Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp trên bò

LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận này tôi xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Cô giáo Nguyễn Thị Thùy, đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực tập và viết khóa luận tốt nghiệp của mình Cho phép tôi bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến quý Thầy, Cô trong khoa Chăn Nuôi – Thú Y, Trường Đại Học Nông Lâm Huế đã tận tình truyền đạt kiến thức trong 5 năm học tập, đó không chỉ là nền tảng trong quá trình nghiên cứu làm khóa luận mà còn là hành trang quý báu để tôi bước vào đời một cách.

LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tơi xin tỏ lòng bi ết ơn sâu s ắc đ ến Cơ giáo Nguyễn Thị Thùy, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt q trình thực tập viết khóa luận tốt nghiệp Cho phép tơi bày tỏ lịng biết ơn chân thành đến q Th ầy, Cô khoa Chăn Nuôi – Thú Y, Trường Đại Học Nơng Lâm Huế tận tình truy ền đạt kiến thức năm học tập, khơng tảng q trình nghiên cứu làm khóa luận mà cịn hành trang q báu đ ể b ước vào đời cách vững tự tin Và nhân xin gửi lời cảm ơn đến nh ững anh ch ị h ọc thú y khóa 45, bạn, em học thú y khóa 47 h ổ tr ợ tơi q trình làm khóa luận Trong q trình làm khóa luận khơng th ể tránh kh ỏi nh ững thiếu sót thân thiếu kinh nghiệm, khả thực nghiên c ứu khoa học cịn hạn chế Vì mong nhận góp ý đánh giá quý Th ầy, Cô để khóa luận hồn thiện DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt AIDS Acquired Immune Deficiency Syndrome Hội chứng suy giảm miễn dịch CDC Centers for Disease Control and Prevention Trung tâm phòng ngừa kiếm soát dịch bệnh Hoa Kỳ Cs Partner Cộng DNA Deoxyribonucleic acid Vật chất di truyền HIV Human Immunodeficiency Virus Virus gây suy giảm miễn dịch HTX Hợp tác xã KHH Kế hoạch hóa PCR Polymerase Chain Reaction Phản ứng khuếch đại gen PCR - RFLT PCR- Restriction Fragment Length Polymorphism PCR kết hợp với kỹ thuật đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn rRNA Ribosome RNA SPP Species pluriel Nhiều loài MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài Cryptosporidium spp ký sinh trùng đơn bào, ký sinh ruột non gây tiêu chảy cho người nhiều loài động vật Người gia súc bị nhiễm bệnh nuốt phải trứng trưởng thành người gia súc bệnh thải phân môi trường, nhiễm vào thức ăn, nước uống, nước tắm [2], [12], [27], [47], [51] Một điểm đáng ý Cryptosporidium spp noãn nang (Oocyst) mầm bệnh có sức đề kháng cao, tồn lâu mơi trường sống sót nước khử Clo nồng độ tối đa (có nghĩa nước máy chứa mầm bệnh) [16] Vì vậy, bệnh lây qua đường nước quan trọng, có tỷ lệ nhiễm cao xuất khắp giới đặc biệt nghiêm trọng nước phát triển [6] Với xu phát triển kinh tế - xã hội hội nhập v ới khu v ực qu ốc tế, nước ta có nhiều sách khuyến khích nơng nghiệp phát tri ển Chính ngành chăn nuôi, đặc biệt chăn nuôi trâu , bò quan tâm đẩy mạnh số tỉnh miền trung nước ta, có Th ừa Thiên Huế Xã Quảng Lợi thuộc huy ện Quảng Đi ền, t ỉnh Th ừa Thiên Hu ế hi ện phát triển chăn ni bị có hệ thống sơng ngịi dày đ ặc , đặc biệt phá Tam Giang Bên cạnh đó, tập quán sử dụng n ước sông, ao hồ làm nước cho gia súc u ống, t ắm, tạo điều kiện lý tưởng để mầm bệnh dễ dàng phát tán Ngồi với tập qn chăn ni bị bán chăn th ả, nhỏ lẻ, q trình chăm sóc nguồn cung cấp dinh d ưỡng ch ưa đ ược quan tâm m ức làm gi ảm s ức đ ề kháng v ật Đây ều ki ện để bùng phát thành d ịch Hiện nay, chưa có nghiên cứu cụ thể Cryptosporidium spp Quảng Lợi gia súc bị tiêu chảy người ta nghĩ đ ến nguyên nhân ký sinh trùng, xuất phát từ thực tế chúng tơi tiến hành thực nghiên cứu “Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp bò nuôi xã Quảng Lợi, huyện Quảng Điền, tỉnh Thừa Thiên Huế” với mong muốn điều tra tình hình dịch bệnh, góp phần giảm thiểu tình hình nâng cao sức khỏe người 1.2 Mục đích đề tài Nghiên cứu tình hình nhiễm Cryptosporidium spp bị xã Quảng Lợi, huyện Quảng Điền, tỉnh Thừa Thiên Huế Làm tiền đề tiếp cho nghiên cứu Cryptosporidium spp địa bàn So sánh tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm Cryptosporidium spp theo độ tuổi, tính biệt tình trạng phân Qua kết thu tỷ lệ nhiễm c ường độ nhi ễm, ti ến hành thực thí nghiệm hiệu điều trị hai liệu trình, sau rút phác đồ điều trị hiệu Từ đưa lời khuyên ph ương pháp phòng bệnh tẩy trừ thích hợp cho người dân 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học Cung cấp sở khoa học, thông tin liệu tỷ lệ nhiễm, c ường độ nhiễm Cryptosporidium spp bị, bê tồn xã Tỷ lệ nhiễm, cường độ nhiễm Cryptosporidium spp theo nhóm tuổi, tính biệt, tình trạng phân xã Quảng Lợi, huyện Quảng Điền, tỉnh Thừa Thiên Huế để người dân, sinh viên cán thú y tham khảo 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn Điều tra tình hình dịch bệnh đ ịa ph ương, d ựa ch ỉ tiêu theo dõi để đưa khuyến cáo cho người chăn ni m ột số v ấn đề phịng bệnh cho người vật nuôi PH ẦN T ỔNG QUAN CÁC V ẤN Đ Ề NGHIÊN C ỨU 2.1 Đặc điểm vùng nghiên cứu Hình 2.1 Bản đồ hành huyện Quảng Điền [64] 2.1.1 Vị trí địa lý Xã Quảng Lợi nằm phía Đơng Bắc c huy ện Qu ảng ền vùng đồng thấp ven đầm phá Tam Giang, thuộc h lưu sơng Ơ Lâu Ranh giới hành xác đ ịnh nh sau: Phía Bắc giáp Phá Tam Giang Phía Nam giáp xã Qu ảng Vinh Phía Tây giáp xã Qu ảng Thái Phía Đơng giáp Th ị tr ấn S ịa 2.1.2 Tài nguyên thiên nhiên 2.1.2.1 Đất đai Xã Quảng Lợi có diện tích đ ất t ự nhiên 3.288,25 G ồm loại đất sau: Đất nơng nghiệp, đất phi nông nghiệp, đất khu dân c nông thôn, đất chưa sử dụng 2.1.2.2 Nước Tài nguyên nước xã Quảng L ợi bao gồm ngu ồn n ước chính: Nguồn nước mặt nguồn nước ngầm Nguồn nước mặt Chủ yếu từ sơng Ơ Lâu, mùa hè thường bị mặn ảnh hưởng vùng ven phá Tam Giang, có hồ chứa nước hồ Đồng Bào, Thủy Lập cung cấp nước tưới cho sản xuất, n ước sinh hoạt cho nhân dân vùng Quảng Lợi có gần 09 km chiều dài bãi ngang với hệ thống đầm phá rộng Phá Tam Giang nằm hệ đầm phá Tam Giang - C ầu Hai, Phá có dạng địa hình thủy vực sơng dịng chảy hẹp kéo dài với nhiều lồi sinh vật thủy sinh Phía tây chịu ảnh hưởng sơng Ô lâu, phía nam ch ịu ảnh hưởng nhánh sông sông Bồ đổ về, vùng phá thông v ới bi ển qua cửa biển Thuận An Nguồn nước ngầm Theo kết thăm dò địa chất thủy văn cho thấy tầng nước ngầm xã tương đối phong phú, có quanh năm phân bố diện r ộng nguồn nước cung cấp cho nhu cầu ăn uống, sinh hoạt ch ủ yếu người dân, mực nước sâu từ - m Do ảnh hưởng từ nguồn thải khu dân c ư, t chăn ni chất hóa học sử dụng nông nghiệp làm cho chất lượng n ước số vùng xã bị ô nhiễm, ảnh hưởng không tốt đến sức khỏe người dân vùng Hiện nguồn nước ngầm ch ủ yếu đ ể phục v ụ cho sản xuất nhỏ sinh hoạt khác 2.1.3 Điều kiện thời tiết, khí hậu Nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, đ ược chia làm mùa rõ r ệt Về mùa khơ chịu ảnh hưởng gió Tây Nam nên khơ nóng, v ề mùa mưa ảnh hưởng gió Đơng Bắc nên mưa nhiều tr ời lạnh 2.1.3.1 Mùa Khô Từ tháng đến tháng 8, nhiệt độ trung bình từ 28 - 29 0C Các tháng khô hạn 5, 6, Mùa thường nắng nóng hạn hán có gió Tây Nam (gió Lào) Số nắng trung bình năm 1.893,6 Tháng có nắng cao tháng (258,3 giờ) tháng (248,8 gi ờ) Tháng có nắng năm tháng (77,5 giờ) tháng (75 giờ) 2.1.3.2 Mùa mưa Từ tháng đến tháng năm sau, nhiệt đ ộ trung bình 20 - 210C Mùa thường có lượng mưa lớn, tập trung nên dễ ngập lụt kèm theo gió bão, chiếm 78% lượng mưa năm Hai tháng có lượng m ưa l ớn tháng 10 tháng 11, với lượng mưa trung bình 580 - 796 mm/tháng 2.1.4 Tình hình sản xuất nông nghiệp 2.1.4.1 Trồng trọt Giá trị sản xuất ngành trồng trọt 60 tỷ 682 triệu đồng, tăng 18 tỷ so với năm 2013, giá trị sản lượng lúa đạt 23 tỷ 352 tri ệu đồng, chiếm tỷ trọng 38,5% giá trị sản xuất ngành nông nghiệp Tổng diện tích gieo trồng năm 1232 ha, đạt 100,24% kế hoạch, tăng 20 so với năm 2013 (chủ yếu diện tích vụ hè thu); diện tích lương thực có hạt (lúa) 861,6 ha, giảm 2,4 ha; chất bột có c ủ (khoai, sắn) 134 ha, giảm ha; lạc 66,5 ha, giảm 11,5 ha; ớt đậu, mè 65,5 ha, 10 Cryptosporidium spp theo tính biệt hay khơng Kết nghiên cứu trình bày theo bảng 4.3 Bảng 4.3 Tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm Cryptosporidium spp bị theo tính biệt Tính biệt Tỷ lệ nhiễm Cường độ nhiễm N n+ % ++ % +++ % Cái 79 24 30,37 4,16 23 95,83 Đực 36 14 38,88 7,14 13 92,85 Chú thích: N: Số mẫu kiểm tra n+: Số mẫu dương tính với Cryptosporidium spp %: Tỷ lệ mẫu dương tính Qua bảng 4.3 ta thấy, tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp bò đực bò 38,88% 30,37% Sở dĩ có sai khác bò đ ực xã Quảng Lợi chủ yếu có độ tuổi 18 tháng tuổi (số mẫu bò đực 18 tháng tuổi chiếm 86,11% tổng số mẫu bò đực lấy, bò 18 tháng tuổi 41,77% tổng số mẫu bò lấy) l ứa tuổi mà khả miễn dịch, khả chống lại thay đổi ch ưa tốt, s ự thành thục giới tính chưa hồn thiện Tuy nhiên sai khác tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp theo tính biệt (đực, cái) khơng có ý nghĩa mặt thống kê (P>0,05) Như vậy, nói khả gây nhiễm Cryptosporidium spp bị khơng bị ảnh hưởng yếu tố tính biệt (đực, cái) 4.3 Tỷ lệ cường độ nhiễm Cryptosporidium spp bị theo nhóm tuổi Để tìm hiểu ảnh hưởng Cryptosporidium spp đến bò theo giai đoạn phát triển, thu thập mẫu nhóm tuổi khác để tiến hành xét nghiệm Kết thu nghiên cứu tình hình nhiễm Cryptosporidium spp bò theo tháng tuổi chúng tơi trình bày bảng 4.4 44 Bảng 4.4 Tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm Cryptosporidium spp bò theo nhóm tuổi Tuổi (tháng) Tỷ lệ nhiễm N n+ % ++ % +++ % ≤ tháng 28 12 42,85 8,33 11 91,67 > 6-18 tháng 36 11 30,55 0,00 11 100 > 18 tháng 15 29,41 6,67 14 93,33 51 Cường độ nhiễm Chú thích: N: Số mẫu kiểm tra n+: Số mẫu dương tính với Cryptosporidium spp %: Tỷ lệ mẫu dương tính Từ kết bảng 4.4 ta thấy bò, bê nhiễm Cryptosporidium spp tất lứa tuổi cường độ nhiễm đ ều m ức cao T ỷ l ệ nhi ễm Cryptosporidium spp nhóm tuổi 6, - 18 18 tháng tu ổi l ần lượ t 42,85%, 30,55% 29,41%, l ứa tu ổi nhi ễm Cryptosporidium spp cao l ứa tuổi d ưới tháng (42,85%), l ứa tu ổi nhi ễm Cryptosporidium spp thấp lứa tuổi 18 tháng (29,41%) S dĩ Có chênh lệch nh theo bê d ưới tháng tu ổi kh ả miễn dịch cịn th ấp, c tiêu hóa cịn y ếu, ều ki ện s ống c thể hồn tồn thay đ ổi, s ự thích ứng c c th ể tr ước s ự thay đ ổi c mơi trường cịn chậm, c ộng v ới ều ki ện chăn nuôi l ạc h ậu th ường xuyên tiếp xúc với mầm bệnh H ơn n ữa l ứa tu ổi theo m ẹ nên nhiễm mần bệnh Cryptosporidium spp từ bò mẹ mà bê sơ sinh bê lớn có độ m ẫn cảm v ới Cryptosporidium spp cao so với động vật trưởng thành, nên t ỷ lệ nhi ễm c bò d ưới tháng tu ổi cao Sự khác biệt tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp nhóm tuổi khơng có ý nghĩa v ề m ặt th ống kê (P > 0,05) Kết nghiên cứu tương đối giống với kết nghiên cứu Nguyễn Thị Sâm cs (2007) Theo Nguyễn Thị Sâm cộng (2007) tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp cao nhóm tuổi tháng (51,2%) [8] 45 4.4 Tỷ lệ cường độ nhiễm Cryptosporidium spp bị theo tình trạng phân Trong nghiên cứu này, chúng tơi tiến hành nhóm bị đ ược phân theo tình trạng phân phân tiêu chảy phân không bị tiêu chảy để ki ểm tra xem liệu có mối quan hệ tình hình nhiễm Cryptosporidium spp với triệu chứng tiêu chảy bò bê không Kết nghiên cứu đ ược th ể bảng 4.5 Bảng 4.5 Tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm Cryptosporidium spp bò theo triệu chứng lâm sàng Triệu chứng lâm sang Tỷ lệ nhiễm Cường độ nhiễm N n+ % ++ % +++ % Không tiêu chảy 71 18 25,35 11,11 16 88,89 Tiêu Chảy 44 20 45,45 0,00 20 100 Chú thích: N: Số mẫu kiểm tra n+: Số mẫu dương tính với Cryptosporidium spp %: Tỷ lệ mẫu dương tính Qua bảng 4.5 ta th r ằng Cryptosporidium spp có mặt 45,45% m ẫu phân bị b ị tiêu ch ảy bị khơng b ị tiêu ch ảy 25,5% Điều cho th vai trò quan tr ọng c Cryptosporidium spp hội chứng tiêu ch ảy bò Cường độ nhiễm nặng (+++) khơng có sai khác nhiều bị bị tiêu chảy (100%) bị khơng bị tiêu chảy (88,89%) Sỡ dĩ nh v ậy theo phương pháp xác định cường độ nhiễm Cryptosporidium spp phân buồng đếm Mc Master đếm số nỗn nang Cryptosporidium spp mà khơng phân biệt loại Cryptosporidium spp mà vai trị gây tiêu chảy bò Cryptosporidium parvum Sự sai khác tỷ lệ nhiễm tình trạng phân có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Theo Nguyễn Thị Sâm cs (2007), nguy c bị tiêu chảy bò nhiễm Cryptosporidium spp tỉnh Nam Trung Bộ Tây Nguyên Việt Nam 1,6 lần so với bị khơng bị nhiễm Cryptosporidium spp 46 [8] Theo tổ chức giám sát sức khỏe động vật Mỹ năm 1994 (National Animal Health Monitoring System) nguy tiêu ch ảy bê nhiễm C parvum gấp 1,6 lần so với bê không bị nhiễm C parvum [51] 4.5 Kết kiểm tra hiệu lực thuốc điều trị bệnh c ầu trùng thuộc họ Cryptosporidium spp gây Từ kết xét nghiệm mẫu phân, xác định nh ững bò, bê nhiễm Cryptosporidium spp., chúng tơi tiến hành thí nghiệm điều trị Cryptosporidium spp cho bò, bê bị nhiễm Cryptosporidium spp cường độ nặng trạng gầy yếu với phác đồ là: sulfamethoxazole toltrazuril Hiệu lực điều trị Cryptosporidium spp liệu trình trình bày bảng 4.6 Bảng 4.6 Hiệu lực loại thuốc điều trị Cryptosporidium spp Li ệu trình Hiệu lực thuốc (1g/50kg TT) (150mg/10kg TT) 3666303 375076 +++ +++ Số cịn nỗn nang 3 Số nỗn nang/g phân 93366 161692 Cường độ nhiễm trung bình ++ +++ Số giảm noãn nang 3 Trước Số noãn nang/g phân () dùng thuốc Cường độ nhiễm trung bình Sau dùng thuốc Sulfamethoxazol Toltrazuril e Sau sử dụng liệu trình điều trị cho bị, bê sau ngày, k ết qu ả xét nghiệm lại mẫu phân cho thấy: Với liệu trình sulfamethoxazole (cho uống với liều 1g/50kg TT): Điều trị cho con, trung bình bị có 3666 303 nỗn nang/g phân gi ảm xuống cịn 933 66 nỗn nang/g phân Sau điều trị, đ ều tìm 47 thấy nỗn nang Cryptosporidium spp phân, nói sulfamethoxazole khơng đạt hiệu lực điều trị triệt để Tuy nhiên, tỷ lệ giảm noãn nang đạt 100% với số noãn nang/g phân giảm rõ rệt, cường độ nhiễm trung bình mức “+++” giảm xuống mức “++” Nh vậy, với liệu trình điều trị sulfamethoxazole có hiệu Cryptosporidium spp không đạt hiệu lực triệt để Với liệu trình toltrazuril (cho uống với liều 150mg/10 kg TT, dùng liều nhất): Sau điều trị ngày có 161692 nỗn nang/g phân, số lượng nỗn nang/g phân có giảm khơng đáng kể, cường độ nhiễm mức “+++” Như vậy, thấy với liệu trình điều tr ị toltrazuril không đạt hiệu Cryptosporidium spp Từ kết nghiên cứu trên, ta áp dụng liệu trình sulfamethoxazole để điều trị bệnh Cryptosporidium spp gây bò 48 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp chung xã Quảng Lợi 33,04% Tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp thôn Thủy Lập, Cổ Tháp Hà Lạc 39,47%, 30,95% 28,57% Tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp bò 30,37% bò đực 38,88% Tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp nhóm tuổi 6, - 18 18 tháng tuổi 42,85%, 30,55% 29,41% Tuy nhiên, khác biệt tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp thơn, nhóm tuổi tính biệt nghiên cứu khơng có ý nghĩa mặt thống kê (P > 0,05) Tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp có mặt bị bị tiêu chảy 45,45% cao nhiều so với tỷ lệ nhiễm bị khơng bị tiêu ch ảy 25,35% Kết thu nghiên cứu có ý nghĩa v ề mặt th ống kê (P < 0,05) Qua kết nghiên cứu cho thấy, sử dụng liệu trình toltrazuril để điều trị khơng đạt hiệu lực với Cryptosporidium spp Tuy nhiên, sử dụng liệu trình sulfamethoxazole để điều trị thuốc có hiệu lực Cryptosporidium spp không triệt triệt để 5.2 Kiến nghị Do hạn chế mặt thời gian kinh phí nghiên cứu, nên nghiên c ứu tơi thực số lượng mẫu khiêm tốn chưa chuyên sâu, đề nghị quan chức năng, nhà khoa học ti ếp t ục đầu tư nghiên cứu cách có hệ thống loại ký sinh trùng Cần có nghiên cứu, đề xuất phương pháp phòng trị bệnh Cryptosporidium spp gây gia súc người cách rõ ràng Tuyên truyền, nâng cao ý thức người chăn nuôi việc v ệ sinh thú y, xử lý chất thải từ chăn nuôi bò 49 Cần tổ chức tập huấn kiến thức chăn ni bị, đặc biệt dinh dưỡng khâu thiết kế chuồng trại cho bà nông dân chăn ni bị PHẦN 6: TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Lê Cơng Dần, Phùng Khắc Cam, and Hồng Thủy Long (1998), " Bệnh tiêu chảy cấp Cryptosporidium", Tạp chí y học dự phịng 25 Trần Thị Kim Dung, et al (1997), "Tình Hình Nhiễm Trùng Bào T Đường Ruột Cryptosporidium spp Tại trung tâm bệnh viện nhi ệt đới Tp HCM từ 1/1996 Đến 7/1997", Y Học Hồ Chí Minh- Số Đặc Biệt Hội Nghị Khoa Học, pp 41-45 Lê Quang Đang, et al (1997), "Tình hình nhiễm trùng bào t đường ruột Cryptosporidium spp., Trung tâm bệnh Nhiệt Đới thành phố Hồ Chí Minh từ 1/1996 đến 7/1997", Y học thành phố Hồ Chí Minh – Số đặc biệt Hội Nghị Khoa Học, pp 41 - 45 Lê Thị Vân Hà (2001), Bài giảng ký sinh trùng thú y – phần II Nguyễn Thị Kim Lan, et al (2008), "Giáo trình ký sinh trùng h ọc thú y", NXB Nơng Nghiệp Đinh Thị Bích Lân, et al (2013), "Xác định tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium parvum bò kỹ thuật PCR", Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y (Hội thú y Việt Nam) XX(7), pp 65 - 70 Nguyễn Hoàng Lộc, Lê Việt Dũng, and Trần Quốc Dung (2007), "Giáo trình Cơng nghệ DNA tái tổ hợp", NXB Đại học Quốc gia thành ph ố Hồ Chí Minh Nguyễn Thị Sâm, et al (2007), "Tình hình nhiễm Cryptosporidium spp.trên đàn bò số tỉnh Nam Trung Bộ Tây Nguyên, b ước đầu sử dụng kỷ thuật sinh học phân tử để xác định thành ph ần loại ", 50 Tạp chí Nơng Nghiệp phát triển Nông thôn, pp 36 – 40 Lê Thị Xuân and Trần Vinh Hiển (1997), "Bệnh trùng bào tử (Coccydia) đường ruột", Tạp chí y học thành phố Hồ Chí Minh 1(2), pp 22 – 27 Tiếng Anh 10 Amna Hashim Grace Mulcahy, Billy Bourke, and Marguerite Clyne (2006), "Interaction of Cryptosporidium hominis and Cryptosporidium parvum with Primary Human and Bovine Intestinal Cells, Infect", Immun 74(1), pp 99-107 11 B., C., Anderson, and R., F., Hall (1982), "Cryptosporidial infection in Idaho dairy calves", J Am Vet Med Assoc 181, pp 484 – 485 12 Carey C.M., Lee H., and Trevors J.T (2003), " Biology, persistence and detection of cryptosporidium parvum and cryptosporidium hominis oocyst", water research(38), pp 818-862 13 Castro-Hermida J A., et al (2006), "Prevalence and intensity of infection of Cryptosporidium spp and Giardia duodenalis in dairy cattle in Galicia (NW Spain)", J Vet Med B Infect Dis Vet Public Health 53(5), pp 244 246 14 Chappell C L., et al ( 1996), "Cryptosporidium parvum: intensity of infection and poor secretion of death in healthy volunteers", J Infect Dis 173(1), pp 232 - 236 15 De Graaf D C., et al ( 1999), " A review of the importance of Cryptosporidiosis in farm animals", Internationnal Journal for Parasitology 29, pp 1269 – 1287 16 Duhain G L., Minnaar A., and Buys E M ( 2012), "Effect of Chlorine, Blanching, Freezing, and Microwave Heating on Cryptosporidium parvum Viability Inoculated on Green Peppers", Journal of Food Protection 75(5), pp 936-941 17 Ebrahimzadeh E., et al (2009), "Recombinant C parvum p23 as a 51 Candidate Vaccine for Cryptosporidiosis", Iranian J Parasitol 4(1), pp – 18 Fayer R (1994), "Effect of high temperature on infectivity of Cryptosporidium parvum oocysts in water", Appl Environmental Microbiol 60(8), pp 2732 – 2735 19 Fayer R (1994), " Effect of high temperature on infectivity of Cryptosporidium parvum oocysts in water", Appl Environmental Microbiol 60(8), pp 2732 – 2735 20 Fayer R., Trout J M., and Jenkins M ( 1998), "Infectivity of Cryptosporidium parvum oocysts stored in water at environmental temperatures", J Parasitol 84(6), pp 1165 – 1169 21 Fayer R., Trout J M., and Nerad T ( 1996), "Effects of a wide range of temperatures on infectivity of Cryptosporidium parvum oocysts", J Eukaryot Microbiol 43(5), p 64S 22 Goncalves Elenice M S.N., et al (2008), "Technical report protocol for DNA extraction of Cryptosporidium spp oocysts in fecal samples", Rev Inst Med Trop S Paulo 50(3), pp 165 – 167 23 Goodgame R W (1996), " Understanding intestinal spore-forming protozoa: Cryptosporidia, microsporidia, isospora, and cyclospora", Ann Intern Med 124(4), pp 429 – 441 24 Graczyk T K., et al (2000), "Susceptibility of the Chesapeake Bay to environmental contamination with Cryptosporidium parvum", Environ Res Sec A 82(2), pp 106 – 112 25 Greg Hannahs and Kenyon College, "Cryptosporidium parvum: anemerging pathogen" 26 Guerrant R L (1997), "Cryptosporidiosis: an emerging, highly infectious threat", Emerging Infectious Diseases(169), pp 696 – 699 27 Harp J.A., Woodmansee D.B., and H.W., Moon (1990), "Resistance of Calves to Cryptosporidium Parvum: Effects of Age and Previous Exposure", Infection and Immunity 58 (7), pp 2237-2240 28 Heyworth M F (1992), " Immunology of Giardia and Cryptosporidium infections", J Infect Dis 166(3), pp 465 – 472 29 I., Laberge, et al (1996), "Detection of Cryptosporidium parrvum in 52 raw milk by PCR and oligonucleotide probe hybridization", Applied And Enviromental Microbiology, sept, pp 3259 – 3264 30 Inpankaew T., et al (2009), "Seroprevalence of Cryptosporidium parvum infection of dairy cows in three northern provinces of Thailand determined by enzyme-linked immunosorbent assay using recombinant antigen CpP23", Onderstepoort Journal of Veterinary Research 76, pp 161 – 165 31 Irshad M Sulaiman, et al (1998), "Differentiating Human from Animal isolates of Cryptosporidium parvum", Emerging Infectious Diseases 4(4), pp 681 – 685 32 J., E., Moore,, et al (2002), "Low Incidence of Concurrent Enteric Infection Associated with Sporadic and Outbreak-Related Human Cryptosporidiosis in Northern Ireland", Journal of clinical microbiolgy 40(8), pp 3107-3108 33 Jean-Francois, et al (2001), "Treatment of Diarrhea Cause by Cryptosporidium parvum: A Prospective Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Study of Nitazoxanide", The Journal of infectious Diseases 184, pp 103 - 106 34 Jenkins M B., Bowman, D D., and Ghiorse, W C (1998), " Inactivation of Cryptosporidium parvum oocysts by ammonia", Applied and Environmental Microbiology 64, pp 784 – 788 35 Keusch G T., et al (1995), "Cryptosporidia-who is at risk?", Schweiz Med Wochenschr 125(18), pp 899 – 908 36 Kniel K E., et al (2003), "Effect of organic acids and hydrogen peroxide on Cryptosporidium parvum viability in fruit juices", Journal of Food Protection 66, pp 1650 – 1657 37 Korich D.G., et al (1990), "Effects of ozone, chlorine dioxide, chlorine and monochloramine on Cryptosporidium parvum oocyst viability", Appl Environ Microbiol 56(5), pp 1423 – 1428 38 Lance E peryman, et al (1999), "Protection of calves againts Cryptosporidiosis with imumune bovine colostrum induced by a Cryptosporidium parvum recombinant protein", Vaccine(17), pp 2142 – 53 2149 39 M., M Peng, et al (1997), "Genetic Polymorphism Among Cryptosporidium parvum Isolates: Evidence of Two Distinct Human Transmission Cycles", Emerging Infectious Diseases 3(4), pp 567 – 573 40 Mac W R., et al (1994), "A Massivi Outbreak In Milwaukee Of Cryptosporidium Infection Transmitted Through The Public Water Suppy", The New England Journal Of Medicine 331(3), pp 161 – 167 41 Martins, CAP (1995), "Cryptosporidium and Cryptosporidiosis", Parasitology Today 4, pp 434 – 436 42 Méndez-Hermida F., et al (2007), "Disinfection of drinking water contaminated with Cryptosporidium parvum oocysts under natural sunlight and using the photocatalyst TiO2", Journal of Photochemistry and Photobiology 88, pp 105 – 111 43 Ming Qi Deng and Dean O Cliver (1999), "Cryptosporidium parvum studies with dairy products", International Journal of Food Microbiology 46, pp 113 – 121 44 O’Donoghue P J (1995), "Cryptosporidium and Cryptosporidiosis in man and animals", International Journal for Parasitology 25, pp 139 – 195 45 Olson M E., et al (1999), "Giardia cyst and Cryptosporidium parvum oocysts survival in water, soil, and cattle feces", J Environ Qual 28(6), pp 1991 – 1996 46 Panciera R J., Thomassen R W., and Garner F M (1971), "Cryptosporidial infection in a calf", Vet Pathol 8, pp 479 – 484 47 patel S., pedraza-Diaz S., and Mclauchin J (1999), "The identification of Cryptosporidium species and Cryptosporidium parvum directly from whole faeces by analysis of a multiplex PCR of the 18S rRNA gene and by PCR/RFLP ò the cryptosporidium outer wall protein (COWP) gene", International Journal for Parasitology 29, pp 12411247 48 R F and Nerad T (1996), "Effects of low temperatures on viability of Cryptosporidium parvum oocysts", Applied and Environmental Microbiology 62, pp 1431 -1433 54 49 R., J., Panciera,, R., W., Thomassen, and F., M., Garner, (1971), "Cryptosporidial infection in a calf", Vet Pathol 8, pp 479 – 484 50 R., L., Guerrant, (1997), "Cryptosporidiosis: an emerging, highly infectious threat", Emerging Infectious Diseases(169), pp 696 – 699 51 Rob Atwill (1997), cryptosporidiosis and diarhea in calves Medical Ecology and Enviromental Animal Health University of California 52 Robertson L J., Campbell A T., and Smith H (1992), "Survival of Cryptosporidium parvum oocysts under various environmental pressures", Appl Environ Microbiol 58(11), pp 3494 - 3500 53 Smith H V and Rose J B (1990), "Waterborne Cryptosporidiosis: Current Status", Parasitolory Today 6, pp – 12 54 Swai E S., et al ( 2007), " Prevalence and determinants of Cryptosporidium spp infection in smallholder dairy cattle in Iringa and Tanga Regions of Tanzania", Onderstepoort Journal of Veterinary Research 74, pp 23 – 29 55 Tamburrini A and Pozio E ( 1999), "Long-term survival of Cryptosporidium parvum oocysts in seawater and in experimentally infected mussels (Mytilus galloprovincialis)", Int J Parasitol 29(5), pp 711 – 715 56 Timothy Stinear, et al (1996), "Detection ò a Single Viable Cryptosporidium parvum Oocyst in Environmental Water Concentrates by Reverse Transcription - PCR", Applied And Enviromental Microbiology 62(9), pp 3385 - 3390 57 Waikagul J and Mekavutikul Y (1996), " Treatment of intestinal parasite infestations", Medical Progress, pp 13-16 Internet 58 Greg Hannahs and Kenyon College Cryptosporidium parvum: an emerging pathogen, from http://biology.kenyon.edu/slonc/bio38/hannahs/crypto.htm 59 Viện sốt rét ký sinh trùng côn trùng Quy Nhơn (2012), Trùng bào tử Cryptosporidium sp gây bệnh tiêu chảy, from http://www.impe- 55 qn.org.vn/impe-qn/vn/portal/InfoDetail.jsp? area=58&cat=1184&ID=5684 60 Xét nghiệm đa khoa (2012), Kỹ thuật nhuộm Ziehl Neelsen cải tiến chẩn đoán ký sinh trùn, from http://xetnghiemdakhoa.com/diendan/showthread.php?tid=785 61 Cryptosporidiosis, manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals, Chaper 2.10.9, (2004), from http://web.oie.int/fr/normes/mmanual/A_00135.htm 62 From http://www.foodsafety.govt.nz/elibrary/crytosporydium parvum parasite that 63 Viện sốt rét ký sinh trùng côn trùng Quy Nhơn, Nguyễn Võ Hinh (2012), Trùng bào tử Cryptosporidium sp gây bệnh tiêu chảy, from http://www.impe-qn.org.vn/impe-qn/vn/portal/InfoDetail.jsp? area=58&cat=1184&ID=5684 64 From https://quangdien.thuathienhue.gov.vn/?gd=1&cn=82&cd=2 PH ẦN 7: PH Ụ L ỤC Hình 7.1 Cân phân fucsin Hình 7.2 Nhu ộm m ẫu b ảng carbon 56 Hình 7.3 Sau nhuộm carbon fucsin Hình 7.5 Dung dịch đường bão hịa MC Master Hình 7.4 Tiêu b ản Hình 7.6 Soi kính 57 Hình 7.7 Nhuộm xanh methylen Hình 7.8 T ẩy màu 58 ... 30,95% 28,57% Tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp bò 30,37% bò đực 38,88% Tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp nhóm tuổi 6, - 18 18 tháng tuổi 42,85%, 30,55% 29,41% Tuy nhiên, khác biệt tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium. .. thu nghiên cứu tình hình nhiễm Cryptosporidium spp bò theo tháng tuổi chúng tơi trình bày bảng 4.4 44 Bảng 4.4 Tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm Cryptosporidium spp bò theo nhóm tuổi Tuổi (tháng) Tỷ lệ. .. thấy tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp xã Quảng Lợi (33,04%), kết gần giống với kết nghiên cứu tỷ lệ nhiễm Cryptosporidium spp Thừa Thiên Huế Đinh Thị Bích Lân cs (2013) 38,49% [6] 4.2 Tỷ lệ cường