Chương V HIỆU LỰC PHÒNG TRỪ SÂU HẠI CỦA MỘT SỐ CHỦNG EPN I CƠ SỞ ĐÁNH GIÁ HIỆU LỰC GÂY CHẾT SÂU HẠI CỦA CÁC CHỦNG EPN

Chương V HIỆU LỰC PHÒNG TRỪ SÂU HẠI CỦA MỘT SỐ CHỦNG EPN I CƠ SỞ ĐÁNH GIÁ HIỆU LỰC GÂY CHẾT SÂU HẠI CỦA CÁC CHỦNG EPN Mặc dù hầu hết chủng / lo ài tuyến trùng EPN ký sinh gây bệnh cho nhiều lo ài sâu hại khác thuộc số côn trùng Lepidoptera, Coleoptera, Diptera, Orthoptera, v.v khả ký sinh gây chết vật chủ chủng tuyến trùng đối tượng sâu hại lại khác Do vậy, để có sở phịng trừ thành công loại sâu hại cần phải đưa định là: i) sử dụng loại tuyến tr ùng kết ph òng trừ cao nhất; ii) nồng độ v liều xử lý (phun rải) tối ưu; iii) thời điểm sâu hại xuất đồng ruộng cần xử lý; v iv) cách thức phun rải tuyến trùng đồng ruộng (trong trường hợp phòng trừ loại sâu hại phần trồng tr ên mặt đất, thân th ì cần phối chế với chất thích hợp để giữ ẩm tăng khả bám dính c tuyến trùng Để có định nh cần thiết phải tiến h ành thử nghiệm, đánh giá khả ký sinh gây chết vật chủ sâu hại chủng tuyến tr ùng loại sâu hại Các tiêu cần đánh giá bao gồm: i) số LC 50 (lethal concentration) - tức nồng độ tuyến trùng mà hiểu số lượng tuyến trùng cảm nhiễm gây chết 50% sâu hại thử nghiệm (trong trường hợp thử nghiệm tuyến tr ùng EPN tiêu LC50 đồng nghĩa với ti LD 50 (lethal dose) hay liều lượng gây chết 50%) Một chủng tuyến tr ùng có LC 50 thấp chứng tỏ có độc lực tổ h ợp tuyến trùng vi khuẩn 110 Nguyễn Ngọc Châu mạnh, đồng thời chứng tỏ l loại sâu hại mẫn cảm với tuyến trùng ii) số LT 50 (lethal time) th ời gian gây chết 50% sâu hại thử nghiệm Thời gian n ày ngắn có nghĩa hoạt tính gây chết chủng EPN c àng mạnh chứng tỏ loại sâu hại mẫn cảm với tuyến tr ùng iii) tiêu cho phép đánh giá hoạt tính chủng tuyến trùng đối t ượng sâu hại l khả sinh sản (reproduction capacity) c tuyến trùng th ể côn trùng Sản lượng tuyến trùng cảm nhiễm sinh xác chết sâu hại lớn chứng tỏ đối t ượng sâu hại thử nghiệm l vật chủ thích hợp chủng tuyến tr ùng ký sinh Tuy nhiên, thực tế cần xác định LC 50 đủ sở để kết luận độc lực chủng EPN Để xác định LC 50 cần phải thiết kế thí nghiệm vớ i 10 cơng thức thí nghiệ m với nồng độ khác từ thấp đến cao v công thức đối chứng Đối với đa số sâu hại nồng độ ph nhiễm thường từ 10 - 100 IJs/sâu h ại Mỗi cơng thức thí nghiệm th ường sử dụng sâu hại lứa tuổi; sâu đ ược đặt riêng rẽ đĩa petri (35 x 15 mm) tr ên giấy lọc ẩm Mỗi đĩa sâu thí nghiệm cho l ượng xác IJs cần thiết Thí nghiệm theo dõi ngày điều kiện ph ịng thí nghiệm Sau ngày tất sâu chết đ ược chuyển sang bẫy n ước (White trap) ủ tiếp 5-7 ngày để thu lại tuyến tr ùng (Cabanillas & Raulston, 1994) Đ ể xử lý thống k ê thí nghi ệm phải lập lại 3-5 lần, tùy thuộc khả cung cấp s âu thí nghiệm Các sâu thử nghiệm đ ược xác nhận bị chết tuyến trùng có đủ yếu tố sau: (i) có đặc tr ưng chết tổ hợp tuyến trùng-vi khuẩn có mầu đặc trưng, khơng có mùi th ối vi sinh vật khác phân giải gây n ên; (ii) có mặt tuyến trùng sâu s ố lượng tuyến trùng tăng IJs đ ã sản sinh sâu h ại; (iii) thử nghiệm gây nhiễm trở lại đánh giá tăng hiệu lực diệt sâu hại tuyến tr ùng qua lần gây nhiễm loài sâu hại Số liệu thí nghiệm đ ược xử lý thống kê theo chương trình SPSS 11.0 ANOVA đ ể đánh giá sai khác có ý nghĩa khơng (với P < 0,05) Để xác định giá trị LC 50 số liệu sâu chết công thức nồng độ đ ược xử lý theo quy tr ình SAS Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 111 PROBIT Đánh giá n ồng độ phơi nhiễm tối ưu cho sinh sản tuyến trùng vật chủ sâu hại theo quy trình SAS Hi ệu lực tuyến trùng phun th nghiệm đồng ruộng xác định theo Henderson – Tilton Một chủng tuyến trùng EPN hội nhập tất tiêu đánh giá đư ợc coi tác nhân tiềm lý tưởng cho PTSH Tuy nhiên, th ực tế không thiết phải đáp ứng tất tiêu chí tác nhân PTSH lý t ưởng Khả ký sinh gây chết vật chủ tiêu chí quan tr ọng định sử dụng chủng tuyến tr ùng phòng trừ loài sâu hại Trong phần n ày, khả ký sinh gây chết vật chủ chủng tuyến trùng địa đánh giá số sâu hại Việt Nam II HIỆU LỰC GÂY CHẾT CỦA MỘT SỐ CHỦNG EPN TRONG ĐIỀU KIỆN PHỊNG THÍ NGHIỆM Hiệu lực gây chết sâu hại chủng S-TK10 Khả ký sinh gây chết chủng tuyến tr ùng S-TK10 thử nghiệm với lo ài sâu hại quan trọng phổ biến Việt Nam sâu khoang (Spodoptera litura Fabricius), sâu tơ (Plutela xylostella Linnaeus), sâu xanh b ướm trắng (Pieris rapae Linnaeus), sâu đậu tương (Omiodes indicata Fabricius) bọ đen (Alissonotum impressicolle Arrow) Thí nghiệm sâu khoang đư ợc tiến hành với 10 công thức nồng độ phơi nhiễm lặp lại lần với tổng số 225 sâu Theo dõi số sâu chết ngày phơi nhiễm cho thấy: công thứ c nồng độ 10 IJs có 15% sâu khoang chết Tỷ lệ chết n ày tăng dần lên đến 35 45% nồng độ phơi nhiễm 20 30 IJs Ở công thức nồng độ phơi nhiễm cao từ 40 đến 70 IJs th ì tỷ lệ sâu khoang chết khoảng 60-65% Ở nồng độ phơi nhiễm cao 100 IJs tỷ lệ sâu khoang chết đạt cao l 85% (Bảng 16) Với LC 50 = 35 IJs cho thấy độc tố chủng S-TK10 sâu khoang mạnh Nguyễn Ngọc Châu 112 Bảng 16 Hiệu lực gây chết sâu khoang chủng S -TK10 (Nhiệt độ: 21,3-26,1ºC, độ ẩm: 80-86%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 10 20 15,0 20 20 35,0 30 20 45,0 40 20 12 60,0 50 20 13 65,0 60 20 12 60,0 70 20 13 65,0 80 20 15 75,0 90 20 15 75,0 100 20 17 85,0 LD50 = 35 100 Tỷ lệ chết 80 1.2 y = 0.1839x - 0.7998 R2 = 0.8716 0.8 0.4 60 0.0 40 -0.4 20 -0.8 -1.2 Normonv (Tỷ lệ chết) Log (Số lượng IJs) 1.0 1.3 1.5 1.6 1.7 1.8 1.8 1.9 2.0 2.0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Normonv (Tỷ lệ chết)) Normonv (Tỷ lệ chết) Hình 26 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng S-TK10 sâu khoang Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 113 Với R2 = 0,87 chứng tỏ nồng độ phơi nhiễm tỷ lệ chết thí nghiệm có mối tương quan chặt chẽ (Hình 26) Đánh giá khả ký sinh gây chết s âu tơ tuyến trùng STK10 thực công thức khác từ đến 30 IJs Mỗi cơng thức thí nghiệm sâu t ơ, lặp lại lần với tổng số 120 sâu Bảng 17 Hiệu lực gây chết sâu tơ chủng S-TK10 (Nhiệt độ: 23,7-26,5ºC, độ ẩm: 79-85%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 20 30,0 10 20 35,0 15 20 10 50,0 20 20 12 60,0 25 20 15 75,0 30 20 16 80,0 LD50 = 12 Khác với thí nghiệm sâu khoang, cơng thức nồng độ thí nghiệm sâu tơ thiết kế với cấp độ nồng độ phơi nhiễm nhỏ Bởi thực tế trước thí nghiệm xác định LC 50 loại sâu hại, thường tiến hành test nồng độ cho số loại sâu hại nhằm xác định s độc tố chủng tuyến trùng lồi trùng Trên sở test thiết kế cơng thức nồng độ thích hợp cho loại sâu hại Kết thí nghiệm cho thấy sâu t mẫn cảm với chủng S TK10 Ngay công thức nồng độ ph nhiễm ban đầu IJs S-TK10 có 30% sâu tơ chết sau ngày thí nghiệm nồng độ phơi nhiễm cao 30 IJs tỷ lệ sâu tơ chết đạt 80% Giá trị LC50 thí nghiệm 12 IJs cho thấy sâu tơ mẫn cảm với Nguyễn Ngọc Châu 114 chủng S-TK10 có nghĩa chủng tuyến trùng có độc tố cao sâu tơ 1.5 100 Tỷ lệ chết 80 1.2 y = 0.2932x - 0.883 R2 = 0.9849 0.8 60 0.4 40 0.0 20 -0.4 -0.8 10 15 20 25 Norminv (Tỷ lệ chết) 0.7 Log (Số lượng IJs) 1.0 1.2 1.3 1.4 30 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 27 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng S-TK10 sâu tơ Thí nghiệm với sâu xanh b ướm trắng tiến hành cơng thức thí nghiệm, với nồng độ ph nhiễm từ đến 40 IJs Thí nghiệm lặp lại lần v tổng số 160 sâu xanh b ướm trắng thí nghiệm Kết thí nghiệm cho thấy S -TK10 có khả ký sinh gây ch ết sâu xanh bướm trắng cao Chỉ với nồng độ phơi nhiễm ban đầu thấp l 10 IJs t ỷ lệ sâu chết đạt 25 35% Ở công thức nồng độ ph nhiễm 35 40 IJs tỷ lệ chết sâu xanh b ướm trắng đạt tới 90 100% (Bảng 18) Giá trị LC 50 = 13 IJs cho th chủng STK10 có độc tố cao sâu xanh b ướm trắng Giá trị R = 0,98 cho thấy mối tương quan chặt chẽ nồng độ gây nhiễm tỷ lệ chết sâu xan h bướm trắng Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 115 Bảng 18 Hiệu lực gây chết sâu xanh b ướm trắng chủng S-TK10 (Nhiệt độ: 21,1-25,4ºC, độ ẩm: 77-90%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 20 25,0 10 20 35,0 15 20 40,0 20 20 12 60,0 25 20 13 65,0 30 20 17 85,0 35 20 18 90,0 40 20 20 100 LD50 = 13 0.7 1.0 Log (Số lượng IJs) 1.2 1.3 1.4 1.5 1.5 1.6 Tỷ lệ chết 80 3.2 y = 0.3969x - 1.2899 R2 = 0.9401 2.4 1.6 60 0.8 40 0.0 20 -0.8 Norminv (Tỷ lệ chết) 100 -1.6 10 15 20 25 30 35 40 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 28 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng S-TK10 sâu xanh bư ớm trắng Trên đối tượng sâu đậu tương, thí nghiệm bố trí với cơng thức từ 10 đến 100 IJs S -TK10 sâu Mỗi cơng thức thí nghiệm nhắc lại lần Tổng cộng có 180 sâu đậu tương sử dụng cho thí nghiệm Nguyễn Ngọc Châu 116 Bảng 19 Hiệu lực gây chết sâu đậu t ương chủng S-TK10 (Nhiệt độ: 22,4-27,4ºC, độ ẩm: 74-89%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 10 20 20,0 20 20 25,0 30 20 45,0 40 20 13 65,0 50 20 16 80,0 60 20 15 75,0 70 20 16 80,0 80 20 18 90,0 100 20 19 95,0 LD50 = 28 Kết thí nghiệm cho thấy tỷ lệ chết sâu đậu t ương tăng nhanh nồng độ phơi nhiễm 30 40 IJs tỷ lệ sâu chết cao 95% nồng độ gây nhiễm 100 IJs (Bảng 19) Log (Số lượng IJs) 1.0 1.3 1.5 1.6 1.7 1.8 1.8 1.9 2.0 Tỷ lệ chết 80 2.4 y = 0.3006x - 1.0556 R2 = 0.944 1.6 60 0.8 40 0.0 20 -0.8 Norminv (Tỷ lệ chết) 100 -1.6 10 20 30 40 50 60 70 80 100 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 29 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng S-TK10 sâu đậu tương Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 117 Giá trị LC50 = 28 IJs cho thấy chủng S-TK10 có độc tố cao sâu đậu t ương Thí nghiệm bọ đen trưởng thành bố trí 10 công thức nồng độ cao từ 100 đến 5000 IJs v cơng thức thí nghiệm sử dụng 10 bọ đen, nhắc lại lần Tổng cộng có 500 bọ đen sử dụng cho thí nghiệm Sau ngày phơi nhiễm, tỷ lệ bọ chết 10% công thức nồng độ 100 IJs Tỷ lệ chết tăng lên mức 30% trở lên công thức nồng độ phơi nhiễm 400, 600, 800 IJs Sau tỷ lệ chết tăng chậm v đến số lượng 2000 IJs gây chết 58% Ở công thức nồng độ cao 5000 IJs tỷ lệ bọ chết đạt 80% (Bảng 20) Giá trị LC50 = 1492 IJs cao hàng trăm l ần so với LC 50 loại sâu hại khác Điều n ày cho thấy để phịng trừ có hiệu bọ đen cần phải xử lý S-TK10 liều cao nhiều so với liều xử lý nhiều loại sâu hại khác Bảng 20 Hiệu lực gây chết bọ đen chủng S-TK10 (Nhiệt độ: 25,2-28,3ºC, độ ẩm: 71-87%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 100 50 10,0 200 50 10 20,0 400 50 15 30,0 600 50 17 34,0 800 50 15 30,0 1000 50 20 40,0 1200 50 20 40,0 1600 50 22 44,0 2000 50 29 58,0 5000 50 40 80,0 LD50 = 1492 Tuy nhiên, kết phù hợp với kết thử nghiệm gây chết bọ tác giả khác (Wang & Li,1987 ; Li et al., 1983) Mặc dù bọ đối tượng mẫn cảm với hầu hết chủng EPN, đối tượng to khỏe sinh khối lớn nên để tiêu diệt bọ cần phải sử dụng liều EPN cao Nguyễn Ngọc Châu 118 Log (Số lượng IJs) 2.0 2.3 2.6 2.8 2.9 3.0 3.1 3.2 3.3 3.7 Tỷ lệ chết 80 1.2 y = 0.1759x - 1.2875 R2 = 0.8662 0.8 0.4 60 0.0 40 -0.4 -0.8 20 -1.2 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) 5000 2000 1600 1200 1000 800 600 400 200 -1.6 100 Norminv (Tỷ lệ chết) 100 Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 30 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng S-TK10 bọ đen Như vậy, loại sâu hại thử nghiệm với chủng S -TK10 mẫn cảm với chủng S -TK10 có giá trị LC 50 thấp (ngoại trừ đối tượng bọ đen) Trên sở kết thử nghiệm khẳng định chủng S-TK10 hồn tồn đáp ứng u cầu tác nhân PTSH lo ài sâu hại Hiệu lực phòng trừ sâu hại S-TX1 Chủng tuyến trùng S-TX1 thử nghiệm loài sâu hại sâu xanh (Helicoverpa armigera Hübner), sâu tơ (Plutella xylostella Linnaeus) bọ đen (Alissonotum impressicolle Arrow) để đánh giá khả ký sinh gây chết lo ài sâu hại Đối với sâu xanh, thí nghiệm đ ược thiết kế với 10 cơng thức nồng độ, từ đến 100 IJs Mỗi công thức sâu xanh , lặp lại lần có tất 225 sâu xanh sử dụng cho thí nghiệm Kết thí nghiệm cho thấy: cơng thức nồng độ ph nhiễm IJs sâu chết sau ngày theo dõi Tỷ lệ sâu chết ghi nhận 10% công thức nồng độ phơi nhiễm IJs tỷ lệ tăng lến đến Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 119 15% 30% công thức số l ượng 10 20 IJs Đến công thức nồng độ phơi nhiễm 80 100 IJs tỷ lệ chết đạt 100% Bảng 21 Hiệu lực gây chết sâu xanh chủng S -TX1 (Nhiệt độ: 25,7-30,3ºC, độ ẩm: 70-83%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 20 0 20 10,0 10 20 15,0 20 20 30,0 30 20 11 55,0 40 20 15 75,0 50 20 14 70,0 60 20 18 90,0 80 20 20 100 100 20 20 100 LD50 = 18 Giá trị LC50 chủng S-TX1 18 IJs cho thấy mẫn cảm chủng tuyến trùng này, đối tượng sâu hại có khả kháng mạnh với nhiều loại thuốc hóa học 120 Tỷ lệ chết 100 80 4.0 3.0 2.0 1.0 0.0 -1.0 -2.0 -3.0 -4.0 y = 0.6152x - 3.0983 R2 = 0.9402 60 40 20 Norminv (Tỷ lệ chết) Log (Số lượng IJs) 0.0 0.7 1.0 1.3 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 10 20 30 40 50 60 80 100 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 31 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng S-TX1 sâu xanh Nguyễn Ngọc Châu 120 Thí nghiệm xác định hiệu lực gây chết chủng S -TX1 sâu tơ tiến hành với 10 công thức nồng độ từ đến 50 IJs v lặp lại lần với tổng số 225 sâu đ ược sử dụng Bảng 22 Hiệu lực gây chết sâu tơ chủng S-TX1 (Nhiệt độ: 25,4-27,7ºC, độ ẩm: 81-86%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 20 30,0 10 20 10 50,0 15 20 12 60,0 20 20 13 65,0 25 20 15 75,0 30 20 16 80,0 35 20 15 75,0 40 20 18 90,0 45 20 19 95,0 50 20 20 100 LD50 = 11 100 Tỷ lệ chết 80 2.8 2.4 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 0.0 -0.4 -0.8 y = 0.2627x - 0.6891 R2 = 0.9252 60 40 20 Norminv (Tỷ lệ chết) Log (Số lượng IJs) 0.7 1.0 1.2 1.3 1.4 1.5 1.5 1.6 1.7 1.7 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 32 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng S-TX1 sâu tơ Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 121 Kết thử nghiệm cho thấy: với IJs đ ã có khả gây chết 30% sâu tơ công thức nồng độ phơi nhiễm ban đầu tỷ lệ chết đạt 50% nồng độ phơi nhiễm 10 IJs Tỷ lệ chết sâu t đạt 95% 100% nồng độ phơi nhiễm 45 50 IJs (Bảng 22) Giá trị LD50 S-TK10 12 IJs cho thấy sâu tơ đối tượng mẫn cảm với chủng S-TX1, đối tượng kháng mạnh với nhiều loại thuốc hóa học Hiệu lực gây chết bọ đen tr ưởng thành chủng S-TX1 thử nghiệm với 10 công thức nồng độ, từ 100 đến 5000 IJs Mỗi công thức 10 bọ hung, lặp lại lần tổng số 550 bọ đen cho thử nghiệm Kết thử nghiệm cho thấy: bọ bắt đầu chết với tỷ lệ 10% công thức nồng độ ph nhiễm ban đầu 100 IJs tỷ lệ tăng lên công thức nồng độ phơi nhiễm cao hơn, đạt tỷ lệ cực đại 82% công thức nồng độ phơi nhiễm cao 5000 IJs (Bảng 23) Bảng 23 Hiệu lực gây chết bọ đen chủng S -TX1 (Nhiệt độ: 26,1-28,9ºC, độ ẩm: 74-87%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 100 50 10,0 200 50 16,0 400 50 12 24,0 600 50 17 34,0 800 50 18 36,0 1000 50 20 40,0 1200 50 22 44,0 1600 50 26 52,0 2000 50 32 64,0 5000 50 41 82,0 LD50 = 1286 Giá trị LC50 = 1286 IJs thấp so với kết thử nghiệm với chủng S-TK10 (LC 50 = 1492 IJs) Như vậy, kết cho thấy: hai chủng S-TX1 S-TK10 có khả diệt bọ đen, sử dụng chủng S-TX1 để diệt đen trưởng thành cho hiệu cao Nguyễn Ngọc Châu 122 Log (Số lượng IJs) 2.0 2.3 2.6 2.8 2.9 3.0 3.1 3.2 3.3 3.7 Tỷ lệ chết 80 1.2 y = 0.2055x - 1.4138 R2 = 0.9467 0.8 0.4 60 0.0 40 -0.4 -0.8 20 -1.2 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) 5000 2000 1600 1200 1000 800 600 400 200 -1.6 100 Norminv (Tỷ lệ chết) 100 Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 33 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng S-TX1 bọ đen Hiệu lực gây chết sâu hại H -MP11 Hiệu lực gây chết sâu hại chủng tuyến tr ùng H-MP11 đánh giá đối tượng sâu hại quan trọng Việt Nam l à: sâu xanh (Helicoverpa armigera Hübner), sâu keo da láng (Spodoptera exigua Hübner), sâu tơ (Plutella xylostella Linnaeus) bọ đen (Alissonotum impressicolle Arrow) Thử nghiệm với chủng H-MP11 tiến hành với 10 công thức từ đến 100 IJs, công thức sâu, TN đ ược lặp lại lần tổng cộng 225 sâu thí nghiệm Kết thử nghiệm cho thấy: công thức nồng độ phơi nhiễm IJs sâu xanh không bị chết Đến công thức IJs có 15% sâu xanh chết Phải đến 50 IJs th ì tỷ lệ sâu chết đạt 50% Tỷ lệ chết cao thí nghiệm n ày 75% công thức nồng độ phơi nhiễm 100 IJs (Bảng 24) Giá trị LC 50 H-MP11 sâu xanh thí nghiệm 45 IJs cao nhi ều so với LD 50 S-TX1 sâu xanh (là 18 IJs) Đi ều chứng tỏ khả ký sinh gây chết sâu xanh H-MP11 S -TX1 Nói cách khác sâu xanh mẫn cảm với tuyến tr ùng S-TX1 H-MP11 Như vậy, để xử lý sâu xanh sử dụng chủng S-TX1 cho hiệu cao h ơn Tuy Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 123 nhiên cần thấy chủng Heterorhabditis thường có khả sinh sản môi tr ường in vivo cao nhiều so với chủng Steinernema Bảng 24 Hiệu lực gây chết sâu xanh chủng H -MP11 (Nhiệt độ: 24,3-27,9ºC, độ ẩm: 80-90%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 10 20 30 40 50 60 80 100 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 11 11 11 15 15,0 25,0 30,0 40,0 35,0 55,0 55,0 55,0 75,0 LD50 = 45 Log(Số lượng IJs) 0.0 0.7 1.0 1.3 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 y = 0.2899x - 2.0858 R2 = 0.7182 Norminv(T -1 T ỷl ệch ế t -2 -3 -4 10 20 30 40 50 60 80 100 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 34 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng H-MP11 sâu xanh ỷl ệch ế t) 80 70 60 50 40 30 20 10 Nguyễn Ngọc Châu 124 Thử nghiệm xác định hiệu lực gây chết chủng H -MP11 sâu keo da láng với 10 công thức nồng độ phơi nhiễm từ 10 đến 100 IJs Mỗi công thức sâu lần lặp lại với tổng số 176 sâu Kết thử nghiệm cho thấy sâu keo da láng mẫn cảm với chủng H MP11 (Bảng 25) Ngay công thức đầu ti ên có 56,3-62,5% sâu bị chết tỷ lệ sâu chết đạt 93,8-100% công thức gây nhiễm 80-100 IJs Bảng 25 Hiệu lực gây chết sâu keo da láng chủng H -MP11 (Nhiệt độ: 27,7-28,3ºC, độ ẩm: 77-81%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 10 13 12 13 13 14 16 15 16 62,5 56,3 81,3 75,0 81,3 81,3 87.5 100 93,8 100 LD50 = 12 Log (Số lượng IJs) 1.0 1.3 1.5 1.6 1.7 1.8 1.8 1.9 2.0 2.0 2.8 2.4 Tỷ lệ chết 80 2.0 60 1.6 40 1.2 20 y = 0.2202x - 0.0961 R2 = 0.7979 0.8 0.4 Norminv (Tỷ lệ chết) 100 0.0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 35 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng H-MP11 sâu keo da láng Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 125 Thử nghiệm với sâu tơ triển khai với 10 công thức nồng độ phơi nhiễm từ đến 50 IJs Mỗi công thức sâu, nhắc lại lần với tổng số 225 sâu Thí nghiệm cho thấy nồng độ phơi nhiễm IJs có 30% sâu tơ chết Ở công thức 15, 20, 25 IJs tỷ lệ sâu t chết 50% Ở cơng thức cao 50 IJs th ì tỷ lệ sâu tơ chết đạt cao 95% (Bảng 26) Bảng 26 Hiệu lực gây chết sâu t chủng H-MP11 (Nhiệt độ: 23,6-27,7ºC, độ ẩm: 71-86%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 10 15 20 25 30 35 40 45 50 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 10 10 10 13 14 14 14 19 30,0 40,0 50,0 50,0 50,0 65,0 70,0 70,0 70,0 95,0 LD50 = 15 100 Tỷ lệ chết 80 2.0 1.6 y = 0.1791x - 0.7024 R2 = 0.8217 60 1.2 0.8 40 0.4 0.0 20 -0.4 -0.8 Norminv (Tỷ lệ chết) Log (Số lượng IJs) 0.7 1.18 1.3 1.4 1.481.54 1.6 1.65 1.7 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Hình 36 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng H-MP11 sâu tơ Nguyễn Ngọc Châu 126 Giá trị LD50 sâu tơ 15 IJs cao so v ới giá trị LD50 chủng tuyến trùng S-TK10 12 S-TX1 11 IJs Như khả ký sinh gây chết sâu t H-MP11 S-TK10 S-TX1, sâu tơ tỏ mẫn cảm với S-TK10 S-TX1 H-MP11 Thí nghiệm xác định khả gây chết H-MP11 bọ đen trưởng thành bố trí với 10 cơng thức từ 100 đến 5000 IJs, công thức 10 bọ tổng số 550 bọ cho thử nghiệm Bảng 27 Hiệu lực gây chết bọ đen chủng H -MP11 (Nhiệt độ: 25,7-29,4ºC, độ ẩm: 80-91%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 100 50 12,0 200 50 18,0 400 50 12 24,0 600 50 16 32,0 800 50 20 40,0 1000 50 21 42,0 1200 50 26 52,0 1600 50 28 56,0 2000 50 30 60,0 5000 50 45 90,0 LD50 = 1077 Sau ngày phơi n hiễm tỷ lệ bọ đen chết công thức nồng độ phơi nhiễm 100 200 IJs th ấp, đạt 12 đến 18% Tỷ lệ chết tăng l ên công thức Ở cơng thức 1200 IJs tỷ lệ chết đạt 52% C ịn cơng thức 5000 IJs tỷ lệ chết đạt 90% số l ượng bọ thử nghiệm (Bảng 27) Giá trị LD 50 thí nghiệm 1077 IJs Giá tr ị thấp Chương V Hiệu lực phòng trừ sâu hại số chủng EPN 127 so sánh v ới thí nghiệm trước đối tượng bọ đen (1492 IJs đ ối với S-TK10 1286 IJs đ ối với S-TX1) Điều có nghĩa chủng H-MP11 có khả diệt bọ đen tốt chủng S-TK10 S-TX1 Nhìn chung loại sâu thử nghiệm sâu xanh, sâu keo da láng, sâu tơ b ọ đen, tỏ mẫn cảm với chủng tuyến trùng H-MP11 chủng tuyến trùng H-MP11 sử dụng để thử nghiệm phịng trừ lồi sâu hại Log (Số lượng IJs) 2.0 2.3 2.6 2.8 2.9 3.0 3.1 3.2 3.3 3.7 Tỷ lệ chết 80 1.6 y = 0.2193x - 1.4044 R2 = 0.9058 1.2 0.8 0.4 60 0.0 40 Norminv (Tỷ lệ chết) 100 -0.4 -0.8 20 -1.2 5000 2000 1600 1200 1000 800 600 400 200 -1.6 100 Số lượng IJs Tỷ lệ chết Linear (Norminv (Tỷ lệ chết)) Norminv (Tỷ lệ chết) Đồ thị 37 Tương quan nồng độ nhiễm IJs với tỷ lệ sâu chết chủng H-MP11 bọ đen Hiệu lực gây chết sâu hại H -NT3 Chủng tuyến trùng H-NT3 chủng lo ài tuyến trùng Heterorhabditis indica Việt Nam coi Nguyễn Ngọc Châu 128 chủng tuyến trùng địa có nhiều ưu điểm bật khả di chuyển tốt khả sinh sản cao c thể côn trùng vật chủ Nghiên cứu khả gây chết sâu hại chủng H NT3 tiến hành đối tượng sâu hại sâu keo da láng, sâu xám, sâu khoang, sâu tơ b ọ đen Thử nghiệm đánh giá khả gây chết sâu keo da láng chủng H-NT3 tiến hành với công thức nồng độ gây nhiễm từ 10 đến 100 IJs Mỗi công thức gồm sâu, lặp lại lần với tổng số 320 sâu thử nghiệm Trong thí nghiệm sâu keo da láng bắt đầu chết công thức nồng độ 10, 20, 30, 40 IJs với tỷ lệ cao l 62,5% Ở cơng thức 80 100 IJs tỷ lệ sâu chết 100% (Bảng 28) Gi trị LD50 = 14 IJs sâu keo da láng cho thấy mẫn cảm sâu chủng tuyến trùng H-NT3 Giá trị cao chút so với chủng H-MP11 chủng có tiềm lớn để phòng trừ sâu keo da láng Bảng 28 Hiệu lực gây chết sâu keo da láng chủng H -NT3 (Nhiệt độ: 27,9-28,9ºC, độ ẩm: 79-84%) Số lượng IJs Số sâu TN Số sâu chết Tỷ lệ chết (%) 10 32 20 62,5 20 32 20 62,5 30 32 20 62,5 40 32 20 62,5 50 32 22 68,7 60 32 24 75,0 70 32 28 87,5 80 32 32 100 100 32 32 100 LD50 = 14