Volumetric Analysis 09/02/2022 1 PHÂN TÍCH THỰC PHẨM Giảng viên Vũ Thị Huyền Bộ môn Hóa vuhuyen3006@gmail com 1 Phân tích bằng công cụ (2018) Hoàng Hiệp – NXB Học viện NNVN 2 Nielsen S (2017) Food ana[.]
09/02/2022 TÀI LIỆU THAM KHẢO Phân tích cơng cụ (2018) - Hồng Hiệp – NXB Học viện NNVN PHÂN TÍCH THỰC PHẨM Nielsen S (2017) Food analysis (fifth edition) Springer Bài giảng Phân tích thực phẩm Nội dung thực hành Phân tích thực phẩm Giảng viên: Vũ Thị Huyền Bộ mơn Hóa vuhuyen3006@gmail.com GIỚI THIỆU MÔN HỌC CHƯƠNG 1: CÁC VẤN ĐỀ CHUNG Giới thiệu môn học ❖ Thực phẩm? → Sản phẩm có nguồn gốc Lấy mẫu xử lí mẫu từ động, thực vật mà Biểu diễn kết theo phương pháp thống kê người dùng để ăn, uống Kĩ thuật xử lí tín hiệu đo phân tích cho nhu cầu sống, vận Thẩm định phương pháp phân tích hóa học động phát triển thể GIỚI THIỆU MƠN HỌC ❖ Thành phần hóa học thực phẩm? GIỚI THIỆU MƠN HỌC ❖ Phân tích thực phẩm? → Nước → Thành phần dinh dưỡng thực phẩm: protein; gluxit; lipit → Các thành phần hóa học khác: chất thơm; vitamin; alcaloit, phenol; chất khoáng (Na, K, Mg, Ca, Zn, Cu, Mn, Iot…) → Một số thành phần gây ngộ độc thực phẩm: chất vô gây độc; độc tố tự nhiên; thuốc trừ sâu kháng sinh; thuốc kích thích tăng trưởng;… 09/02/2022 GIỚI THIỆU MƠN HỌC ❖ Phân tích thực phẩm? GIỚI THIỆU MƠN HỌC ❖ Phân tích thực phẩm? ➢ Khái niệm: sử dụng phương pháp phân tích lí học, hóa học, hóa lí, vi sinh vật để xác định tiêu hóa lí, vi sinh vật, cảm quan sản phẩm nhằm xác định loại thực phẩm có đạt hay khơng đạt tiêu chuẩn qui định → Phương pháp hóa học, lí học hóa lí GIỚI THIỆU MƠN HỌC ➢ Mục đích: GIỚI THIỆU MƠN HỌC 10 ➢ Phân loại phương pháp phân tích: - Phân tích định tính - Kiểm tra, đánh giá thực phẩm có đáp ứng tiêu chuẩn - Phân tích định lượng phẩm chất thành phần dinh dưỡng ➢ Kĩ thuật phân tích: - Phân tích hóa học: phân tích khối lượng, phân tích thể tích - Kiểm sốt chất lượng hoạt động sản xuất - Phân tích cơng cụ: phương pháp quang phổ, phương pháp - Cung cấp số liệu chất lượng thực phẩm để đưa điện hóa, phương pháp sắc kí nhận định khách quan phục vụ cho cơng tác quản lí nhà nước an toàn vệ sinh thực phẩm GIỚI THIỆU MƠN HỌC 11 ➢ Lựa chọn phương pháp phân tích: LẤY MẪU VÀ XỬ LÍ MẪU 12 2.1 Lấy mẫu - Sử dụng phương pháp thức như: AOAC (Association of Officical Analytical Chemists), tiêu chuẩn Việt Nam (TCVN), phương pháp từ tạp chí khoa học (phải thẩm định) - Căn vào: + Có tính tiên tiến: Thể độ chọn lọc, độ đúng, độ xác ❖ Yêu cầu: Mẫu đại diện (mẫu trung bình): chứa thành phần tỉ lệ hàm lượng thành phần giống vật thể cần phân tích ❖ Nguyên tắc: Lấy mẫu theo tiêu chuẩn hành + Có tính thực tế: phù hợp với điều kiện thực tế, có tính khả thi cao (trang thiết bị, hóa chất, trình độ người…) + Có tính kinh tế: tốn mà đảm bảo kết phân tích + Có tính an tồn cao: an toàn lao động bảo vệ sức khỏe (ít dùng hóa chất độc hại, tránh thao tác kĩ thuật phức tạp, nguy hiểm…) 09/02/2022 2.2 Xử lí mẫu 13 2.2.1 Nhóm hịa tan phân hủy mẫu 14 ❖ Yêu cầu: ❖ Nguyên tắc: Dùng tác nhân hóa học, kết hợp với tác nhân lí học chuyển mẫu có thành phần phức tạp thành dạng đơn giản - Không làm mẫu tạo điều kiện thuận lợi cho phân tích - Không đưa thêm nhiều cấu tử lạ vào dung dịch mẫu ❖ Lựa chọn hóa chất: ❖ Kĩ thuật xử lí mẫu: - Sử dụng hóa chất có tính chất hóa học đối kháng với chất cần khống ➢ Nhóm hịa tan phân hủy mẫu hóa ➢ Nhóm tách pha - Chọn hóa chất từ đơn giản đến phức tạp ❖ Kĩ thuật: + Phân hủy nhiệt axit mạnh, + Kĩ thuật vi sóng, + Phương pháp đốt phân hủy mẫu hữu cơ, + Nung chảy phân hủy mẫu vơ 2.2.2 Nhóm tách pha 15 2.2.2 Nhóm tách pha ❖ Nguyên tắc: Dùng kĩ thuật chưng cất, kết tủa, chiết để loại chất 16 cản trở tách chất phân tích khỏi mẫu ❖ Đặc điểm số trình chiết: ➢ Nguyên tắc: Sự hòa tan khác nhiều thành phần cần chiết pha, tướng từ hỗn hợp ban đầu dựa tính chất vật lí ❖ Một số kĩ thuật: hóa học - Chưng cất - Chiết: + Chiết chất lỏng: chiết lỏng – lỏng, chiết rắn – lỏng, chiết chất lỏng siêu tới hạn + Chiết pha rắn + Chiết màng (manbrane extraction), + Chiết pha rắn in dấu phân tử (moleculary imprinted extraction) 2.3 Chiết chất lỏng 2.2.2 Nhóm tách pha 17 18 ➢ Một vài q trình chiết: ❖ Ngun tắc: Hịa tan chất nghiên cứu dung môi hữu từ hỗn hợp ban đầu sau tách pha hữu chứa chất cần chiết khỏi hỗn hợp ban đầu Sự hãm Sự ngâm Sự ướp hoa ❖ Quá trình chiết gồm giai đoạn: Giai đoạn 1: Dung môi chiết tiếp xúc với hỗn hợp ban đầu chứa chất cần phải chiết Giai đoạn 2: Tách dung môi chiết chứa chất cần chiết khỏi hỗn hợp ban đầu → Dịch chiết Chưng cất lôi nước Chiết dung môi Giai đoạn 3: Làm khô loại dung môi khỏi dịch chiết 09/02/2022 2.3 Chiết chất lỏng 19 2.3 Chiết chất lỏng 20 ❖ Lựa chọn dung môi chiết: 2.3.1 Chiết lỏng – lỏng - Trạng thái vật lí dung mơi: Dung mơi chiết phải trạng thái lỏng nhiệt độ áp suất thực trình chiết - Khả trộn lẫn dung môi: Dung môi chiết không trộn lẫn với pha ban đầu chứa hợp chất cần chiết a Nguyên tắc: - Khối lượng riêng dung môi chiết: cho biết dung môi chiết chứa hợp khác mà chất cần chiết tan nhiều - Chiết chất tan dung môi ban đầu dung môi - Dung môi dùng để chiết gọi dung mơi chiết chất cần chiết nằm phía hay phía so với pha ban đầu - Dung môi ban đầu dung môi chiết không tan lẫn vào trường hợp thực trình chiết lỏng – lỏng 2.3.1 Chiết lỏng – lỏng 21 2.3.1 Chiết lỏng – lỏng b Các đặc trưng định lượng trình chiết lỏng – lỏng 22 ❖ Định luật phân bố Nernst – Hằng số phân bố K - Xét trình chiết hợp chất A, chuyển từ dung môi (1) vào dung môi (2) ❖ Định luật phân bố Nernst – Hằng số phân bố K đến đạt trạng thái cân bằng: Pha hữu chứa chất cần chiết A(1) A(2) Pha nước (1) - Thì: Tỉ số nồng độ cân chất A hai dung môi số cân → Định luật phân bố Nernst số phân bố K KA số phân bố chất A - Quá trình chiết: trình tách phân li dựa vào phân bố khác [A](2), [A](1) nồng độ cân chất A chất hai chất lỏng khơng hịa lẫn vào - KA phụ thuộc vào nhiệt độ chất dung môi cần chiết pha lỏng KA lớn: khả hợp chất A từ dung môi vào dung môi lớn 2.3.1 Chiết lỏng – lỏng 23 dung môi chiết dung môi ban đầu - Nguyên nhân phân bố khác nhau: Do tính tan khác chất ❖ Hệ số phân bố D - Hệ số phân bố D: tỉ số tổng nồng độ dạng hợp chất hòa tan pha hữu pha nước - Biểu thức: Chc tổng nồng độ hợp chất cần chiết pha hữu Cn tổng nồng độ hợp chất cần chiết pha nước 2.3.1 Chiết lỏng – lỏng 24 ❖ Phần trăm chiết (E%) - Phần trăm chiết E%: Tỉ số lượng hợp chất chiết chiết vào pha hữu với lượng chất pha nước ban đầu Hiệu suất chiết - Biểu thức: Qhc lượng hợp chất chiết chiết vào pha hữu Qbđ lượng hợp chất chiết dung dịch nước ban đầu - Hệ số phân bố D: phụ thuộc điều kiện thực nghiệm Nó khơng đổi khơng có q trình phân li, tập hợp biến đổi khác hợp chất hai pha hữu nước 09/02/2022 2.3.1 Chiết lỏng – lỏng 25 2.3.1 Chiết lỏng – lỏng 26 - Giả sử: - Lượng chất A lại pha nước sau n lần chiết với Vhc mL dung môi lần: a0 milimol chất A hòa tan Vn mL nước Vhc thể tích dung mơi hữu chiết (6) - Khi cân bằng: Hay: a1: milimol chất A lại pha nước a0 - a1 : milimol chất A chuyển vào dung môi hữu C0A nồng độ chất A pha nước trước chiết [A]n nồng độ cân chất A sau chiết n lần với thể tích - Lượng chất A cịn lại pha nước sau lần chiết: dung môi lần Vhc mL (5) - Phần trăm chiết E%: Với r = Vn/Vhc (8) 2.3.2 Chiết rắn – lỏng (trích li) 27 2.3.2 Chiết rắn – lỏng (trích li) ❖ Chiết thành phần chất rắn gây nhiễu khỏi hỗn hợp thành phần 28 - Chiết liên tục: dung môi liên tục tiếp xúc với chất tách Ví dụ chiết Soxhlet cần phân tích khỏi hỗn hợp dung mơi thích hợp ❖ Có hai kĩ thuật chiết: - Chiết gián đoạn: Cho chất rắn nghiền nhỏ tiếp xúc với dung môi chiết Sau thời gian tách dung môi khỏi hỗn hợp Việc chiết lặp lại nhiều lần đến chất cần chiết chiết hết 2.3.2 Chiết chất lỏng trạng thái siêu tới hạn 29 2.3.2 Chiết chất lỏng trạng thái siêu tới hạn 30 Rắn Lỏng ❖ Chất lỏng siêu tới hạn: Khuyếch tán xuyên qua chất rắn giống chất khí Siêu tới hạn Hòa tan nguyên liệu giống chất lỏng → Chất lỏng siêu tới hạn: thay dung môi hữu lĩnh vực cơng nghiệp phịng thí nghiệm Khí T ❖ Một số ứng dụng chiết chất lỏng siêu tới hạn: ❖ Chất lỏng siêu tới hạn: Khi nhiệt độ áp suất chất lỏng - Làm chất gia vị hạt men bia điểm tới hạn nó, chất lỏng xem vùng tới hạn gọi - Tách cafein khỏi hạt cà phê chất lỏng siêu tới hạn, nơi mà khơng có khác biệt pha lỏng khí - Chiết tinh dầu 09/02/2022 2.3.2 Chiết chất lỏng trạng thái siêu tới hạn 2.4 Chưng cất lôi nước 31 32 Bình trữ CO2 lỏng Máy ngưng tụ - Chưng cất lôi nước cho phép chiết thành phần hóa học dễ bay hơi, khơng tan nước, có mặt hoa, vỏ, Đốt nóng CO2 nhằm mục đích thu tinh dầu Máy nén Máy tách Chưng cất lôi nước Máy chiết Dịch chiết Sơ đồ chiết CO2 siêu tới hạn 2.4 Chưng cất lôi nước 33 2.5 Chiết chất rắn 34 ❖ Nguyên tắc: Cho phép chiết chất tan dung môi hữu (pha động) chất rắn (pha tĩnh) ❖ Mục đích: Được sử dụng để làm làm đặc cặn chiết thô trước tiến hành định lượng nhiều thành phần - Sự sơi hỗn hợp nước nguyên liệu tạo dòng - Dòng chứa nước tinh dầu - Dòng ngưng tụ để thu phần lỏng chứa nước trạng thái lỏng tinh dầu trạng thái lỏng - Tinh dầu tan nước nhẹ nước nên phía 2.5 Chiết chất rắn 35 ❖ Tiến hành: Sử dụng ống nhỏ hình trụ nhựa chứa chất hấp phụ thích hợp, đưa qua thể tích biết cặn chiết thơ 2.5 Chiết chất rắn 36 ❖ Tồn cách sử dụng: Cách 1: - Giữ lại chất hấp phụ chất phân tích loại hợp chất gây nhiễu cách rửa - Thu hợp chất phân tích cách rửa giải với thể tích nhỏ dung mơi Có thể lặp lại thao tác để làm giàu chất phân tích, đặc biệt việc phân tích lượng vết Sơ đồ chiết pha rắn a, b: hoạt hóa rửa chất hấp thụ trước sử dụng; c: đưa mẫu lên; d: loại bỏ chất gây nhiễu; e: thu hồi chất phân tích cách rửa giải Cách 2: Cho mẫu phân tích qua vật liệu hấp phụ để giữ lại chất không mong muốn đồng thời giải phóng hợp chất phân tích Trong trường hợp mẫu làm không đặc 09/02/2022 BIỂU DIỄN KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM THEO PHƯƠNG PHÁP THỐNG KÊ 37 3.1 Giá trị trung bình 38 ✓ Tiến hành phân tích đại lượng (chỉ tiêu) N lần qui trình - Đại lượng dùng để giá trị đạt chia tổng kết thí phân tích nghiệm lặp lại cho số thí nghiệm lặp lại ✓ Các giá trị đạt được: x1, x2, x3, …, xN - Biểu thức: ✓ Giá trị thực (giá trị ghi bao bì, theo qui chuẩn…) 3.2 Các đại lượng đặc trưng cho độ lặp lại 39 3.2 Các đại lượng đặc trưng cho độ lặp lại 40 ❖ Khoảng biến thiên (R): ❖ Độ lệch kết thí nghiệm (d): - Hiệu số giá trị lớn giá trị nhỏ tập số liệu - Biểu diễn cho độ lệch kết thí nghiệm so với kết trung bình - Biểu thức: di = xi − xത - Biểu thức: (5) - Khoảng biên thiên dùng để đặc trưng cho độ phân tán tập số liệu số phép đo nhỏ 3.2 Các đại lượng đặc trưng cho độ lặp lại 41 ❖ Độ lệch chuẩn: ▪ Độ lệch chuẩn tổng thể (): ➢ Đặc trưng cho độ phân tán số liệu tập hợp với giá trị thực 3.2 Các đại lượng đặc trưng cho độ lặp lại 42 ▪ Độ lệch chuẩn mẫu (S hay SD): Cho biết dao động kết thí nghiệm so với giá trị trung bình, nói lên độ xác phép phân tích xác định theo thống kê ➢ Biểu thức: S= x1 − xത + x2 − xത + … + xN − xത N −1 = σN ത i=1 x i − x N−1 - Độ lệch chuẩn thứ nguyên với đại lượng đo - Khi tính tốn, khơng làm trịn số liệu độ lệch chuẩn kết thúc phép tính tốn ghi giá trị cuối dạng số có nghĩa 09/02/2022 3.2 Các đại lượng đặc trưng cho độ lặp lại 43 3.2 Các đại lượng đặc trưng cho độ lặp lại ❖ Độ lệch chuẩn tương đối (Relative Standard Devition – RSD) hệ số biến thiên (Coefficient Variation – CV) 44 ❖ Phương sai (2 hay S2): - Là bình phương độ lệch chuẩn Phương sai không thứ nguyên với đại lượng đo - Biểu thức: - Đại lượng dùng để đo độ xác tương đối phép phân tích - RSD% nhỏ, độ hội tụ kết phân tích cao Trong phân tích hóa học, thường giới hạn RSD% 5% trường hợp đặc biệt (phân tích lượng nhỏ) RSD% 10% 3.3 Biểu diễn kết thí nghiệm 3.3 Biểu diễn kết thí nghiệm 45 46 ❖ Kết thí nghiệm: xത ± t.S N ❖ Hoặc (13) Kết thí nghiệm: xത ± S (hay xത ± SD) (13) - t chuẩn Student: + Tính khoảng tin cậy số liệu thực nghiệm; + So sánh giá trị trung bình thực nghiệm giá trị thực; + So sánh hai giá trị trung bình thực nghiệm 3.3 Biểu diễn kết thí nghiệm 47 3.3 Biểu diễn kết thí nghiệm 48 ❖ Sai số tương đối: eR% = ε xത ∙ 100 (%) Ví dụ 1: Kết thí nghiệm phân tích hàm lượng cacbohydrat mẫu thực phẩm với lần lặp lại 12,6; 11,9; 13,0; 12,7; 12,5 (%) Tính giá trị trung bình; độ lêch chuẩn mẫu; phương sai biểu diễn kết phân tích với xác suất 95% Xtb = 12,5 (%) S = 0,404 (%); S2 = 0,4042 = 0,163 N = 5, P =0,95, t = 2,78 → = 2,78.0,404/(51/2) = 0,5 Vậy hàm lượng cacbohydrat mẫu là: 12,5±0,5 (%) 09/02/2022 3.3 Biểu diễn kết thí nghiệm 3.4 Các dạng tốn xử lí kết 49 50 3.4.1 Kiểm tra sai số thô ❖ Chuẩn Dixon (Q-test) - Sắp xếp tập số liệu theo chiều tang dần giảm dần - Xác định số nghi ngờ xi mắc sai số thơ (tính độ lệch hai kết liên tiếp, giá trị gây độ lệch lớn → số nghi ngờ - Tính Qtn: Qtn = xi − xgần - Tra bảng tìm Qlt (ứng với P N cho trước) xmax − xmin - So sánh Qtn Qlt: + Nếu Qtn Qlt: Giá trị xi cần kiểm tra mắc sai số thô → Loại bỏ + Nếu Qtn < Qlt: Giá trị xi cần kiểm tra không mắc sai số thô 3.4 Các dạng tốn xử lí kết 51 3.4 Các dạng tốn xử lí kết 52 3.4.1 Kiểm tra sai số thơ Ví dụ 3: Kết thí nghiệm phân tích hàm lượng cacbohydrat mẫu thực phẩm với Ví dụ 2: Phân tích Cu mẫu phương pháp so màu thu kết lần lặp lại 12,6; 11,9; 13,0; 12,7; 12,5 (%) sau: 20,08 ; 19,96 ; 20,04 ; 19,94 ; 20,08 (mg/l) Kiểm tra sai số thô dãy số liệu a) Kiểm tra sau số thô tập số liệu b) Tính kết phân tích với độ tin cậy 95% với độ tin cậy 95% Hướng dẫn: a) - Sắp xếp tập số: 11,9 - Sắp xếp tập số liệu: 19,94 19,96 20,04 20,08 20,08 - - Kiểm tra số nghi ngờ: 19,96 (tính độ lệch TN lặp lại liên tiếp, từ độ lệch lớn, xđ số nghi ngờ) - Tính Qtn = 0,143 - Tra bảng với N = 5, = 0,05 ta có Qlt = 0,710 12,5 12,6 12,7 13,0 Kiểm tra số nghi ngờ: 11,9 11,9−12,5 - Tính Qtn = - Tra bảng với N = 5, P = 0,95: Qlt = 0,710 - So sánh: Qtn < Qlt → Số nghi ngờ không mắc sai số thô 13,0 −11,9 = 0,545 b) - Ta thấy Qtn < Qlt: số nghi ngờ 19,96 không mắc sai số thô (MiniTab, JMP, R) 3.4 Các dạng tốn xử lí kết 53 3.4 Các dạng tốn xử lí kết Ví dụ 4: Phân tích chất X mẫu làm lần lặp lại đạt kết quả: 2,25; 2,38; 54 2,19; 2,11; 3,21; 2,32 (ppm) Kiểm tra sai số thô dãy số liệu với độ tin cậy 95%? Hướng dẫn giải: - Sắp xếp tập số liệu: 2,11 - Kiểm tra số nghi ngờ: 3,21 - Tính Qtn = 0,754 - Tra bảng với N = 6, P = 0,95 → Qlt = 0,625 - So sánh: Qtn > Qlt → số nghi ngờ 3,21 mắc sai số thơ → Loại Khi tập số liệu là: 2,11 - Kiểm tra số nghi ngờ: 2,11 - … 2,19 2,19 2,25 2,25 2,32 2,32 2,38 2,38 3,21 - Tra bảng tìm Tlt (ứng với P N cho trước) - So sánh Ttn Tlt: + Nếu Ttn Tlt: Giá trị xi cần kiểm tra mắc sai số thô + Nếu Ttn < Tlt: Giá trị xi cần kiểm tra không mắc sai số thô 09/02/2022 3.4 Các dạng tốn xử lí kết 3.4.2 Kiểm tra sai hệ thống (So sánh ഥ 𝒙 với µ) 55 56 ❖ Để kiểm tra sai số hệ thống, dùng chuẩn Student Ví dụ 4: Kết phân tích hàm lượng tinh dầu bạc hà từ bạc hà theo tháng năm 2015 sau: Tháng C (ppm) Tháng C (ppm) 13,450 12,808 12,810 12,976 13,317 14,001 11,498 10 13,979 14,045 11 14,223 ❖ Tra bảng để tìm tlt với N P cho trước ❖ So sánh ttn tlt 14,133 12 15,902 + Nếu ttn tlt: kết thí nghiệm thu lệch chuẩn hay mắc phải sai số hệ thống + Nếu ttn < tlt: kết thí nghiệm khơng mắc sai số hệ thống Kiểm tra sai số thô dãy số liệu với độ tin cậy 95% 3.4.2 Kiểm tra sai hệ thống (So sánh ഥ 𝒙 với µ) 57 3.4.3 So sánh phương sai hai tập số liệu – Chuẩn Ficher 58 Ví dụ 5: Để kiểm tra phương pháp Kejdal xác định N cân mẫu mẫu 0,1320g (NH4)2SO4 tinh khiết đem phân tích Kết thu N lần phân tích lặp lại sau: 0,0275g, 0,0279g, 0,0281g, ❖ Hai tập số liệu: Tập số liệu A: x1, x2, …, xN1 Tập số liệu B: y1, y2, …, yN2 Các số liệu không mắc sai số thô 0,0277g, 0,0275g Với = 0,05, hãy: a Kiểm tra sai số thô dãy số liệu ❖ So sánh Ftn Flt: b Tính kết phân tích Nếu Ftn Flt: Khác có ý nghĩa c Kết phân tích có mắc sai số hệ thống khơng? thống kê ❖ Tra bảng tìm Flt với P Nếu Ftn < Flt: Khác khơng có ý nghĩa thống kê f1 = N1 – 1, f2 = N2 - 3.4.3 So sánh phương sai hai tập số liệu – Chuẩn Ficher 3.4.3 So sánh phương sai hai tập số liệu – Chuẩn Ficher 59 10 09/02/2022 3.4.3 So sánh phương sai hai tập số liệu – Chuẩn Ficher 61 Ví dụ 6: Phân tích Fe mẫu phương pháp A B thu kết sau: PPA: 13,29; 13,36; 13,32; 13,53; 13,56; 13,43; 13,30; 13,43 (mg) PPB: 13,86; 13,99; 13,88; 13,91; 13,89; 13,94; 13,80; 13,89 (mg) Với = 0,05, cho biết độ xác hai phương pháp có đồng 3.4.4 So sánh hai giá trị trung bình thực nghiệm – Chuẩn Student 62 ❖ Bước 1: Kiểm tra độ xác hai phương pháp theo không? chuẩn F (độ tin cậy 95%) - Tính Giá trị trung bình: XtbA = 13,40 (mg); XtbB = 13,90 (mg) Độ lệch chuẩn mẫu ước đoán: SA = 0,1031 (mg); SB = 0,05580 (mg) - Ta thấy SA > SB - Tính Ftn = SA2/SB2 = 3,413 - Tra bảng tìm Flt = 3,438 - So sánh Ftn < Flt: Phương sai hai phương pháp đồng 3.4.4 So sánh hai giá trị trung bình thực nghiệm – Chuẩn Student 63 Khi NA = NB = N, thì: ❖ Bước 2: Nếu Ftn Flt: Độ lệch chuẩn SA SB thuộc tập hợp, tính độ lệch chuẩn chung theo cơng thức: 3.4.4 So sánh hai giá trị trung bình thực nghiệm – Chuẩn Student 64 Tra bảng tìm giá trị tlt ứng với độ tin cậy 95% 3.4.4 So sánh hai giá trị trung bình thực nghiệm – Chuẩn Student 65 Ví dụ 6: Phân tích Fe mẫu phương pháp A B thu kết sau: PPA: 13,29; 13,36; 13,32; 13,53; 13,56; 13,43; 13,30; 13,43 (mg) PPB: 13,86; 13,99; 13,88; 13,91; 13,89; 13,94; 13,80; 13,89 (mg) Với = 0,05, sử dụng chuẩn student, cho biết kết phân tích hai phương pháp có đồng không? Nếu biết giá trị thực = 13,95 mg phương pháp đúng? 3.4.5 Kiểm tra đồng hai kết lặp lại 66 - Sử dụng -test để kiểm tra xem sai lệch hai kết chấp nhận không Tính -test: Trong đó: = b S b: giá trị cho trước ứng với cho trước S: Phương sai phương pháp ngưỡng phân tích thiết bị ngưỡng phân tích phương pháp Bước 1: Phương sai hai phương pháp khác ý nghĩa thống kê Bước 2: Tính ttn = 11,94 Tra bảng: tlt = 2,36 So sánh: ttn > tlt: kết phân tích hai phương pháp khác có ý nghĩa thống kê 11 09/02/2022 3.4.5 Kiểm tra đồng hai kết lặp lại 67 3.4.6 Trình tự xử lí kết thí nghiệm Bảng 1-8: Trị số b dùng cho đánh giá sai khác hai lần phân tích lặp lại 0,05 0,01 Giả sử làm N thí nghiệm giá trị thực nghiệm x1, x2,… xN Bước 1: Kiểm tra sai số thô Bước 2: Tính biên giới tin cậy với độ tin cậy cho trước b 2,456 3,227 Bước 3: Biểu diễn kết quả: xത ± (hoặc xത ± S) Bước 4: Xác định sai số hệ thống, sai lệch hai phương pháp cần 3.4.6 Trình tự xử lí kết thí nghiệm 69 68 3.4.6 Trình tự xử lí kết thí nghiệm Ví dụ 7: Xác định hàm lượng đạm mẫu thức ăn lần lặp lại thu 70 Ví dụ 7: Xác định hàm lượng đạm mẫu thức ăn lần lặp lại thu kết sau: 12,5; 12,7; 13,1 12,4 (%) Tính kết kết sau: 12,5; 12,7; 13,1 12,4 (%) Tính kết phân tích với xác suất 95% phân tích với xác suất 95% Bước 2: Tính biên giới tin cậy Bước 1: Kiểm tra sai số thô (N = → Dùng Q-test) - Sắp xếp tập số liệu: 12,4 12,5 12,7 13,1 - Ta có: = ??? (%) - Độ lệch chuẩn mẫu: S = 0,310 (%) - Kiểm tra số nghi ngờ: 13,1 - Do = 0,5 (%) Qtn = 0,57 Bước 3: Hàm lượng đạm mẫu thức ăn là: 12,7 0,5 (%) - Tra bảng với N = 4, = 0,05 → Qlt = 0,829 - So sánh Qtn < Qlt: Số nghi ngờ 13,1 không măc sai số thô 3.4.6 Trình tự xử lí kết thí nghiệm 71 Ví dụ 8: Xác định hàm lượng phần trăm Na2CO3 soda phương pháp chuẩn độ axit – bazơ, hai nhà phân tích phân tích mẫu soda, họ nhận kết sau: Nhà phân tích A : 86,82; 87,04; 86,93; 87;01; 86;20; 87,00 (%) Nhà phân tích B: 81,01 ; 86,15 ; 81,73 ; 83,19 ; 80,27, 83,94 (%) t= 2,57 Với = 0,05, hãy: a Kiểm tra sai số thô hai tập số liệu b Sử dụng chuẩn student, cho biết kết phân tích hai nhà phân tích có đồng không trường hợp với giả thiết kết thu mắc sai số ngẫu nhiên? Biết tlt = 2,57 3.4.6 Trình tự xử lí kết thí nghiệm 72 Ví dụ 9: Xác định hàm lượng acetaminophen loại thuốc (Excedrin Extra Strength Pain Reliever) tiến hành phân tích 10 lần lặp lại thu kết sau (mg/viên): 224,3; 240,4; 246,3; 239,4; 253,1; 261,7; 229,4; 255,5; 235,5; 249,7 Hãy: a Kiểm tra sai số thơ tập số liệu b Tính giá trị trung bình, khoảng biến thiên, độ lệch chuẩn mẫu ước đoán phương sai tập số liệu c Nếu biết giá trị thực μ = 250 mg/viên, cho biết phân tích có mắc sai số hệ thống khơng? d Tính kết phân tích mẫu với độ tin cậy 95% 12 09/02/2022 3.4.6 Trình tự xử lí kết thí nghiệm 73 3.4.6 Trình tự xử lí kết thí nghiệm Ví dụ 10: Các kết phân tích hàm lượng Paracetamol mẫu 74 Ví dụ 11: Phân tích ion Cu2+ mẫu thực nhà phân tích thuốc là: 3,25; 3,19; 3,11; 3,21; 3,38; 2,32 mg thu kết sau : a Dùng chuẩn Q để kiểm tra xem có cần lại bỏ giá trị dãy số liệu Nhà phân tích A : 20,16 ; 20,22 ; 20,18 ; 20,20 ; 20,24 (mg/l) khơng? Nhà phân tích B: 20,08 ; 19,96 ; 20,04 ; 19,94 ; 20,08 (mg/l) b Tính giá trị trung bình, độ lệch chuẩn dựa vào kết câu a Với = 0,05, sử dụng chuẩn student, cho biết giá trị trung bình kết c Tính kết phân tích mẫu với độ tin cậy 95% phân tích hai nhà phân tích có đồng khơng? Giả thiết kết thu mắc sai số ngẫu nhiên Tương quan tín hiệu đo nồng chất phân tích 75 4.1 Hiệu chuẩn tín hiệu đo Sđo ❖ Mối quan hệ tín hiệu lượng chất phân tích có mẫu 76 phân tích xác định biểu thức: Sđo = k A nbA + Sr Sđo = k A CAb + Sr Trong đó: ❖ Đo Sđo cho chất chuẩn biết tín hiệu Schuẩn, điều chỉnh Sđo khi: Sđo = Schuẩn (1) Sđo: tín hiệu đo nA: số mol chất phân tích CA: nồng độ chất phân tích kA: độ nhạy phương pháp chất phân tích Sr: tín hiệu đóng góp vào Sđo từ nguồn khác mẫu b: số thực, b = b = -1 b = Sđo = kA.CA + Sr (y = ax + b) ➢ Phải xác định giá trị kA Sr 4.2 Xác định độ nhạy kA 77 ❖ Giá trị kA xác định cách phân tích nhiều dung dịch tiêu chuẩn chứa lượng chất phân tích biết trước ➢ Do đó, để đơn giản, giả định Sr tạo mẫu trắng thích hợp, cho phép thay Sđo phương trình (1) với tín hiệu chất phân tích, SA Sđo = kACA (2) 4.2 Xác định độ nhạy kA 78 ❖ Ngoại chuẩn đơn điểm ➢ Đo tín hiệu cho chuẩn Schuẩn, có chứa nồng độ chất phân tích, Cchuẩn Thay giá trị vào phương trình có giá trị kA: S k A = chuẩn (3) Cchuẩn ➢ Từ giá trị xác định kA, tính nồng độ chất phân tích CA mẫu cách đo tín hiệu Sđo nó: S CA = đo (4) kA Ví dụ 12: Phương pháp quang phổ phân tích định lượng ion Pb2+ máu có Schuẩn 0,474 ứng với nồng độ chì 1,75 ppb Hỏi nồng độ ion Pb2+ mẫu máu bao nhiêu, có Sđo 0,361? 13 09/02/2022 4.2 Xác định độ nhạy kA 79 4.2 Xác định độ nhạy kA 80 ❖ Ngoại chuẩn đơn điểm Ví dụ 12: Phương pháp quang phổ phân tích định lượng ion Pb2+ máu có Schuẩn 0,474 ứng với nồng độ chì 1,75 ppb Hỏi nồng độ ion Pb2+ mẫu máu bao nhiêu, có Sđo 0,361? Thuốc cam (Pb3O4 Hồng đơn) Cchuẩn = 1,75 ppb Schuẩn = 0,474 → kPb2+ = 0,474/1,75 = 0,271 CPb2+ = 0,361/0,271 = 1,33 ppb ❖ Ngoại chuẩn đa điểm – Đường chuẩn ➢ Chuẩn bị mẫu chuẩn, có nồng độ chất cần phân tích tăng dần ➢ Tiến hành đo mẫu chuẩn tín hiệu đo tương ứng ➢ Từ tín hiệu đo này, xây dựng đường chuẩn ➢ Khi đường chuẩn đường thẳng, hệ số góc đường cho giá trị kA ➢ Mẫu phân tích chuẩn bị thực phép đo tương tự mẫu chuẩn ➢ Đường chuẩn cung cấp mối quan hệ Sđo đến nồng độ chất phân tích 4.2 Xác định độ nhạy kA 4.2 Xác định độ nhạy kA Ví dụ: Bình định mức bên trái mẫu trắng bình định mức 82 ➢ Giới hạn chấp nhận đường chuẩn: - Hệ số hồi qui tuyến tính (R): 0,995 ≤ R ≤ hay 0,99 ≤ R2 ≤ cịn lại có chứa nồng độ Cu2+ tăng dần từ trái qua phải Hình bên bình thể tích đường tiêu chuẩn R= σN ത yi − y ഥ i=1 xi − x σN ത (yi − y) i=1 xi − x - Độ chệch điểm nồng độ dùng xây dựng đường chuẩn: Sau lập đường chuẩn xong cần kiểm tra phương pháp tính ngược lại nồng độ điểm chuẩn sử dụng để xây dựng đường chuẩn, từ tính Apt giá trị độ chệch theo công thức sau: i = đó: Schuẩn Cpt Cchuẩn (M) 4.2 Xác định độ nhạy kA 83 Ví dụ 13: Phương pháp quang phổ xác định hàm lượng ion Pb2+ mẫu máu, lập đường chuẩn sau: Schuẩn = (0,296 ppb-1).Cchuẩn + 0,003 Tính nồng độ ion Pb2+ mẫu biết tín hiệu quang mẫu 0,397 Smẫu = (0,296 ppb-1).Cmẫu + 0,003 Cmẫu = 1,33 ppb Ct − Cc Cc 100 i: độ chệch điểm dung xây dựng đường chuẩn Ct: nồng độ tính ngược theo đường chuẩn điểm chuẩn Cc: nồng độ điểm chuẩn - không vượt ± 15% cho tất nồng độ; riêng nồng độ LOQ chấp nhận giới hạn ± 20% 4.2 Xác định độ nhạy kA 84 Ví dụ 14: So màu xác định ion Fe3+ với thuốc thử KCNS phương pháp dãy màu tiêu chuẩn, lấy vào bình định mức 100 ml 0,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0; 10,0 ml 10-3M dung dịch Fe3+ Độ hấp thụ quang dung dịch màu tiêu chuẩn là: 0,00; 0,13; 0,29; 0,40; 0,56; 0,68 Hãy tính nồng độ mol/l dung dịch mẫu, độ hấp thụ quang bình màu làm từ dung dịch mẫu phân tích 0,35 lên màu lấy 15ml dung dịch phân tích 0,8 y = 0,0686x + 0,0005 R² = 0,9982 0,7 0,6 0,5 Abs 81 0,4 0,3 0,2 0,1 0 V chuẩn 10 12 14 09/02/2022 4.2 Xác định độ nhạy kA VFe3+ 10-3M 4.2 Xác định độ nhạy kA 86 0,8 (ml) Achuẩn y = 0,0686x + 0,0005 R² = 0,9982 0,7 Cách 2: 0 0,6 0,13 0,5 CFe3+ M Achuẩn 0,4 0,29 0 0,3 0,40 2.10-5 0,13 4.10-5 0,29 6.10-5 0,40 8.10-5 0,56 10.10-5 0,68 Abs 85 0,2 0,1 0,56 10 0 0,68 V chuẩn 10 12 Phương trình đường chuẩn: Schuẩn = (0,0686 ml-1).Vchuẩn + 0,0005 Sđo = (0,0686 ml-1) Phương trình đường chuẩn: Schuẩn = (6857,14 M-1) Cchuẩn + 0,0005 Vđo + 0,0005 Vđo = 5,0947 (ml) Sđo = (6857,17 M-1) Cđo + 0,0005 Vpt.Cmẫu = (Vđo.10-3).100 Cđo = 5,096.10-5M Cmẫu = (5,0947.10-3.100)/15 = 0,04 (mol/l) Vpt.Cmẫu = Cđo.100 Cmẫu = (5,096.10-5 100)/15 = 0,04 M 4.2 Xác định độ nhạy kA 87 4.2 Xác định độ nhạy kA Ví dụ 15: So màu xác định hàm lượng Fe mẫu nước thải công nghiệp với 88 thuốc thử o-phenanthroline phương pháp dãy màu tiêu chuẩn, lấy vào bình ❖ Thêm chuẩn điểm ➢ Thêm thể tích mẫu phân tích, Vo, vào bình định mức, pha lỗng lên định mức 100 ml 0,00; 1,00; 2,00; 3,00; 4,00 ml dung dịch Fe2+10-3M Độ hấp thụ thể tích Vf, đo tín hiệu Smẫu quang dung dịch màu tiêu chuẩn là: 0,000; 0,183; 0,364; 0,546; 0,727 ➢ Thêm thể tích Vo mẫu vào bình định mức tương đương Xác định hàm lượng Fe (mg/l) mẫu, biết độ hấp thụ quang dung dịch màu làm từ dung dịch mẫu phân tích 0,269 với chất tiêu chuẩn Vchuẩn, có nồng độ Cchuẩn Sau định mức đến Hướng dẫn: Từ liệu ta có bảng số liệu sau: CFe2+ (M) Achuẩn Phương trình đường chuẩn: Schuẩn = 18170 0 + 0,0006 0,00001 0,183 0,00002 0,364 0,00003 0,546 0,269 = 18170 (M-1).Cmẫu + 0,0006 0,00004 0,727 → Cmẫu = 1,47.10-5 (mol/l) = 1,47.10-5.56.103 = 0,82 vạch Vf, đo tín hiệu Smẫu+chuẩn (M-1).Cchuẩn Mà Sđo = 0,269 (mg/l) 4.2 Xác định độ nhạy kA 89 4.2 Xác định độ nhạy kA 90 ❖ Thêm chuẩn điểm ➢ Ta có: Smẫu = k A CA Smẫu+chuẩn = k A (CA Vo Vf Vo Vf + Cchuẩn Vchuẩn Vf ) Ví dụ 16: Phương pháp quang phổ phân tích định lượng ion Pb2+ (5) máu Đo giá trị Smẫu = 0,193 mẫu máu tích 1,00 ml (6) 1,00 μl dung dịch tiêu chuẩn Pb2+ với nồng độ 1560 ppb pha pha loãng đến 5,00 ml Một mẫu thứ chứa 1,00ml máu thêm loãng đến 5,00 ml, cho kết Smẫu+chuẩn 0,419 Nồng độ Pb2+ ➢ Từ (5) (6), ta có: mẫu máu ban đầu bao nhiêu? Smẫu V CA Vo f = Smẫu+chuẩn V V CA Vo + Cchuẩn chuẩn V f (7) f ➢ Giải phương trình (7) tính nồng độ chất phân tích CA mẫu ban đầu Giải: - V0 = 1,0 ml; Vf = 5,0 ml; Smẫu = 0,193 - Vchuẩn = 1,0.10-3 ml; Cchuẩn = 1560 ppb; Smẫu+chuẩn = 0,419 - CPb2+mẫu = 1,33 (ppb) Smẫu V CA Vo f = Smẫu+chuẩn V V CA Vo + Cchuẩn chuẩn V f (7) f 15 09/02/2022 4.2 Xác định độ nhạy kA 91 4.2 Xác định độ nhạy kA 92 Giải: ❖ Thêm chuẩn nhiều điểm: ➢ Chuẩn bị loạt mẫu có chứa dung dịch tiêu chuẩn ngồi tăng - V0 = 1,0 ml; Vf = 5,0 ml; Smẫu = 0,193 - Vchuẩn = 1,0.10-3 ml; Cchuẩn = 1560 ppb; Smẫu+chuẩn = 0,419 dần ➢ Đo tín hiệu dung dịch phân tích chưa thêm chất chuẩn: Smẫu 0.193 0.419 = → CPb2+ = 1 1.0𝑥10−6 CA CA + 1560 5 ➢ Đo tín hiệu dung dịch phân tích có thêm chất chuẩn: Smẫu + chuẩn ➢ Vẽ đường biểu diễn mối quan hệ tín hiệu đo thể tích (nồng độ) chất chuẩn thêm 4.2 Xác định độ nhạy kA 93 4.2 Xác định độ nhạy kA ➢ Giao điểm đường 94 Ví dụ 17: Phương pháp quang phổ phân tích định lượng ion Pb2+trong máu sử dụng phương pháp thêm chuẩn nhiều điểm Mẫu máu ban đầu tích 1,00 ml (V0) chuẩn với trục hoành (Cx) tiêu chuẩn có nồng độ 1560 ppb Pb2+ (Cchuẩn) Tất mẫu pha loãng đến cho phép xác định nồng 5,00 ml trước đo tín hiệu Đường chuẩn Smẫu+chuẩn so với Vchuẩn có phương trình độ dung dịch phân sau: Smẫu+chuẩn = 312 (ml-1).Vchuẩn + 0,266 tích Tính nồng độ ion Pb2+ mẫu máu ban đầu Cx = − CA Vo Cchuẩn Hướng dẫn giải: Để tìm giá trị pp thêm chuẩn nhiều điểm, đặt Smẫu+chuẩn = 312 (ml-1).Vchuẩn + 0,266 = → Vchuẩn = - 8,525.10-4 (ml) Thay Vchuẩn vào phương trình: Cx = Thẩm định phương pháp phân tích hóa học 95 ❖ Thẩm định phương pháp phân tích: khẳng định việc kiểm tra cung cấp chứng khách quan chứng minh phương pháp phân tích đáp ứng yêu cầu đặt Kết thẩm định phương pháp sử dụng để đánh giá chất lượng, độ tin cậy kết phân tích ➢ Là phần khơng thể thiếu muốn có kết phân tích đáng tin cậy − CA Vo Cchuẩn ↔ − 8,525.10−4 = −CA 1560 → CA = 1,33 (ppb) Thẩm định phương pháp phân tích hóa học 96 ❖ Các thông số cần thẩm định: ➢ Tính đặc hiệu, tính chọn lọc; (Specifility/Selectivity) ➢ Khoảng tuyến tính đường chuẩn; (Linearity and Calibration curve) ➢ Giới hạn phát hiện; (Limit of Detection – LOD) ➢ Giới hạn định lượng; (Limit of Quantitation – LOQ) ➢ Độ đúng; (Trueness) ➢ Độ chụm; (Precision) ➢ Độ vững (ổn định) phương pháp; (Robustness/Ruggedness) 16 09/02/2022 5.1 Khoảng tuyến tính đường chuẩn 97 5.2 Khoảng tuyến tính đường chuẩn 98 ❖ Định nghĩa: ➢ Khoảng tuyến tính: khoảng nồng độ có phụ thuộc tuyến tính đại lượng đo nồng độ chất phân tích ➢ Đo dung dịch chuẩn có nồng độ thay đổi ➢ Vẽ đường phụ thuộc tín hiệu đo nồng độ, sau quan sát phụ thuộc khơng cịn tuyến tính ➢ Khoảng làm việc: khoảng nồng độ giới hạn giới hạn chất phân tích (bao gồm giới hạn này), chứng minh xác định phương pháp định với độ đúng, độ xác độ tuyến tính 5.3 Giới hạn phát (LOD- Limit of ditection) 99 ❖ Định nghĩa: Là nồng độ mà giá trị xác định lớn độ ❖ Cách xác định khoảng tuyến tính: ➢ Khoảng tuyến tính dài hay ngắn phụ thuộc vào nhiều yếu tố, quan trọng chất chất phân tích kỹ thuật sử dụng 5.3 Giới hạn phát (LOD- Limit of ditection) 100 ❖ Cách xác định: không đảm bảo đo phương pháp Đây nồng độ thấp ➢ Dựa độ lệch chuẩn chất phân tích mẫu phát chưa thể định Cách 1: Làm mẫu trắng: mẫu trắng có thành phần mẫu thử khơng có chất phân tích - Phân tích mẫu trắng 10 lần lặp lại, tính độ lệch chuẩn Độ lệch chuẩn phải khác - Tính LOD: LOD = xത ± 3SDo lượng Với SD0 = S0 = Trong đó: 5.3 Giới hạn phát (LOD- Limit of ditection) 101 Cách 2: Làm mẫu thử, nên chọn mẫu thử có nồng độ thấp (ví dụ, khoảng đến lần LOD ước lượng), làm 10 lần lặp lại - Tính giá trị độ lệch chuẩn mẫu SD - Tính LOD: LOD = x SD Với SD = Trong đó: σN ത i=1 xi − x N −1 xത : trung bình mẫu SD: độ lệch chuẩn mẫu - Đánh giá LOD tính được: tính R = xത /LOD + Nếu < R < 10: nồng độ dung dịch thử phù hợp LOD tính đáng tin cậy + Nếu R < 4: phải dùng dung dịch thử đậm đặc hơn, thêm chất chuẩn vào dung dịch thử dùng, làm lại thí nghiệm tính lại R + Nếu R > 10: phải dùng dung dịch thử loãng hơn, pha loãng dung thử dùng, làm lại thí nghiệm tính lại R N x −x σi=1 0i o N −1 xത o : trung bình mẫu trắng SDo: độ lệch chuẩn mẫu trắng 5.3 Giới hạn phát (LOD- Limit of ditection) 102 ➢ Dựa tỉ lệ tín hiệu nhiễu (S/N): Cách áp dụng quy trình phân tích sử dụng cơng cụ có nhiễu đường nền, phương pháp sắc ký, điện di - Phân tích mẫu (mẫu thực, mẫu thêm chuẩn mẫu chuẩn) nồng độ thấp xuất tín hiệu chất phân tích Số lần phân tích lặp lại 3-4 lần - Xác định tỷ lệ tín hiệu chia cho nhiễu (S/N = Signal to noise ratio) Trong đó: S chiều cao tín hiệu chất; N nhiễu đường Nhiễu đường tính hai phía đường tốt tính nhiễu lân cận hai bên píc, bề rộng bên tối thiểu gấp 10 lần chiều rộng píc nửa chiều cao - LOD chấp nhận nồng độ mà tín hiệu lớn gấp 2-3 lần nhiễu đường nền, thơng thường thường lấy S/N = 17 09/02/2022 5.3 Giới hạn phát (LOD- Limit of ditection) 103 ➢ Dựa đường chuẩn: LOD = Trong đó: 3,3 x SD 5.4 Giới hạn định lượng (LOQ- Limit of quantation) 104 a SD: độ lệch chuẩn tín hiệu a: độ dốc đường chuẩn ❖ Định nghĩa: nồng độ tối thiểu chất có mẫu thử mà ta định lượng phương pháp khảo sát cho kết có độ chụm mong muốn; áp dụng cho phương pháp định lượng - Giá trị a: tính từ đường chuẩn - Giá trị SD tính theo nhiều cách khác nhau, bao gồm: ▪ Dựa độ lệch chuẩn mẫu trắng: Phân tích mẫu trắng lặp lại 10 lần tính SD tương ứng; ▪ Dựa độ lệch chuẩn mẫu thêm chuẩn nồng độ nhỏ gần LOD, lặp lại 10 lần tính SD; ▪ Dựa hệ số chặn đường chuẩn, làm nhiều lần để tính SD giá trị b (intercept); ▪ Dựa độ lệch chuẩn khoảng cách giá trị đo thực với đường chuẩn 5.4 Giới hạn định lượng (LOQ- Limit of quantation) 105 TỔNG HỢP 106 ❖ Cách xác định: ➢ Dựa độ lệch chuẩn: - Tính mẫu trắng: LOQ = x0 + 10 SD0 - Tính mẫu thử: LOQ = 10 SD ➢ Dựa tỉ lệ tín hiệu nhiễu: - Áp dụng qui trình phân tích sử dụng cơng cụ có nhiễu đường Cách tính tốn phần tính LOD - LOQ chấp nhận nồng độ mà tín hiệu lớn gấp 10-20 lần nhiễu đường nền, thông thường thường lấy S/N = 10 1) Biết cách biểu diễn kết phân tích - Kiểm tra sai số thơ (Q-test) (ngay tốn không yêu cầu) - Kết quả: xത ± t.S N với độ tin cậy cho trước xത ± S (hay xത ± SD) 2) Tương quan tín hiệu đo nồng độ chất - Đường chuẩn (ngoại chuẩn đa điểm) - Thêm chuẩn (đơn điểm, đa điểm) ➢ Dựa đường chuẩn: LOD = 10 SD a 17.9.2021 107 18 ... A, chuyển từ dung môi (1) vào dung môi (2) ❖ Định luật phân bố Nernst – Hằng số phân bố K đến đạt trạng thái cân bằng: Pha hữu chứa chất cần chiết A(1) A(2) Pha nước (1) - Thì: Tỉ số nồng độ... số phân bố K KA số phân bố chất A - Quá trình chiết: trình tách phân li dựa vào phân bố khác [A ](2), [A](1) nồng độ cân chất A chất hai chất lỏng không hòa lẫn vào - KA phụ thuộc vào nhiệt độ... trắng thích hợp, cho phép thay Sđo phương trình (1) với tín hiệu chất phân tích, SA Sđo = kACA (2) 4.2 Xác định độ nhạy kA 78 ❖ Ngoại chuẩn đơn điểm ➢ Đo tín hiệu cho chuẩn Schuẩn, có chứa nồng