(Luận án tiến sĩ) NGHIÊN cứu THÀNH PHẦN hóa học và một số tác DỤNG SINH học của cây ĐINH LĂNG (POLYSCIAS FRUTICOSA (l ) HARMS)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐỖ VĂN MÃI NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY ĐINH LĂNG (POLYSCIAS FRUTICOSA (L.) HARMS) LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC TP HỒ CHÍ MINH, Năm 2022 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐỖ VĂN MÃI NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY ĐINH LĂNG (POLYSCIAS FRUTICOSA (L.) HARMS) ` NGÀNH: DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 62720406 LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS TRẦN CƠNG LUẬN TP HỒ CHÍ MINH, Năm 2022 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tôi, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực, khách quan chưa công bố nơi Tác giả luận án Đỗ Văn Mãi ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com i MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ii DANH MỤC CÁC BẢNG iv DANH MỤC CÁC HÌNH vi MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI POLYSCIAS 1.2 TỔNG QUAN VỀ LOÀI POLYSCIAS FRUTICOSA 24 1.3 MƠ HÌNH NGHIÊN CỨU IN VIVO GÂY TỔN THƯƠNG GAN, THẬN .35 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 39 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 39 2.2 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 41 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .43 2.4 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH DỮ LIỆU 55 2.5 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 56 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .57 3.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT HỌC VÀ ĐỊNH DANH LOÀI 57 3.2 NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC .69 3.3 NGHIÊN CỨU VỀ ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC .108 Chương BÀN LUẬN 120 4.1 VỀ THỰC VẬT HỌC VÀ ĐỊNH DANH LOÀI 120 4.2 VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC .124 4.3 VỀ ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC 131 4.4 TÍNH MỚI CỦA ĐỀ TÀI 142 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 143 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐỀ TÀI .145 TÀI LIỆU THAM KHẢO 146 DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC 167 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com ii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ đầy đủ ABTS 2,2’-azinobis-3-ethylbenzothiazolin- Acid 2,2’-azinobis-3- 6-sulfonic acid ethylbenzothiazolin-6-sulfonic ADN Deoxyribonucleic acid Acid deoxyribonucleic Ara α-L-Arabinopyranosyl α- L-Arabinopyranosyl BUN Blood ure nitrogen Định lượng nồng độ Urea Nitrogen máu n-Butanol n-Butanol COSY Correlation spectroscopy Phổ tương tác cpDNA Chloroplast deoxyribo nucleic acid ADN lục lạp CTAB Cetyltrimethylammonium bromide Cetyl trimethyl amonium Bromid Doublet Đỉnh đôi Detortionless enhancement by Phổ DEPT n-BuOH d DEPT Nghĩa Tiếng Việt polarization transfer dNTP 5,5’-Dithiobis-(2-nitrobenzoic acid) Acid 5,5’-Dithiobis-(2nitrobenzoic) DPPH 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl Dose maximum Liều tối đa Ethylenediaminetetracetic acid Acid ethylendiamintetracetic Et2O Diethyl ether Dietyl eter EtOAc Ethyl acetate Ethyl acetat Gal β-D-Galactopyranosyl β- D-Galactopyranosyl Glc β-D-Glucopyranosyl β- D-Glucopyranosyl GlcA β-D-Glucuronopyranosyl β- D-Glucuronopyranosyl GGT Gamma-glutamyl transpeptidase Gamma-glutamyl transpeptidase GSH Glutathione Glutathion n-He n-Hexane n-Hexan HMBC Heteronuclear multiple bond coherence Phổ tương tác dị nhân qua nhiều nối HPLC High performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao HR-ESI-MS High resolution electrospray ionisation mass spectrometry Phổ khối lượng phun điện phân giải cao HSQC Heteronuclear single quantum Phổ tương tác dị nhân qua nối Dmax EDTA correlation ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com iii i.p Intraperitoneal inJection Tiêm phúc mạc IC50 Inhibition concentration 50% Nồng độ ức chế 50% IR Infrared Phổ hồng ngoại J Coupling constant Hằng số ghép Liquid chromatography/ mass spectroscopy Sắc ký lỏng ghép khối phổ LC/MS m Multiplet Đỉnh đa MDA Malondialdehyde Malondialdehyd MeOH Methanol Methanol Me2CO Acetone Aceton MIC Minimum inhibitory concentrations Nồng độ ức chế tối thiểu MTT 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5diphenyltetrazolium bromide 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5diphenyltetrazolium bromid NCBI National center for biotechnology Trung tâm Thông tin Công nghệ information sinh học Quốc gia NMR Nuclear Magnetic Resonance Cộng hưởng từ hạt nhân OCT2 Organic cation transporter Chất vận chuyển cation hữu P53 Tuner protein p53 Gen ức chế khối u PCR Polymerase chain reaction Phản ứng chuỗi đa phân Polyscias fruticosa Đinh lăng Ribulose-1,5-biphosphate carboxylate Gen ribulose-1,5-biphosphat PF rbcL carboxylat Rha α-L-Rhamnopyranosyl α-L-Rhamnopyranosyl ROS Reactive oxygen species Gốc oxy hóa tự Rt Retention time Thời gian lưu s Singlet Đỉnh đơn Standard error of the mean Sai số chuẩn giá trị trung bình Sắc ký lớp mỏng Sắc ký lớp mỏng Triplet Đỉnh ba TBA Thiobarbituric acid Acid thiobarbituric TCA Tricloroacetic acid Acid tricloroacetic TLTK Tài liệu tham khảo Tài liệu tham khảo TNF-ɑ Tumor necrosis factor Yếu tố hoại tử khối u UV Ultraviolet Tử ngoại VS Vanillin sulfuric Thuốc thử VS Xyl β-D-Xylopyranosyl β-D-Xylopyranosyl SEM SKLM t ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Các loài thuộc chi Polyscias Việt Nam Bảng 1.2 Thành phần triterpenoid saponin triterpenoid chi Polyscias Bảng 1.3 Các polyacetylen phân lập từ chi Polyscias 10 Bảng 1.4 Thành phần chất bay chi Polyscias 11 Bảng 1.5 Các flavonoid chi Polyscias .15 Bảng 1.6 Các hợp chất phenol phân lập từ chi Polyscias .16 Bảng 1.7 Các sterol phân lập từ chi Polyscias 18 Bảng 1.8 Các ceramid, cerebrosid hợp chất khác từ chi Polyscias .19 Bảng 1.9 Tổng hợp tác dụng sinh học loài P fruticosa 30 Bảng 1.10 Một số mơ hình in vivo gây tổn thương thận 36 Bảng 1.11 Một số mô hình in vivo gây tổn thương gan 38 Bảng 2.1 Danh mục mã hóa mẫu Đinh lăng 39 Bảng 2.2 Danh mục dung mơi, hóa chất sử dụng nghiên cứu 41 Bảng 2.3 Bố trí thử nghiệm tác dụng bảo vệ thận mẫu thử 52 Bảng 2.4 Bố trí thử nghiệm tác dụng bảo vệ gan mẫu thử 54 Bảng 3.1 Trình tự cặp mồi rbcL sử dụng phản ứng PCR .65 Bảng 3.2 Kết BLAST NCBI trình tự đoạn gen rbcL 68 Bảng 3.3 Ma trận khoảng cách di truyền 10 mẫu Đinh lăng .68 Bảng 3.4 Kết thử tinh khiết bột PFAG .69 Bảng 3.5 Kết phân tích sơ thành phần hóa thực vật PFAG 69 Bảng 3.6 Độ ẩm hiệu suất cao thu từ rễ PFAG 70 Bảng 3.7 Kết định tính hợp chất cao cao rễ PFAG 72 Bảng 3.8 Thể tích chất bay thu Đinh lăng theo kích thước 73 Bảng 3.9 Thành phần chất bay Đinh lăng tỉnh/thành phố .74 Bảng 3.10 Dữ liệu phổ 13C-NMR (δC, 125 MHz) hợp chất PF1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 1489 Bảng 3.11 Dữ liệu phổ 1H-NMR (δH, 500 MHz) hợp chất PF1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 14 90 Bảng 3.12 Dữ liệu phổ 13C-NMR (125 MHz) 1H-NMR (500 MHz) PF7, PF8 93 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com v Bảng 3.13 So sánh liệu phổ 13C-NMR (125 MHz) 1H-NMR (500 MHz) hợp chất PF10 kaempferol-3-O-rhamnosid 95 Bảng 3.14 So sánh liệu phổ 13C-NMR (100 MHz) 1H-NMR (400 MHz) hợp chất PF12 liquiritigenin 97 Bảng 3.15 So sánh liệu phổ 13C-NMR (100 MHz) 1H-NMR (400 MHz) hợp chất PF15 acid (E)-3,4-dihydroxycinnamic 98 Bảng 3.16 So sánh liệu phổ 1H-NMR (400 MHz) hợp chất PF16 (E)isoferulaldehyd 99 Bảng 3.17 So sánh liệu phổ 13C-NMR (100 MHz) 1H-NMR (400 MHz) hợp chất PF11 esculetin 101 Bảng 3.18 So sánh liệu phổ 13C-NMR (125 MHz) 1H-NMR (500 MHz) hợp chất PF13 6,15α-epoxy-1β, 4β-dihydroxyeudesman 103 Bảng 3.19 Tổng hợp hợp chất phân lập 103 Bảng 3.20 Kết khảo sát độc tính cấp đường uống cao chiết 108 Bảng 3.21 Liều thử nghiệm sinh học cao Đinh lăng 109 Bảng 3.22 Hàm lượng creatinin (mg/dl) lô thử 109 Bảng 3.23 Hàm lượng BUN (mg/dl) lô thử 111 Bảng 3.24 Hàm lượng MDA thận lô thử 112 Bảng 3.25 Phân tích mơ học thận chuột lơ 114 Bảng 3.26 Hàm lượng MDA gan chuột lô thử nghiệm 115 Bảng 3.27 Hàm lượng GSH gan chuột lô thử 116 Bảng 3.28 Phân tích mơ học gan chuột lơ thử nghiệm 118 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com vi DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Khung phần đường phổ biến saponin thuộc chi Polyscias Hình 1.2 Cấu trúc số chất bay chiếm hàm lượng cao chi Polyscias 14 Hình 1.3 Cây Đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) .26 Hình 3.1 Đặc điểm hình thái Đinh lăng .58 Hình 3.2 Cấu tạo giải phẫu rễ Đinh lăng 59 Hình 3.3 Vi phẫu thân Đinh lăng 60 Hình 3.4 Vi phẫu cuống Đinh lăng .61 Hình 3.5 Vi phẫu Đinh lăng 63 Hình 3.6 Bột rễ, thân Đinh lăng .63 Hình 3.7 Các cấu tử bột rễ Đinh lăng 63 Hình 3.8 Các cấu tử bột thân Đinh lăng 64 Hình 3.9 Các cấu tử bột Đinh lăng 64 Hình 3.10 Kết điện di ADN tổng số sản phẩm PCR 65 Hình 3.11 Kết trình tự nucleotid đoạn gen rbcL 66 Hình 3.12 Kết điện di ADN tổng số sản phẩm PCR 10 mẫu Đinh lăng 67 Hình 3.13 Biểu đồ hàm lượng chất bay mẫu Đinh lăng 73 Hình 3.14 Cấu trúc hóa học PF9 PF14 82 Hình 3.15 Các tương tác HMBC cấu trúc hóa học PF1 83 Hình 3.16 Các tương tác HMBC cấu trúc hóa học PF2 84 Hình 3.17 Các tương tác HMBC cấu trúc hóa học PF3 85 Hình 3.18 Các tương tác HMBC cấu trúc hóa học PF 86 Hình 3.19 Các tương tác HMBC cấu trúc hóa học PF5 87 Hình 3.20 Các tương tác HMBC cấu trúc hóa học PF6 89 Hình 3.21 Cấu trúc hóa học PF7 PF8 92 Hình 3.22 Các tương tác HMBC cấu trúc hóa học PF10 95 Hình 3.23 Các tương tác HMBC cấu trúc hóa học PF12 97 Hình 3.24 Cấu trúc hóa học PF15 PF16 99 Hình 3.25 Cấu trúc hợp chất PF11 100 Hình 3.26 Các tương tác HMBC cấu trúc PF13 102 Hình 3.27 Đại thể thận chuột lô thử 113 Hình 3.28 Đại thể gan chuột lô thử nghiệm 117 Hình 3.29 Vi thể mơ học gan chuột lô thử nghiệm (HE, 200) 119 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com vii DANH MỤC CÁC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1 Vị trí phân loại thực vật chi Polyscias theo Takhtajan A Sơ đồ 2.1 Sơ đồ chiết xuất chất bay Đinh lăng 48 Sơ đồ 2.2 Sơ đồ chiết xuất tách phân đoạn lỏng-lỏng 50 Sơ đồ 3.1 Sơ đồ chiết xuất thu cao phân đoạn từ PFAG 71 Sơ đồ 3.2 Sơ đồ chiết xuất thu cao phân đoạn từ rễ PFAG 72 Sơ đồ 3.3 Sơ đồ phân lập hợp chất PF7, 8, từ cao diethyl ether .76 Sơ đồ 3.4 Sơ đồ phân lập hợp chất PF10-16 từ cao Et2O 77 Sơ đồ 3.5 Sơ đồ phân lập hợp chất PF8 từ cao EtOAc 78 Sơ đồ 3.6 Sơ đồ phân lập hợp chất PF1, 2, 3, 4, 5, từ cao n-BuOH .80 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL99 13 (-) Cao n-BuOH rễ liều 0,18 g/kg 14 (+) Cao n-BuOH rễ liều 0,18 g/kg 15 (+) Cao n-BuOH rễ liều 0,09 g/kg ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL100 28 Phụ lục 28: Các tiêu trọng lượng, sinh hóa lô thử thử nghiệm gây tổn thương gan cyclophosphamid Chứng sinh Lý m (g) Stt MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 24 27 0,089 1,267 29,27 8065,16 21 23 0,079 1,519 25,85 9665,11 26 31 0,086 1,235 28,25 7861,99 24 26 0,086 1,664 28,25 10585,72 29 31 0,099 1,440 32,70 9163,54 23 24 0,064 1,467 20,71 9334,96 24 27 0,090 1,369 29,62 8712,76 24 25 0,101 1,124 33,38 7157,25 TB 24,38 26,75 0,087 1,386 28,50 8818,31 SEM 0,82 1,05 0,004 0,061 1,41 389,11 Chứng bệnh lý m (g) Stt MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 21 25 0,229 0,887 77,21 5652,53 28 32 0,280 0,855 94,67 5449,36 26 26 0,254 0,830 85,77 5290,64 25 27 0,170 1,068 57,01 6801,70 24 26 0,248 0,735 83,71 4687,48 25 31 0,225 0,867 75,84 5525,55 24 26 0,271 0,877 91,59 5589,04 25 23 0,193 0,955 64,88 6084,26 24,75 27,00 0,234 0,884 78,83 5635,07 0,70 0,013 0,034 4,57 216,64 TB SEM 1,07 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL101 CY+ Silymarin 100 mg/kg Stt m (g) MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 28 34 0,093 1,562 30,64 9938,12 21 22 0,108 1,387 35,78 8827,04 24 27 0,118 1,250 39,20 7957,22 27 31 0,103 1,235 34,07 7861,99 24 28 0,084 1,305 27,56 8306,42 28 32 0,098 1,359 32,36 8649,27 23 23 0,124 1,184 41,26 7538,19 25 22 0,082 1,369 26,88 8712,76 TB 25,00 27,38 0,101 1,331 33,47 8473,87 SEM 0,89 1,67 0,005 0,042 1,83 263,95 CY+ Cao toàn phần liều 0,415 g/kg Stt m (g) MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 24 25 0,151 1,046 50,50 6662,02 23 21 0,190 1,021 63,85 6503,30 27 27 0,132 1,299 44,00 8268,32 25 23 0,129 1,151 42,97 7328,67 23 24 0,184 1,035 61,80 6592,18 26 26 0,127 1,215 42,28 7735,01 20 19 0,156 0,938 52,21 5976,33 25 23 0,139 1,272 46,39 8096,90 24,13 23,50 0,151 1,122 50,50 7145,34 0,77 0,009 0,046 2,97 294,78 TB SEM 0,93 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL102 CY+ Cao toàn phần liều 0,83 g/kg m (g) Stt MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 27 29 0,129 1,174 42,97 7474,70 26 29 0,183 1,265 61,46 8052,46 25 28 0,203 0,912 68,31 5811,26 24 27 0,160 1,252 53,58 7969,92 22 23 0,162 1,053 54,27 6706,47 26 30 0,127 1,024 42,28 6522,35 26 30 0,201 1,135 67,62 7227,09 25 30 0,181 0,912 60,77 5811,26 TB 25,13 28,25 0,168 1,091 56,41 6946,94 SEM 0,55 0,84 0,010 0,049 3,55 311,77 CY+ Cao toàn phần rễ liều 0,44 g/kg Stt m (g) MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 23 21 0,110 1,190 36,46 7576,28 22 24 0,113 1,222 37,49 7779,45 24 25 0,195 0,984 65,57 6268,38 24 26 0,167 1,134 55,98 7220,74 27 25 0,185 1,114 62,14 7093,76 23 22 0,175 1,039 58,72 6617,58 24 27 0,179 1,374 60,09 8744,50 25 29 0,104 1,435 34,41 9131,79 24,00 24,88 0,154 1,187 51,36 7554,06 0,53 0,013 0,055 4,57 348,74 TB SEM 0,91 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL103 CY+ Cao toàn phần rễ liều 0,88 g/kg m (g) Stt MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 26 32 0,134 1,108 44,68 7055,66 25 26 0,125 1,317 41,60 8382,61 24 26 0,178 1,080 59,75 6877,89 25 28 0,159 1,307 53,24 8319,12 29 31 0,147 1,051 49,13 6693,77 27 29 0,158 1,068 52,90 6801,70 24 26 0,188 0,902 63,17 5747,76 26 32 0,144 0,974 48,11 6204,89 25,75 28,75 0,154 1,101 51,57 7010,43 0,59 0,008 0,052 2,57 327,39 TB SEM 0,94 CY+ Cao n-BuOH liều 0,135 g/kg Stt m (g) MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 25 28 0,089 1,186 29,27 7550,89 23 22 0,085 1,115 27,90 7100,11 24 26 0,126 1,215 41,94 7735,01 23 23 0,100 1,194 33,04 7601,68 24 25 0,139 1,304 46,39 8300,07 25 27 0,140 1,489 46,74 9474,64 23 25 0,101 1,277 33,38 8128,65 24 29 0,103 1,282 34,07 8160,39 23,88 25,63 0,110 1,258 36,59 8006,43 0,30 0,008 0,040 2,63 251,67 TB SEM 0,84 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL104 CY+ Cao n-BuOH rễ liều 0,18 g/kg m (g) Stt MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 27 31 0,181 0,960 60,77 6116,01 27 32 0,122 1,188 40,57 7563,58 26 28 0,132 1,248 44,00 7944,52 26 32 0,134 1,284 44,68 8173,09 25 27 0,160 1,349 53,58 8585,78 22 25 0,120 1,242 39,89 7906,43 25 27 0,190 0,977 63,85 6223,94 23 28 0,169 0,926 56,66 5900,14 25,13 28,75 0,151 1,147 50,50 7301,69 0,64 0,010 0,059 3,32 372,91 TB SEM 0,92 CY+ Cao n-BuOH rễ liều 0,09 g/kg m (g) Stt MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 23 20 0,132 1,121 44,00 7138,20 22 25 0,103 1,124 34,07 7157,25 24 26 0,090 1,278 29,62 8135,00 24 25 0,112 1,290 37,15 8211,18 23 24 0,095 1,295 31,33 8242,93 24 26 0,085 1,302 27,90 8287,37 25 24 0,104 1,281 34,41 8154,04 24 25 0,089 1,225 29,27 7798,50 23,63 24,38 0,101 1,240 33,47 7890,56 0,32 0,005 0,027 1,86 170,39 TB SEM 0,68 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL105 CY- Cao toàn phần liều 0,83 g/kg Stt m (g) MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 25 29 0,097 1,709 32,01 10871,42 27 31 0,098 1,610 32,36 10242,87 21 24 0,102 1,406 33,72 8947,67 23 27 0,092 1,351 30,30 8598,47 22 25 0,087 1,343 28,59 8547,68 28 31 0,082 1,174 26,88 7474,70 29 32 0,102 1,375 33,72 8750,85 24 27 0,107 1,330 35,44 8465,14 24,88 28,25 0,096 1,412 31,63 8987,35 1,03 0,003 0,060 1,01 380,06 TB SEM 1,05 CY- Cao toàn phần rễ liều 0,88 g/kg m (g) Stt MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 28 31 0,105 1,570 34,75 9988,91 28 32 0,096 1,625 31,67 10338,10 20 22 0,117 1,031 38,86 6566,79 26 27 0,106 1,160 35,09 7385,81 25 29 0,082 1,329 26,88 8458,80 27 31 0,109 1,199 36,12 7633,42 23 25 0,105 1,153 34,75 7341,37 24 29 0,089 1,425 29,27 9068,30 25,13 28,25 0,101 1,312 33,43 8347,69 0,97 0,004 0,075 1,38 478,22 TB SEM 1,21 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL106 CY-Cao n-BuOH liều 0,27 g/kg Stt m (g) MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 24 27 0,090 1,290 29,62 8211,82 29 32 0,082 1,588 26,88 10103,19 21 23 0,083 1,785 27,22 11353,95 20 24 0,108 1,168 35,78 7436,60 29 32 0,101 1,199 33,38 7633,42 25 27 0,086 1,501 28,25 9550,83 28 32 0,097 1,577 32,01 10033,35 27 29 0,099 1,178 32,70 7500,09 25,38 28,25 0,093 1,411 30,73 8977,91 1,24 0,003 0,082 1,14 522,84 TB SEM 1,28 CY- Cao n-BuOH rễ liều 0,18 g/kg m (g) Stt MDA GSH Hàm lượng MDA (nM/g protein) Hàm lượng GSH (nM/g protein) t1 t8 20 22 0,088 1,709 28,93 10871,42 29 31 0,109 1,201 36,12 7646,12 25 27 0,070 1,524 22,77 9696,85 26 28 0,094 1,376 30,99 8757,20 28 31 0,102 1,432 33,72 9112,74 26 29 0,112 1,376 37,15 8757,20 21 24 0,096 1,156 31,67 7360,42 29 31 0,097 1,324 32,01 8427,05 TB 25,50 27,88 0,096 1,387 31,67 8828,63 SEM 1,21 1,20 0,005 0,062 1,59 394,90 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL107 29 Phụ lục 29: Hình kết vi thể gan chuột lơ thử khảo sát hoạt tính bảo vệ gan in vivo cao Đinh lăng Chứng sinh lý Chứng bệnh lý ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL108 (+) Silymarin liều 0,1 g/kg (-) Cao toàn phần liều 0,83 g/kg (+) Cao toàn phần liều 0,83 g/kg (+) Cao toàn phần liều 0,415 g/kg ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL109 (-) Cao toàn phần rễ liều 0,88 g/kg (+) Cao toàn phần rễ liều 0,88 g/kg ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL110 (+) Cao toàn phần rễ liều 0,44 g/kg 10 (-) Cao n-BuOH liều 0,27 g/kg 11 (+) Cao n-BuOH liều 0,27 g/kg 12 (+) Cao n-BuOH liều 0,135 g/kg ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL111 13 (-) Cao n-BuOH rễ liều 0,18 g/kg 14 (+) Cao n-BuOH rễ liều 0,18 g/kg 15 (+) Cao n-BuOH rễ liều 0,09 g/kg ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL112 30 Phụ lục 30: Đường chuẩn MDA, GSH thử nghiệm khảo sát hoạt tính bảo vệ gan, thận in vivo Đường chuẩn MDA Nồng độ MDA (nM/ml) OD 0,3045 0,027 0,6090 0,053 1,5225 0,130 3,0450 0,237 6,0900 0,491 y = 0,0796x + 0,0035 R2 = 0,9992 Đường chuẩn GSH Nồng độ MDA (nM/ml) OD 15,625 0,060 31,250 0,139 62,500 0,271 125 0,526 250 1,079 500 2,249 y = 0,0043x - 0,0033 R2 = 0,9997 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com PL113 ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com ... (1 2) (1 3) (1 4) ho tro tai file : luanvanchat@gmail.com Hợp chất (1 5) (1 6) (1 7) (1 8) (1 9) (2 0) (2 1) (2 2) (2 3) (2 4) (2 5) (2 6) (2 7) (2 8) (2 9) (3 0) (3 1) (3 2) (3 3) (3 4) (3 5) (3 6) (3 7) (3 8) (3 9) (4 0). .. VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐỖ VĂN MÃI NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY ĐINH LĂNG (POLYSCIAS FRUTICOSA (L. ) HARMS) ` NGÀNH: DƯỢC HỌC... bệnh, bên cạnh tác dụng trội họ Nhân sâm bồi bổ, tăng lực tăng cường miễn dịch đề tài: "Nghiên cứu thành phần hóa học số tác dụng sinh học Đinh lăng (Polyscias fruticosa (L. ) Harms)" thực với mục