2 nghiên cứu sự di truyền bệnh beta thalassemia trong một số gia đình bệnh nhân khu vực đồng bằng sông cửu long PHạm thi NGọc NGa

đề tài “NGHIÊN CỨU SỰ DI TRUYỀN BỆNH BETA THALASSEMIA TRONG 12 GIA ĐÌNH trẻ mắc BỆNH NHÂN KHU VỰC ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG, có tổng Xây dựng phả hệ: 7 phả hệ dân tộc Kinh, 03 phả hệ dân tộc Khmer, 1 phả hệ dân tộc Chăm và 1 phả hệ dân tộc Hoa được xây dựng Tất cả các bệnh nhân βThal (có 2 đột biến) và người mang gen bệnh (có 1 đột biến) trong phả hệ đều được di truyền và tổ hợp các đột biến từ bố mẹ, ông bà ở thế thệ thứ I và thứ II. 100% phả hệ mang đặc điểm di truyền gen lặn trên nhiễm sắc thể thường theo quy luật của Mendel.

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG NGHIÊN CỨU SỰ DI TRUYỀN BỆNH BETA THALASSEMIA TRONG MỘT SỐ GIA ĐÌNH BỆNH NHÂN KHU VỰC ĐỒNG BẰNG SƠNG CỬU LONG TS PHẠM THỊ NGỌC NGA Cần Thơ – năm 2019 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG NGHIÊN CỨU SỰ DI TRUYỀN BỆNH BETA THALASSEMIA TRONG MỘT SỐ GIA ĐÌNH BỆNH NHÂN KHU VỰC ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG Chủ nhiệm đề tài: Cán phối hợp: TS PHẠM THỊ NGỌC NGA TS CAO THỊ TÀI NGUYÊN CNCĐ TRỊNH MINH THIẾT Cần Thơ – năm 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thân nhóm nghiên cứu Các số liệu, kết trình bày đề tài trung thực chưa công bố nghiên cứu trước Tác giả đề tài Phạm Thị Ngọc Nga MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC PHẦN I TÓM TẮT ĐỀ TÀI PHẦN TỒN VĂN CƠNG TRÌNH DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH SÁCH BẢNG DANH SÁCH HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 Bệnh Beta thalassemia .3 1.1.1 Đặc điểm phân tử bệnh Beta thalassemia .3 1.1.2 Di truyền bệnh Beta thalassemia 1.1.3 Cơ chế gây chức sinh học kiểu đột biến gen betaglobin 1.1.4 Đột biến gây bệnh Beta thalassemia .6 1.1.5 Các thể bệnh Beta thalassemia 11 1.1.6 Chẩn đoán bệnh Beta thalassemia .15 1.1.7 Điều trị Beta thalassemia 16 1.1.8 Phòng bệnh Beta thalassemia 18 1.2 Phương pháp lập phân tích phả hệ bệnh Beta thalassemia .19 1.2.1 Ý nghĩa phương pháp nghiên cứu phả hệ .19 1.2.2 Phương pháp lập phả hệ 20 1.2.3 Phân tích phả hệ 20 1.2.4 Các ký hiệu dùng để lập gia hệ 21 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Đối tượng nghiên cứu 23 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 23 2.3 Phương pháp nghiên cứu .24 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu .24 2.3.2 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu 24 2.3.3 Nội dung nghiên cứu 24 2.3.4 Phương pháp thu thập số liệu 26 2.3.5 Phương pháp hạn chế sai số 35 2.3.6 Phương pháp xử lý số liệu 36 2.4 Đạo đức nghiên cứu 36 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 37 3.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu 37 3.2 Phả hệ di truyền số bệnh nhân Beta thalassemia .37 3.3.1 Các xét nghiệm kỹ thuật dùng sàng lọc, xác định người mang gen đột biến phả hệ nghiên cứu 37 3.3.2 Xây dựng phả hệ di truyền 40 3.3 Tỷ lệ mang gen bệnh, tỷ lệ kiểu đột biến thể bệnh phả hệ nghiên cứu 53 3.3.1 Tỷ lệ mang gen bệnh phả hệ nghiên cứu 53 3.3.2 Tỷ lệ kiểu đột biến tỷ lệ thể bệnh 12 phả hệ 54 CHƯƠNG BÀN LUẬN 56 4.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu 56 4.2 Phả hệ di truyền số bệnh nhân Beta thalassemia .56 4.3.1 Các xét nghiệm kỹ thuật dùng sàng lọc, xác định người mang gen đột biến phả hệ nghiên cứu 56 4.3.2 Xây dựng phả hệ di truyền 57 4.3 Tỷ lệ mang gen bệnh, tỷ lệ kiểu đột biến thể bệnh phả hệ nghiên cứu 62 4.3.1 Tỷ lệ mang gen bệnh phả hệ nghiên cứu 62 4.3.2 Tỷ lệ kiểu đột biến tỷ lệ thể bệnh 12 phả hệ 64 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Phụ lục 1: tờ thông tin dành cho bệnh nhân gia đình nghiên cứu Phụ lục 2: phiếu đồng thuận nghiên cứu bệnh Beta thalassemia Phụ lục 3: phiếu thông tin Phụ lục 4: danh sách đối tượng tham gia 12 phả hệ PHẦN I TÓM TẮT ĐỀ TÀI Đặt vấn đề mục tiêu nghiên cứu Thalassemia bệnh Hemoglobin (Hb) di truyền đơn gen theo kiểu Mendel phổ biến Bệnh đột biến (ĐB) gen globin gây Bệnh đa số di truyền theo quy luật gen lặn, β-Thal di truyền trội phát người châu Âu Nhật Bản [43], [58], [82], [83] Việt Nam nước có tỷ lệ mắc bệnh mang gen bệnh cao Và theo báo cáo Chi hội Tan máu bẩm sinh khu vực Tây Nam Bộ, năm 2015, Đồng sơng Cửu Long có khoảng 2.105 người bị Thalassemia bệnh viện chẩn đoán, chưa tìm thấy nghiên cứu di truyền bệnh β-Thal gia đình có bệnh nhân mắc bệnh Đây lý đề tài “Nghiên cứu di truyền bệnh Beta-Thalassemia số gia đình bệnh nhân khu vực Đồng Sông Cửu Long” thực nhằm mục tiêu: (1) Xây dựng phả hệ di truyền hệ 12 gia đình bệnh nhân βThal khu vực Đồng Bằng Sông Cửu Long (2) Xác định tỷ lệ mang gen bệnh, tỷ lệ kiểu đột biến gen gây bệnh thể bệnh β-Thal phả hệ Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng nghiên cứu Đối tượng bệnh nhân khơng phân biệt tuổi giới tính, có hộ thuộc 13 tỉnh thành phố thuộc khu vực Đồng sơng Cửu Long chẩn đốn mắc bệnh -Thal dựa theo kết điện di Hb tất người thân có mối quan hệ huyết thống phạm vi hệ với bệnh nhân 2.2 Phương pháp nghiên cứu - Thiết kế nghiên cứu: nghiên cứu mô tả cắt ngang - Cỡ mẫu: áp dụng cơng thức: n = Z(1-α/2)2 x p(1-p)/d2 Trong đó: Z = 1,96 (hệ số tin cậy với mức ý nghĩa α = 0,05) p tỷ lệ người mang gen bệnh phả hệ bệnh nhân β-Thal Theo nghiên cứu Phạm Thị Phượng (2013) tỷ lệ 17,6% Do đó, nghiên cứu chọn p= 0,176 d = sai số cho phép nghiên cứu, chọn d = 0,05 Vậy n = 223 người Ước tính trung bình phả hệ nghiên cứu khoảng 20 thành viên Như vậy, số phả hệ cần xây dựng nghiên cứu 12 phả hệ - Phương pháp chọn mẫu: chọn mẫu thuận tiện 12 đối tượng xác định bệnh -Thal thể nặng theo nhóm dân tộc sống Đồng Sông Cửu Long: 07 gia đình bệnh nhân dân tộc Kinh, gia đình bệnh nhân dân tộc Khmer, gia đình bệnh nhân dân tộc Hoa gia đình bệnh nhân dân tộc Chăm - Các bước nghiên cứu: + 12 bệnh nhân người có quan hệ huyết thống hệ đồng ý tham gia nghiên cứu, lấy thông tin 2mL máu tĩnh mạch, chống đông EDTA làm công thức máu 18 thông số + Người nhà tham gia nghiên cứu có kết dương tính với số MCV và/hoặc MCH thực kỹ thuật điện di Hb để tìm người mang gen bệnh + Người mang gen bệnh ly trích DNA thực xác định 22 kiểu ĐB phổ biến kỹ thuật RDB để xác định thể bệnh β-Thal GAPPCR tìm ĐB gây α-Thal + Tổng kết vẽ phả hệ theo quy ước quốc tế, xác định tỷ lệ mang gen bệnh tỷ lệ thể bệnh phả hệ nghiên cứu Kết nghiên cứu 3.1 Xây dựng phả hệ di truyền 3.1.1 Các xét nghiệm kỹ thuật dùng sàng lọc, xác định người mang gen đột biến phả hệ nghiên cứu - Cơng thức máu: 146/251 (58,2%) đối tượng có kết dương tính với số MCV/MCH (MCV3,5), 33 thể dị hợp HbE (HbE tăng) - Kỹ thuật RDB tìm đột biến gây bệnh β-Thal: 101/103 (98,1%) bệnh nhân tìm ĐB gen β-globin; bệnh nhân khơng tìm ĐB tiếp tục tìm ĐB kỹ thuật MLPA - Kỹ thuật GAP-PCR tìm đột biến gây bệnh α-Thal, kết có bệnh nhân mang có đột biến –SEA Trong đó, 6/8 bệnh nhân người mang gen gây bệnh α-Thal 2/8 bệnh nhân người mang gen phối hợp α β-Thal (thể dị hợp tử phối hợp ĐB α/β-Thal) bệnh nhân ngồi đột biến –SEA, kỹ thuật RDB tìm ĐB gây bệnh β-Thal - Kỹ thuật MLPA: bệnh nhân làm MLPA mang đột biến giống (δβ)del 3.1.2 Xây dựng phả hệ di truyền 263 thành viên gồm: 12 bệnh nhân β-Thal 251 người nhà tham gia 12 phả hệ Trong có 141 nữ 122 nam, ngồi phả hệ cịn có thai nhi bị sảy, thai phát triển bị chấm dứt thai kỳ kết chẩn đoán trước sinh thai nhi thể bệnh β-Thal đồng hợp tử βCd41/42 11/12 phả hệ hệ, có phả hệ kinh hệ Số người trung bình phả hệ 22 người Tất bệnh nhân β-Thal (có hai ĐB) người mang gen bệnh (có đột biến) phả hệ di truyền tổ hợp ĐB từ bố mẹ, ông bà thệ thứ I thứ II 100% phả hệ mang đặc điểm di truyền gen lặn NST thường theo quy luật Mendel 3.2 Tỷ lệ mang gen bệnh phả hệ nghiên cứu 3.2.1 Tỷ lệ mang gen bệnh phả hệ nghiên cứu Ở phả hệ tỷ lệ mang gen bệnh ≤50% Tỷ lệ mang gen β khác nhau: thấp 9,4% cao 50% Tỷ lệ mang gen HbE dao động từ 0%-37,5% phả hệ Tỷ lệ mang gen bệnh chung beta HbE 12 phả hệ 34,6% 35,4% thêm 0,8% BN mang gen phối hợp α/β-Thal 3.2.2 Tỷ lệ kiểu đột biến tỷ lệ thể bệnh β-Thal 12 phả hệ Trong 12 phả hệ, có 145 alen mang ĐB kiểu ĐB phát Ngoại trừ ĐB gây bệnh α đoạn –SEA phát gia đình mắc bệnh β-Thal Kinh 04 ĐB gây β gặp (δβ)del gia đình Chăm, kiểu gây bệnh β-Thal lại ĐB phổ biến Việt Nam Trong βHbE chiếm tỷ lệ cao (35,8%), β Cd41/42 (32,4%); βCd17 (17,9%) β-28(6,2%) Về tỷ lệ thể bệnh, có đủ thể bệnh β-Thal 12 phả hệ: đồng hợp tử, dị hợp tử kép, dị hợp tử thể phối hợp HbE/β-Thal Nếu tách HbE thành thể bệnh riêng tính thể dị hợp tử phối hợp α/β-Thal phả hệ Kinh 04, kiểu đột biến tạo nên thể bệnh 12 phả hệ Tần số xuất thể bệnh khác nhau, cao thể dị hợp tử β-Thal 52,2%, thể dị hợp HbE 27%, thể phối hợp HbE/β-Thal 14,8% Thể bệnh đồng hợp HbE, thể dị hợp tử kép, thể phối hợp α/β-Thal chiếm tỷ lệ 1,7% thấp β-Thal thể đồng hợp tử 0,9% Kết luận 12 phả hệ khảo sát khu vực Đồng Sông Cửu Long tuân thủ theo quy luật di truyền Mendel Kết nghiên cứu tạo sở thuận lợi cho việc tính xác suất mắc bệnh mang gen cho hệ cháu Ngoài ra, tỉ lệ mang gen bệnh cao phả hệ cảnh báo gia tăng nguy xuất thể đồng hợp hệ tương lai Đồng thời xuất đột biến gây –SEAvà đột biến δβdel bên cạnh đột biến phổ biến, cho thấy việc cần thiết phải sử dụng nhiều kỹ thuật khác trường hợp chẩn đoán bệnh β-Thal Như vậy, nghiên cứu phả hệ kết hợp với xét nghiệm sinh học phân tử hai công cụ đắc lực giúp bác sĩ tư vấn di truyền chẩn đoán xác định nguy mắc bệnh -Thal 10 gia đình mắc bệnh β-Thal Kinh 04 ĐB gây β0 gặp (δβ)del gia đình Chăm, kiểu gây bệnh β-Thal cịn lại ĐB phổ biến Việt Nam Trong βHbE chiếm tỷ lệ cao (35,8%), β Cd41/42 (32,4%); βCd17 (17,9%) β-28(6,2%) Kết nghiên cứu phả hệ lần chứng minh, khu vực ĐBSCL ĐB phổ biến chiếm đa số, bên cạnh ĐB Tỷ lệ mang gen bệnh cao phả hệ cảnh báo gia tăng nguy xuất thể nặng hệ tương lai Đồng thời xuất đột biến –SEA ĐB (δβ)del bên cạnh ĐB phổ biến, cho thấy việc cần thiết phải sử dụng nhiều kỹ thuật khác trường hợp chẩn đoán trước sinh bệnh β-Thal Như vậy, nghiên cứu phả hệ kết hợp với xét nghiệm sinh học phân tử hai công cụ đắc lực giúp bác sĩ tư vấn di truyền, tính nguy đưa định chẩn đoán bệnh chẩn đoán trước sinh phù hợp 4.3.2.2 Tỷ lệ thể bệnh 12 phả hệ Có đủ thể bệnh β-Thal 12 phả hệ: đồng hợp tử, dị hợp tử kép, dị hợp tử thể phối hợp HbE/β-Thal Nếu tách HbE thành thể bệnh riêng tính thể dị hợp tử phối hợp α/β-Thal phả hệ Kinh 04, kiểu đột biến tạo nên thể bệnh 12 phả hệ (Bảng 3.5) Tần số xuất thể bệnh khác nhau, cao thể dị hợp tử β-Thal 52,2%, thể dị hợp HbE 27%, thể phối hợp HbE/β-Thal 14,8% Thể bệnh đồng hợp HbE, thể dị hợp tử kép, thể phối hợp α/β-Thal chiếm tỷ lệ 1,7% thấp β-Thal thể đồng hợp tử 0,9% So với kết nghiên cứu Phạm Thanh Loan, 2014 bệnh nhân βThal miền bắc: HbE/β-Thal có 19,2%, thể dị hợp tử kép 13,4%, thể đồng hợp chiếm đến 9,6%, 31,7% thể dị hợp tử, lại bệnh nhân chưa xác định kiểu ĐB nên chưa rõ thể bệnh Hay so với quốc gia khu vực tỷ lệ HbE/β-Thal nghiên cứu thấp Trong nghiên cứu Boonchai Boonyawat, 2014 trẻ em Thái Lan có đến 71,2% bệnh nhân thể phối hợp với HbE, dị hợp tử 18,8%, 3,1% thể đồng hợp 6,5% thể dị hợp tử kép 79 Hoặc nghiên cứu khác Malaysia, năm 2013 Syahzuwan Hassan 208 bệnh nhân β-Thal ghi nhận: 81,2% thể dị hợp tử, 7,7% bệnh nhân đồng hợp, 5,3% bệnh nhân dị hợp tử kép, 5,7% thể phối hợp HbE/βThal Kết nghiên cứu khác biệt nhiều, tỷ lệ mang gen bệnh nghiên cứu cao hẳn Điều giải thích thực nghiên cứu phả hệ, bệnh nhân mắc bệnh thalassemia Nhưng nhìn chung, nghiên cứu cho thấy lưu hành với tỷ lệ cao đột biến HbE Đây đột biến phổ biểns chiếm tỷ lệ cao không Việt Nam mà cịn khu vực Đơng Nam Á Với tỷ lệ người dị hợp tử cao bàn luận mục 4.3.1 điều tạo hội dễ dàng gặp đối tượng mang gen tăng tỷ lệ chào đời thể đồng hợp Các trẻ thể nặng sinh ra, gánh nặng gia đình xã hội lớn Như vậy, từ nghiên cứu này, ghi nhận bên cạnh việc theo dõi di truyền bệnh -Thal tìm đối tượng nguy sinh mắc bệnh (người mang gen) phả hệ, vấn đề quan trọng cho người dân, đặc biệt người mang gen hiểu biết cách phòng bệnh hiệu Do vậy, tư vấn di truyền giúp nâng cao hiểu biết bệnh lý cần thiết cơng tác phịng bệnh khơng giới hạn 12 gia đình nghiên cứu mà khu vực ĐBSCL 80 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua trình xác định đột biến tìm thể bệnh nhằm theo dõi di truyền bệnh β-Thal 12 phả hệ, nghiên cứu kết luận: * Xây dựng phả hệ: phả hệ dân tộc Kinh, 03 phả hệ dân tộc Khmer, phả hệ dân tộc Chăm phả hệ dân tộc Hoa xây dựng - Tất bệnh nhân β-Thal (có đột biến) người mang gen bệnh (có đột biến) phả hệ di truyền tổ hợp đột biến từ bố mẹ, ông bà thệ thứ I thứ II - 100% phả hệ mang đặc điểm di truyền gen lặn nhiễm sắc thể thường theo quy luật Mendel * Tỷ lệ mang gen bệnh kiểu đột biến phả hệ - Có 93 (35,4%) người mang gen bệnh β-Thal 12 phả hệ - Có kiểu đột biến xác định: 5/6 kiểu đột biến gây bệnh β-Thal có kiểu đột biến gây bệnh α-Thal đoạn –SEA - kiểu đột biến β-Thal phổ biến: 35,8% βHbE, 32,4% βCd41/42, 17,9% βCd17, 6,2% β-28 2,1% (δβ)del * Các thể bệnh phả hệ Có thể bệnh: β-Thal dị hợp tử (52,2%); HbE dị hợp tử (31%), phối hợp HbE/β-Thal (17%) Các thể dị hợp tử phối hợp α/β-Thal, HbE đồng hợp tử, β-Thal dị hợp tử kép dạng chiếm 1,7% β-Thal đồng hợp tử 0,9% Kiến nghị Từ kết ghi nhận, nghiên cứu xin kiến nghị: Bệnh β-Thal khu vực ĐBSCL di truyền theo quy luật gen lặn nhiễm sắc thể thường cán y tế khai thác phả hệ trình tư vấn di truyền tính nguy mắc bệnh mang gen bệnh cho người nhà bệnh nhân Khai thác tiền sử bệnh gia đình nên thực với chương trình sàng lọc người mang gen bệnh cộng đồng gia đình có người bệnh xét nghiệm đơn giản 81 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng việt 1.Bộ Y tế Việt Nam, 2004 Các số dân số, kinh tế xã hội môi trường Việt Nam, năm 2001- 2002 2.Chu Văn Mẫn, Nguyễn Trần Chiến, Trịnh Đình Đạt, 2009 Di truyền học người Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội 163 trang 3.Dương Bá Trực, 1997 Một số kiểu gen β-thalassemia người miền Bắc Hội nghị chuyên đề tiến Thalassemia 4.Dương Bá Trực, Tạ Thu Hịa, Vũ Thị Thảo, Hồng Thanh Mộc, Nguyễn Cơng Khanh, 2002 Tìm hiểu khả sàng lọc β-thalassemia dị hợp tử Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học Huyết học-Truyền máu 1999-2001 Nhà xuất Y học Hà Nội, 152-158 5.Đào Xuân Lâm Trần Văn Bé, 1995 Tìm hiểu gen thalassemia người bình thường Trung tâm truyền máu Huyết học 6.Lâm Thị Mỹ, 2008 Đặc điểm bệnh Thalassemia thể nặng bệnh viện nhi đồng Báo cáo khoa học Bệnh viện Từ Dũ Thành phố Hồ Chí Minh 7.Lê Thị Hảo, 2001 Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật di truyền phân tử phát đột biến gen gây bệnh β-thalassemia Việt Nam Báo cáo khoa học Trường Đại học Y dược Thành phố Hồ Chí Minh Thành phố Hồ Chí Minh 8.Lý Thị Thanh Hà, Nguyễn Thị Phương Mai, Nguyễn Thị Mai Hương, Ngô Diễm Ngọc, Dương Bá Trực, Nguyễn Thanh Liêm, Nguyễn Thị Tân Sinh, 2015 Áp dụng kỹ thuật ARMS-PCR chẩn đoán trước sau sinh bệnh β-thalassemia bệnh viện nhi trung ương Thông tin khoa học Khoa di truyền sinh học phân tử Bệnh viện nhi Trung Ương 9.Mã Phương Hạnh, 2008 Đặc điểm bệnh nhân thalassemia thể nặng có ứ sắt bệnh viện nhi đồng I từ tháng 12/2007 - 05/2008 Luận văn thạc sĩ y học Trường Đại Học Y dược Thành phố Hồ Chí Minh.Thành phố Hồ Chí Minh 10 Nguyễn Cơng Khanh, 1985 Một số đặc điểm lâm sàng huyết học bệnh β-thalassemia người Việt Nam Đề tài Phó tiến sỹ khoa học Y dược Trường Đại học Y Hà Nội Hà Nội 11 Nguyễn Công Khanh, 1993 Tần số bệnh Hemoglobin Việt Nam Y học Việt Nam, chuyên đề bệnh Thalassemia, tr.11-16 82 12 Nguyễn Công Khanh, Dương Bá Trực, Đinh Phương Hòa, Tạ Thu Hòa, Trần Hồng Hà, 1993 Bệnh β-thalassemia/Hemoglobin E Y học Việt Nam, 174: 35 13 Nguyễn Cơng Khanh, 1995 β-thalassemia Tạp chí Y học thực hành, tr.2 14 Nguyễn Khắc Hân Hoan, Qch Thị Hồng Oanh, Phạm Việt Thanh Trương Đình Kiệt, 2008 Chẩn đoán di truyền phân tử bệnh βthalassemia Bệnh viện Từ Dũ Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 12(1): 341-347 15 Nguyễn Khắc Hân Hoan, Phạm Việt thanh, Trương Đình Kiệt, Lâm Thị Mỹ, 2010 Chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia 290 trường hợp thai Tạp chí nghiên cứu y học, 3: 1-7 16 Nguyễn Khắc Hân Hoan, 2013 Nghiên cứu tầm soát chẩn đoán trước sinh bệnh α β-thalassemia Đề tài tiếnsĩ Trường đại học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh.Thành Phố Hồ Chí Minh 17 Nguyễn Thị Hồng Nga, 2011 Sử dụng cơng thức Shine Lal tầm sốt thalassemia thể ẩn Luận văn chuyên khoa II Trường Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Thành phố Hồ Chí Minh 18 Nguyễn Thị Ngọc Phượng, Phạm Việt Thanh, Tăng Chí Thượng, Nguyễn Khắc Hân Hoan, Đỗ Thị Thanh Thủy, Phùng Như Toàn, 2009 Nghiên cứu phát sớm trường hợp nguy cao bị bệnh di truyền trẻ trước sinh sơ sinh để thực can thiệp kịp thời nhằm làm giảm tỷ lệ tử vong tàn tật trẻ em Đề tài khoa học công nghệ trọng điểm cấp nhà nước, mã số KC10.07/06-10 Đại học Y Dược TPHCM Thành phố Hồ Chí Minh 19 Phạm Ngọc Dũng Huỳnh Nghĩa, 2011 Ứng dụng số hồng cầu cơng thức tầm sốt bệnh lý huyết sắc tố thể ẩn bệnh viện An Giang Y học thành phố Hồ Chí Minh, 15(4): 553-560 20 Phạm Thanh Loan, 2014 Phát đột biến gen gây bệnh βthalassemia kỹ thuật Multiplex ARMS-PCR Đề tài tốt nghiệp thạc sĩ Trường Đại Học Y Hà Nội Hà Nội 21 Phạm Thị Ngọc Nga, 2011 Ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử vào tầm soát bệnh β thalassemia cộng đồng dân tộc Khmer, tỉnh Bạc 83 Liêu Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ Trường Đại Học Cần Thơ Thành phố Cần Thơ 22 Phạm Thị Phượng, 2013 Nghiên cứu đặc điểm bệnh thalassemia, đánh giá kết điều trị truyền máu thải sắt bệnh viện Nguyễn Đình Chiểu Bến Tre Đề tài chuyên khoa II Trường Đại học Y Dược Cần Thơ Thành phố Cần Thơ 23 Quách Thị Hoàng Oanh, 2009 Ứng dụng kỹ thuật giải trình tự DNA phát đột biến gen beta thalassemia Luận văn thạc sĩ y học, Trường Đại Học Y dược Thành phố Hồ Chí Minh, Thành phố Hồ Chí Minh 24 Trần Hồi Đảo, 2012 Nghiên cứu tình hình bệnh thalassemia đánh giá bước đầu kết tư vấn di truyền người dân tộc Khmer tỉnh Bạc Liêu năm 2011 Đề tài tốt nghiệp chuyên khoa II Trường Đại học Y Dược Cần Thơ Thành phố Cần Thơ 25 Trần Minh Hiếu, Trần Văn Bé, Trần Văn Bình, Saovaros, Rungrat Sriphanich, Sunthat Fucharoen Cơ chế phân tử bệnh βthalassemia miền nam Việt Nam Hội thảo lần thứ huyết học truyền máu 26 Trần Thị Thúy Minh, 2015 Tỷ lệ mắc kiểu hình gen bệnh alpha beta thalassemia trẻ em dân tộc Ê đê M’Nông tỉnh Đắk Lắk Đề tài tiến sĩ y khoa Trường đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh 27 Trịnh Văn Bảo, Phan Thị Hoan, Trần Thị Thanh Hương, Hoàng Ngọc Lan, Trần Thị Liên, Trần Đức Phấn, 2005 Di truyền Y học, Nhà xuất Hà Nội Thành phố Hà Nội 28 Trương Đình Kiệt, Lê Thị Hảo, Phạm Hùng Vân, Trần Văn Bé, Phùng Thị Dung, Lâm Thị Mỹ, 2003 Xác lập kỹ thuật ARMS phát kiểu đột biến gene β-globin gây bệnh β-thalassemia Việt Nam Sở Khoa học Cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh Thành phố Hồ Chí Minh 84 Tiếng anh 29 Angastiniotis, M.A and Hadjiminas, M.G., 1981 Prevention of thalassaemia in Cyprus Lancet, 1: 369-371 30 Angastiniotis, M., Eleftheriou, A., Galanello, R., and Old, J., 2013 Prevention of thalassaemias and other haemoglobin disorders thalassaemia international federation Thalassaemia International Federation, 1: 1-15 31 Antonio Cao and Yuet Wai Kan, 2013 The Prevention of Thalassemia Cold Spring Harb Perspect Med 32 Bachir, D., Galacteros, F., 2014 Hemoglobin E disease.Orphanet Encyclopedia, 13 33 Bhardwaj, U., Zhang, Y.H., Lorey, F., McCabe, L.L., and Edward, R.B., 2005 Molecular gentic confirmatory testing from newborn screening samples for the common African-American, Asian Indian, Southeast Asian, and Chinese β-thalassemia mutations American Journal of Hematology, 78: 249-255 34 Cai, S.P and Kan, Y.W., 1990 Identification of the multiple β-thalassemia mutations by denaturing gradient gel electrophoresis J Clin Invest, 85: 550-553 35 Cai, S.P and Chehab,F.F., 1996 New frameshiftmutation, insertion of A, at codon 95 of the β-globin gene causes β-thalassemia in two Vietnamese families Human Mutatation, 8(3): 293-294 36 Cao, A., Rosatelli, M.C., and Galanello, R., 1996 Control of β-thalassaemia by carrier screening, genetic counselling and prenatal diagnosis: The Sardinian experience Ciba Found Symp, 197: 135-151 37 Cao, A., Saba,L., Galanello, R., and Rosatelli, M C., 1997 Molecular diagnosis and carrier screening for β thalassemia Jama, 278 (15): 1273-1277 38 Cao, A., Galanello, R., and Rosatelli, M.C., 1998 Prenatal diagnosis and screening of the haemoglobinopathies Baillieres Clin Haematol, 11: 215-238 39 Cao, A., 2002 Carrier screening and genetic counselling in βthalassemia.Int J Hematol.76 (2): 105-13 40 Cao, A and Kan, Y.W., 2013 The Prevention of Thalassemia Cold Spring Harb Perspect Medicine 85 41 Chan, V., Yam, I., Chen, F.E., and Chan, T.K., 1999 A reversedot-blot method for rapid detection of non-deletion α-thalassaemia British Journal of Haematology, 104(3): 513-515 42 De Siva, S., Fisher,C.A., Premawardhena,A., Lamabadusuriya,S.P., Peto,T.E.A., and Gayathri, N.J., 2000 Thalassemia in Sri Lanka: implications for future health burden of Asian populations The Lancet, 355: 786-791 43 Eleftheriou, A., 2003 About thalassaemia Ukts.org 44 Elisabeth Kohne and Enno Kleihauer, 2010 Hemoglobinopathies: A Longitudinal Study Over Four Decades Dtsch Arztebl Int, 107(5): 65–71 45 Fettah, A., Bayram, C., Yarali, N., Isik, P., Kara, A., Culha, V., and Tunc, B, 2013 β-globin gene mutations in Turkish children with βthalassemia: Results from a Single Center Study Meditter J Hematol Infect, 5(1) 46 Filon, D., Oppenheim, A., Rachmilewitz, E.A., Kot, R., and Truc, D.B., 2000 Molecular analysis of β-thalassemia in Viet Nam Hemoglobin, 25(3): 305-309 47 Flavell, R.A., Kooter, J.M., and De Boer, E., 1978 Analysis of the β-δ-globin gene loci in normal and Hb Lepore DNA: direct determination of gene linkage and intergene distance Cell,15: 25-41 48 Fucharoen, S and Winichagoon, P., 1992 Thalassemia in SouthEast Asia: problems and strategy for prevention and control Southeast Asian J Trop Med Public Health 23(4): 647-55 49 Fucharoen, S., 1997 Proposal for ASEAN Registration Draft version 1.2 Asean thalassemia Society Thalassemia Research centre 50 Galanello, R., Sanna, S., Perseu, L., Sollaino, M.C., Satta, S., Lai, M.E., Barella, S., Uda, M., Usala, G., and Abecasis, G.R., 2009 Amelioration of Sardinian β0-thalassemia modifiers Blood, 114: 3935-3937 51 Gelehrter, T.D., Collins,F.S., and by Ginsburg,D., genetic 2000 Principles of Medical Genetics Lippincott Williams & Wilkins , 154:3750 52 Hao, L.T., Pissard, S., Van, P.H., Lacombe, C., Hanh, T.D., and Goossens, M., 2001 Molecular analysisof β-thalassemia in South 86 Vietnam Hemoglobin, 25(3): 305-309 53 Harper, P., 2010 Practical genetic counselling 7th edition editors ISBN-13: 978-0340990698; ISBN-10: 0340990694 54 Higgs, D.R., Engel, J.D., and Stamatoyannopoulos, G., 2011 Thalassemia Lancet, 379: 373-383 55 Huang G1, Jiang WL, Rong KB, Li YX, Luo XL, Meng JX, Yu XY (2010) Molecular characterization of a Chinese pedigree with beta-thalassemia intermedia Hemoglobin 34(2):179-83 56 Hussey, N.D., Davis, T., Hall, J.R., Barry, M F., Draper, R., and Norman, R.J., 2002 Preimplantation genetic diagnosis for βthalassaemia using sequencing of single cell PCR products to detect mutations and polymorphic loci Molecular Human Reproduction, 8(12): 1136-43 57 Jiao, Z.X., Zhuang, G.L., Zhou, C.Q., Shu, Y.M., Li, J., Liang, X.Y., Zhang, M.F., and Deng, M.F., 2003 Successful preimplantation genetic diagnosis for β-thalassemia using primer extension preamplification Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi, 38: 143-146 58 Kohne, E., 2011 Hemoglobinopathies: clinical manifestations, diagnosis, and treatment Dtsch Arztebl Int, 108: 31-32 59 Kokkali, G., Traeger-Synodinos, J., Vrettou, C., Stavrou, D., Jones, G.M., Cram, D.S., Makrakis, E., Trounson, A.O., Kanavakis, E., and Pantos, K., 2007 Blastocyst biopsy versus cleavage stage biopsy and blastocyst transfer for preimplantation genetic diagnosis of β- thalassaemia: A pilot study Hum Reprod, 22: 1443-1449 60 Laosombat, V., Fucharoen, S.P., Panich, V., Fucharoen, G., Wongchanchailert, M., Sriroongrueng, W., Nopparatana, C., Kenpitak, K., Maipang, M., and Fukumaki, Y., 1992 Molecular basis of β -thalassemia in the south of Thailand Am J Hematol, 41(3): 94-198 61 Laosombat, V., Wongchanchailert, M., Sattayasevana, B., Wiriyasateinkul, A., and Fucharoen, S., 2001 Clinical and hematological features of codon 17, A-T mutation of β-thalassemia in Thai patients Haematological, 67(2): 100-104 62 Laosombat, V., Wongchanchailert, M., Sattayasevana, B., Wiriyasateinkul, A., and Fucharoen, S., 2001 Clinical and hematologic 87 features of β0-thalassemia (frameshift 41/42 mutation) in Thai patients Haematological, 86(2): 138-41 63 Lahr, G., Joaquin Brintrup, Stefan Over, Gerhard E Feurle, Klaus-Michel Debatin, Elisabeth Kohne, 2007 Codon 104(-G), A Dominant Β0-Thalassemia-Like Phenotype In A German Caucasian Family Is Associated With Mild Chronic Hemolytic Anemia But Influenced In Severity By Co-Inherited Genetic Factors Haematological, 92: 1264-1265 64 Li, D.Z., 2009 Premarital screening for thalassemia in mainland China Prenat Diagn, 29: 637-638 65 Loukopoulos, D and Kollia, P., 2001 Worldwide distribution of β-thalassemia Disorders of hemoglobin: genetics, pathophysiology and clinical management.Cambridge University Press, 94(11): 602–603 66 Maria-Domenica Cappellini, Alan Cohen, Androulla Eleftheriou, Antonio Piga, John Porter, and Ali Taher, 2008 Guidelines for the Clinical Management of Thalassaemia, 2nd Revised edition Nicosia (CY): Thalassaemia International Federation; ISBN-13: 978-9963-623-709 67 Nakamura, T., Takihara, Y., Ohta, Y., Fujita, S., Takagi, Y., and Fukumaki, Y., 1987 A δ-globin gene derived from patients with homozygous δ0-thalassemia functions normally on transient expression in heterologous cells Blood, 70(3): 809-13 68 Newton, C.R., Graham, A., Heptinstall, L.E., Powell, S.J., Summers, C., Kalsheker, N., Smith, J.C., and Markham, A.F., 1989 Analysis of any point mutation in DNA The amplification refractory mutation system (ARMS) Nucleic Acids Res, 17: 2503-2516 69 Old, J.M., 1996 Method in Molecular Medicine Molecular Diagnosis of Genetics Diseases, 169-183 70 Old, J., Eleftheriou, A., Angastiniotis, M., Galanello, R., Petrou, M., and Traeger-Synodinos, J., 2012 Prevention of thallassaemias and other Haemoglobin disoders, 2nd edition 71 Park, S.S and Cho, H.I., 2002 β-thalassemia in the Korean population Int J Hematol, 76 (2): 93-95 88 72 Peng, C.T., Liu, S.C., Peng, Y.C., Lin, T.H., Wang, S.J., Le, C.Y., Shih, M.C., Tien, N., Lu, J.J., and Lin, C.Y., 2013 Distribution of thalassemias and associated hemoglobinopathies identified by prenatal diagnosis in Taiwan Blood Cells Mol Dis, 51(3): 138-141 73 Run, D., Filon, D., Strauss, N., Rachmilewitz, E.A., and Oppenheim, A., 1992 Mean corpuscular volume of Heterozygotes for β-thalassemia correlates with the severity of mutation Blood, 79(1): 238243 74 D.J., 2009 Steinberg, M.H., Forget, B.G., Higgs, D.R., and Weatherall, Disorders of Hemoglobin: genetics, pathophysiology, and clinical management.Cambridge University Press2nd edition, 94(11): 602– 603 75 Srisupundit K1, Wanapirak C, Sirichotiyakul S, Tongprasert F, Leuwan S, Traisrisilp K, Tongsong T, 2013 Hemoglobin levels and red blood cell indices in mid-gestational fetuses with beta-thalassemia/HbE, beta-thalassemia trait or Hb E trait and normal fetuses, US National Library of MedicineNational Institutes of Health Prenat Diagn 33(13):1238-41 76 Svasti, M.L.S., Hieu, T.M., Munkongdee, T., Winichagoon,P., and Binh T.V., 2002 Molecular analysis of β-thalassemia in South Vietnam American Journal of Hematology, 25(3): 305-9 77 Thais Fornari, A.S.H.,Fornari, T.A., Ferreira, R., Lanaro, C.,Donate, P.B.,Passos, G., Saad, S.T.O., Costa, F.F., and Conran, N., 2013 HPFH and δ-β-thalassemia have different profiles of micrornas and transcription factors Blood, 122: 186 78 Thein, S.L., 2004 Genetic in sights into the clinical diversity of β-thalassaemia British Journal of Haematolog, 124(3): 264-74 79 Thein, S., 2005 Genetic modifiers of β-thalassemia Haematologica, 90(5): 649-60 80 Thein, S.L., 2008 Genetic modifiers of the β- haemoglobinopathies Br J Haematol, 141: 357-366 81 Waye, J.S., Patterson, M., Walker, L., Eng, B., Nakamura, L.M., Lafferty, J.D., Yong, S.L., Wu, J.K., and Chui, D.H., 2003 βthalassemia in association with a new δ-chain hemoglobin variant 89 [δ116(g18)Arg→Leu]: Implications for carrier screening and prenatal diagnosis Am J Hematol, 74: 179-181 82 Weatherall, D.J., Stamatoyannopoulos, G., Majerus,P.W., Perlmutter, R M., and Varmus, H., 2001 The thalassemia Themolecular basis of blood diseases, 3: 183-226 83 Weathrall, D.J and Clegg, J.B., 2001 Inherited haemoglobin disorders: an increasing global health probem Bulletine of the World Health Organization, 79: 704-712 84 WHO, 1994 Guidelines for control of haemoglobin disorders In WHO/HDP/HB/GL/941 WHO, Geneva 85 Winichagoon, P., Fucharoen, S., Wilairat, P., Chihara, K., Fukumaki, Y., Wasi, P., 1992 Identification of five rare mutations including a novel frameshift mutation causing β0-thalassemia in Thai patients with β0-thalassemia/hemoglobin E disease Biochim Biophys Acta,1139(4): 280-286 86 Winichagoon, P., Fucharoen, S., Chen, P., and Wasi, P., 2000 Genetic factors affecting clinical severity in β-thalassemia syndromes J Pediatr Hematol Oncol 22(6): 573-80 87 Wochenschr, S.M., 1983 The genetics of thalassemia NCBI resources, 113(40) 88 Zahra Kiani Moghaddam, Narges Bayat, Atefeh Valaei, Alireza Kordafshari, Behnaz Zarbakhsh, Sirous Zeinali, Morteza Karimipoor (2012) The co-inheritance of α/β thalassemia: challenges in prenatal diagnosis of thalassemia Iranian Journal of Blood & Cancer 4(2): 81-84 90 ... tìm thấy nghiên cứu di truyền bệnh β-Thal gia đình có bệnh nhân mắc bệnh Đây lý đề tài ? ?Nghiên cứu di truyền bệnh Beta- Thalassemia số gia đình bệnh nhân khu vực Đồng Sông Cửu Long? ?? thực nhằm... tìm thấy nghiên cứu di truyền bệnh β-Thal gia đình có bệnh nhân mắc bệnh Đây lý đề tài ? ?Nghiên cứu di truyền bệnh Beta- Thalassemia số gia đình bệnh nhân khu vực Đồng Sơng Cửu Long? ?? thực nhằm... sống Đồng Sơng Cửu Long: 07 gia đình bệnh nhân dân tộc Kinh, gia đình bệnh nhân dân tộc Khmer, gia đình bệnh nhân dân tộc Hoa gia đình bệnh nhân dân tộc Chăm - Các bước nghiên cứu: + 12 bệnh nhân