mật độ bào tử tổng số Căn vào mật độ bào tử, hàm lượng chất mang cần thiết để phối trộn tính tốn cho chế phẩm tạo có mật độ bào tử nấm ≥108 CFU/g chế phẩm 2.1.2.3 Nghiên cứu tạo chế phẩm Trichoderma 2.1.2.4 Đánh giá hiệu phân hủy rơm rạ chế phẩm Rơm khô cân cho vào thùng nhựa (3 kg/ thùng) trộn với chế phẩm IRTr (là sản phẩm nghiên cứu) theo liều lượng kg/tấn Bổ sung nước đảm bảo độ ẩm 50%, sau đậy kín Các chế phẩm thương mại TM-1 TM-2 sử dụng với liều lượng theo khuyến cáo nhà sản xuất để đạt hiệu phân hủy tối đa Supe lân bổ sung thêm vào nguyên liệu rơm rạ với liều lượng 30 kg/tấn rơm Trong trình thí nghiệm, rơm đảo trộn lần (sau 10 30 ngày) Tỷ lệ giảm trọng lượng rơm nghiệm thức đánh giá 10 ngày/lần 90 ngày sau xử lý chế phẩm Tỷ số C/N đánh giá ngày thứ 60 thí nghiệm, đó: - Carbon hữu tổng số định lượng theo TCVN 9294: 2012 (phương pháp Walkley Black) [5] • Lựa chọn khử trùng chất mang - Nitơ tổng số định lượng theo Tiêu chuẩn Chất mang lựa chọn tinh bột xanthan ngành 10 TCN 451:2001 (phương pháp Kjeldhal) đóng riêng rẽ loại túi PE mang [6] chiếu xạ dải liều: 7,5, 10, 15 20 kGy 2.1.2.5 Xử lý số liệu nguồn 60Co Trung tâm Chiếu xạ Hà Nội Số lượng VSV tạp nhiễm giá thể trước sau Dùng Microsoft Excel để vẽ đồ thị, biểu đồ xử khử trùng chiếu xạ kiểm tra lý số liệu thơ thu từ thí nghiệm; Sử dụng phương pháp phân tích phương sai (ANOVA) để MT đặc hiệu xác định sai khác giá trị trung bình • Xác định tỷ lệ phối trộn hỗn hợp bào tử phần mềm SPSS chủng Trichoderma với chất mang Phối trộn hỗn hợp bào tử vào chất mang theo tỷ lệ 5/100; 10/100, 20/100 30/100 Tỷ lệ phối trộn phù hợp mật độ bào tử Trichoderma cao ổn định thời điểm ban đầu sau ngày 14 Số 70 - Tháng 3/2022 2.2 Kết bàn luận 2.2.1 Thông số lên men chủng Trichoderma đột biến Phương pháp lên men bán rắn đặc biệt thích hợp THƠNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN cho phát triển nấm sợi chúng yêu cầu độ ẩm thấp so với vi khuẩn [7] Hơn thế, phương pháp lên men tương đối đơn giản, rẻ tiền mang lại hiệu suất sinh tổng hợp enzyme cao [8, 9] Cơ chất thường sử dụng phương pháp lên men bán rắn sản phẩm nông nghiệp gạo, cám, ngô, bột mỳ , hay phế phụ phẩm trấu, mụn xơ dừa, bã mía [10, 11] Với phương pháp nêu, thơng số q trình lên men bán rắn hai chủng Trichoderma đột biến VTCC(k) I-1 VTCC(r) I-1 xác định trình bày bảng Bảng Thông số tối ưu để lên men bán rắn chủng Trichoderma đột biến phóng xạ Như vậy, điều kiện thích hợp để ni cấy hai chủng đột biến VTCC(k) I-1 VTCC(r) I-1 phát triển sinh bào tử tối đa lên men bán rắn xác định Đó MT có độ ẩm 60% gồm thành phần: cám gạo/trấu/rỉ đường với tỷ lệ - 3,5 - 0,5 Mật độ bào tử trung bình thu sau ngày ni cấy hai chủng Trichoderma lớn 1010 CFU/g, 1,43x1010 CFU/g 1,79x1010 CFU/g tương ứng với chủng VTCC(k) I-1 VTCC(r) I-1 phương pháp xay Phương pháp làm giảm mật độ bào tử sống so với ban đầu sản phẩm thu bào tử nấm lẫn chất dạng bột mịn lượng nhỏ bào tử chết tác động học máy xay Tuy nhiên, sau phối trộn theo tỷ lệ 1:1 mật độ bào tử tổng số ≥1010 CFU/g, đảm bảo đủ để phối trộn với chất mang tạo chế phẩm 2.2.2 Tạo chế phẩm phân hủy cellulose từ chủng Trichoderma đột biến Việc ứng dụng loại chế phẩm có nguồn gốc VSV có hiệu hay khơng phụ thuộc nhiều (A) vào mật độ VSV tuyển chọn sống sót sau giải phóng MT Các thành phần khác điển hình chất mang định mật độ VSV hữu ích chế phẩm Chất mang lý tưởng phải đảm bảo tăng trưởng trì mật số mong muốn chủng VSV (B) khoảng thời gian chấp nhận [12] Hình Lên men bán rắn chủng VTCC(r) I-1 loại chất (A) độ ẩm khác (B) Thu nhận bào tử chủng riêng rẽ Trong nghiên cứu này, tinh bột xanthan số khoáng đa lượng (KH2PO4, MgSO4, NaNO3, KCl) chiếu xạ khử trùng liều 15 kGy lựa chọn làm chất mang Hỗn hợp bào tử có mật độ ≥1010 CFU/g không tạp nhiễm Số 70 - Tháng 3/2022 15 THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN trộn với chất mang theo tỷ lệ 20/100 để tạo chế phẩm IRTr có mật độ bào tử ≥ 109 CFU/g Để bảo quản, chế phẩm đóng gói túi nhơm kín đặt điều kiện phịng thí nghiệm (25oC) Chất lượng chế phẩm đánh giá thông qua việc kiểm tra mật độ bào tử Trichoderma, mật độ VSV tạp nhiễm độ ẩm thời điểm 1, tháng Kết trình bày bảng Bảng Chất lượng chế phẩm Trichoderma sau bảo quản *Các chữ khác cột tháng sau sản xuất khác biệt có ý nghĩa thống kê giá trị trung 2.2.3 Khả phân hủy rơm chế phẩm bình với độ tin cậy 95% quy mơ phịng thí nghiệm Các kết kiểm tra cho thấy, mật độ bào tử nấm trì mức 109 CFU/g tháng đầu Việc bổ sung thêm dinh dưỡng vào nguyên liệu bảo quản Ở thời điểm ban đầu sau tháng rơm rạ giúp tạo MT thuận lợi, hỗ trợ hoạt hóa bảo quản mật độ bào tử nấm (1,91± sinh học, làm chất mồi ban đầu để tăng sức sống, 0,10) x109 (1,77±0,08)x109 CFU/g sai giúp Trichoderma thích nghi nhanh với MT mới, khác khơng có ý nghĩ thống kê Tới tháng thứ 3, chế phẩm phát huy tác dụng hiệu mật độ bào tử (1,66±0,06)x109 CFU/g, giảm cách nhanh chóng Với mục đích tăng hiệu so với thời điểm ban đầu, nhiên sai khác phân hủy rơm chế phẩm IRTr, khơng có ý nghĩa thống kê so với mật độ bào tử đồng với hướng dẫn sử dụng chế phẩm trung bình chế phẩm tháng Chế thương mại (TM-1 TM-2) lựa chọn để so phẩm tồn trữ tới tháng thứ có mật độ bào tử sánh, supe lân bổ sung thêm vào nguyên nấm giảm bậc so với thời điểm kiểm tra liệu rơm rạ với liều lượng 30kg/tấn rơm Thí trước đó, cịn (4,55± 0,16)x108 CFU/g song nghiệm bố trí gồm nghiệm thức: rơm+ đảm bảo tiêu VSV tuyển chọn chế IRTr, rơm+ IRTr+ supe lân, rơm+ TM-1+ supe phẩm phân hủy cellulose chất mang lân rơm+ TM-2+ supe lân Tỷ lệ giảm trọng lượng rơm nghiệm thức đánh giá trùng [13] 10 ngày/lần 90 ngày sau xử lý chế Trong mật độ bào tử nấm giảm mạnh độ phẩm Kết trình bày hình ẩm chế phẩm tăng khơng đáng kể trình bảo quản Sau tháng, độ ẩm chế phẩm Kết thu cho thấy, tỷ lệ giảm trọng lượng 13,74%, tăng thêm khoảng 3,5% so với độ ẩm khô rơm tất nghiệm thức tăng đến 10,39% chế phẩm ban đầu Bên cạnh đó, VSV thời điểm (tùy vào nghiệm thức) tạp nhỏ 100 CFU/g tất thời ổn định Ở nghiệm thức (rơm+ IRTr), điểm bảo quản, vượt xa so với yêu cầu VSV tạp (rơm+ IRTr+ supe lân) (rơm+ TM-1+ supe nhiễm quy định TCVN 6168 : 2002 (VSV lân), tỷ lệ giảm trọng lượng rơm tăng nhanh đến ngày 50, đạt 54,86 %, 60,54 % 57,57 % tạp không lớn 1x105 CFU/g chế phẩm) tương ứng với nghiệm thức Sau 50 ngày, Như vậy, chế phẩm IRTr phân hủy cellulose từ trình phân hủy chậm dần dừng lại, trọng lượng chủng Trichoderma đột biến phóng xạ có khơ rơm dần ổn định Ở nghiệm thức (rơm+ tiêu kỹ thuật đáp ứng TCVN 6168 : 2002, đồng TM-2+ supe lân), trình phân hủy rơm lâu thời chất lượng chế phẩm trì 16 Số 70 - Tháng 3/2022 THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN hơn, tỷ lệ giảm trọng lượng rơm tăng nhanh đến ngày thứ 60 (thay ngày thứ 50 nghiệm thức khác) dần ổn định TN kết thúc thức (rơm+ IRTr) thấp nghiệm thức (rơm+ IRTr+ supe lân) (các giá trị khác biệt có ý nghĩa thống kê) Như vậy, việc bổ sung thêm supe lân vào nguyên liệu rơm rạ thúc đẩy trình phân hủy rơm rạ hiệu Ở nghiệm thức (rơm+ TM-2+ supe lân), thời gian phân hủy (khoảng 60 ngày) lâu so với nghiệm thức khác (khoảng 50 ngày), tỷ lệ giảm trọng lượng khô rơm nghiệm thức thấp hầu hết thời điểm theo dõi Tỷ số C/N thông số quan trọng cho thấy mức độ hoại mục rơm rạ Tỷ số C/N thấp tương ứng với mức độ phân hủy hợp chất hữu nhanh [14] Hiện tượng tỷ số C/N giảm xuống trình phân hủy Hình Diễn biến giảm trọng lượng khô rơm VSV sử dụng carbohydrate để hoạt động tái tạo nguyên sinh chất, đồng thời chúng tổng hợp theo thời gian (khi bổ sung supe lân vào nguyên NO3- nên làm giảm hàm lượng carbon tăng liệu) hàm lượng N tổng số, làm tỷ số C/N giảm xuống Từ hình nhận thấy thời điểm, Tỷ số C/N ngày thứ 60 rơm nghiệm tỷ lệ giảm trọng lượng khơ rơm nghiệm thức trình bày bảng Bảng Ảnh hưởng bổ sung supe lân vào nguyên liệu sử dụng loại chế phẩm khác tới giảm trọng lượng tỷ số C/N rơm sau 60 ngày *Các chữ khác cột ghi nhận nghiệm thức (rơm+ IRTr+ supe khác biệt có ý nghĩa thống kê giá trị trung lân) bình với độ tin cậy 95% Như vậy, điều kiện bổ sung supe lân Các kết cho thấy tỷ số C/N rơm hỗ trợ trình phân hủy chế phẩm IRTr cho nghiệm thức giảm đáng kể ngày thứ 60 so hiệu phân hủy tốt so với chế phẩm TM-1 với rơm để tự nhiên (83,34), dao động từ 38,86- TM-2 (tỷ lệ giảm trọng lượng cao tỷ số 46,65 Rơm nghiệm thức (rơm+ TM-1+ supe C/N thấp hơn) Thời gian phân hủy rơm chế lân) có tỷ số C/N 42,74, thấp so với rơm phẩm IRTr TM-1 gần (khoảng 50 hai nghiệm thức: (rơm+ IRTr) (rơm+ TM- ngày), nhanh so với chế phẩm TM-2 (khoảng 2+ supe lân) Rơm hai nghiệm thức có tỷ 60 ngày) lệ giảm trọng lượng tỷ số C/N khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Tuy nhiên, rơm nghiệm thức sử dụng chế phẩm IRTr có thời KẾT LUẬN gian phân hủy ngắn Tỷ lệ giảm trọng lượng Các thông số kỹ thuật tối ưu trình lên cao (62,42%) tỷ số C/N thấp (38,86) Số 70 - Tháng 3/2022 17 THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN men bán rắn hai chủng Trichoderma đột biến phóng xạ VTCC(k) I-1và VTCC(r) I-1 xác định Sau lên men, mật độ bào tử trung bình (1,43±0,06)x1010 CFU/g (1,79±0,07) x1010 CFU/g tương ứng với chủng VTCC(k) I-1 VTCC(r) I-1 Chế phẩm IRTr tạo cách phối trộn hỗn hợp bào tử (≥1010 CFU/g) chủng Trichoderma đột biến với chất mang có thành phần tinh bột xanthan chiếu xạ khử trùng liều15 kGy Chế phẩm phân hủy cellulose IRTr có tiêu kỹ thuật đáp ứng TCVN 6168 : 2002, đồng thời chất lượng trì tháng sau sản xuất Thử nghiệm quy mơ phịng thí nghiệm cho thấy chế phẩm IRTr cho hiệu phân hủy tốt (tỷ lệ giảm trọng lượng cao tỷ số C/N thấp thời điểm) so với chế phẩm thương mại TM-1(TRICHO) TM-2 (TRICHODERMA) TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Martin, J P., Bransonand, R.L., Jarrell, W M (1978): Decomposition of organic material used in planting mixes and some effects on soil properties and plant growth Agrochimica, 22, 248-261 [2] Elliot, L., Cochra, V.L., Papendick, R I (1981): Wheat residues and nitrogen placement effects on wheat growth in green house Soil Sci., 131, 48-52 [3] Jacob, J., Grimmer, G., Hildebrandt, A (1997): Long-term decline of atmospheric and marine pollution by polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) Germany, Chemosphere, 34, 2099- 2108 [4] Diep, T.B., Thom, N.T., Sang, H.D., An T.X., Binh, N.V., Quynh, T.M (2020): Effect of gamma irradiation on the viability and cellulase production of some filamentous fungi Journal of Biotechnology, 18(2), 341-348 [5] Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 9294 : 2012 Phân bón- Xác địnhcarbon hữu tổng số phương pháp Walkley-Black Fertilizers – Determination of total organic carbon by Walkley – Black method [6] Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 451:2001 phân tích trồng - Phương pháp xác định Nitơ tổng số Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn ban hành 18 Số 70 - Tháng 3/2022 [7] Ogawa, A., Yasuhara, A., Tanaka, T., Sakiyama, T., Nakanishi, K (1995): Production of neutral protease by membrane – surface liquid culture of Aspergillus oryzae IAM2704 J Ferment Bioeng, 80, 35–40 [8] Wang, R., Law, R C S., Webb, C (2005): Protease production and conidiation by Aspergillus oryzae in flour fermentation Process Biochem, 40, 217 – 227 [9] Thanapimmetha, A., Luadsongkram, A., Tipatiwatanakun, B., Srinophakun, P (2012): Value added waste of Jatropha curcas residue: Opitimization of protease production in solid state fermentation DOE methodology, Industrial Crops and Products, 37, 1– [10] Nguyễn Đức Lượng (2010): Công nghệ vi sinh tập 2, NXB Đại học quốc gia TP.HCM [11] Lương Đức Phẩm (1998): Công nghệ vi sinh vật, NXB Nông nghiệp – Hà Nội [12] Smith, R.S (1992): Legume inoculant formulation and application Canadian Journal of Microbiology, 38(6), 485-492 [13] Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 6168: 2002 Chế phẩm vi sinh vật phân giải xenlulo Microbial preparation for cellulose degradation [14] Stratton, M.L., Barker, A V., Rechcigl, J E (1995): Compost Soil Admendments and Environmental Quality Research and Education Center Ona, Florida, 249-309 ... CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN chế phẩm [4] Bài báo trình bày kết nghiên cứu sản xuất chế phẩm phân hủy cellulose từ chủng Trichoderma đột biến phóng xạ hiệu phân hủy rơm rạ chế phẩm tạo quy mơ phịng thí... phối trộn tính tốn cho chế phẩm tạo có mật độ bào tử nấm ≥108 CFU/g chế phẩm 2.1.2.3 Nghiên cứu tạo chế phẩm Trichoderma 2.1.2.4 Đánh giá hiệu phân hủy rơm rạ chế phẩm Rơm khô cân cho vào thùng... 50 ngày, Như vậy, chế phẩm IRTr phân hủy cellulose từ trình phân hủy chậm dần dừng lại, trọng lượng chủng Trichoderma đột biến phóng xạ có khơ rơm dần ổn định Ở nghiệm thức (rơm+ tiêu kỹ thuật