Quy trình nhân giống hoa lan bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào ứng dụng thực tiễn của phương pháp nuôi cấy mô tế bào

Quy trình nhân giống hoa lan phương pháp ni cấy mô tế bào ứng dụng thực tiễn phương pháp ni cấy mơ tế bào -Nhóm 2- Nội dung • Quy trình nhân giống hoa lan phương pháp ni cấy mơ tế bào • Ứng dụng thực tiễn phương pháp nuôi cấy mô tế bào A Phương pháp nuôi cấy mô: Định nghĩa: - Là phương pháp tổng hợp kỹ thuật sử dụng để ni cấy trì mơ tế bào điều kiện vô trùng - Biện pháp áp dụng môi trường giàu dinh dưỡng với thành phần xác định từ trước, “Lai tế bào” phương pháp phổ biến Cơ sở tế bào học: Tại lại chọn phương pháp nhân giống nuôi cấy mô với hoa lan? - Ngày nhiều gia đình ưa chuộng sử dụng lan trang trí cho gia đình Trong giống lan từ rừng tự nhiên không đủ cung cần bảo vệ => Do phương pháp vơ quan trọng, vừa giải vấn đề cung cấp giống vừa mang lại hiệu kinh tế cao Quy trình nhân giống Lan phương pháp ni cấy mơ tế bào Giai đoạn chọn mẫu Mẫu phải lấy từ mẹ đầu dòng tuyển chọn – Cách chọn mẫu quả: to, không bị sâu bệnh, vừa đến độ chín vào tháng 8-9 tốt – Cách chọn mẫu chồi: Mẫu nhỏ, ngắn tốt, song nhỏ đến mức cho phép (mẫu to khả nhiễm khuẩn lớn) Khử trùng mẫu – Cách khử trùng mẫu quả: + Cắt bỏ phần cuống sau rửa với nước cất 4-5 lần → rửa xà phòng→ rửa nước cất 4-5 lần→ rửa cồn 70o – Cách khử trùng mẫu chồi: + Cắt bỏ bớt phần rửa nước cất 4-5 lần→ rửa xà phòng→ rửa nước cất 4-5 lần→ rửa cồn 70o + Khử trùng tủ cấy – Khử trùng mẫu quả: Rửa lại với nước cất vô trùng 4-5 lần → ngâm HgCl2 10-12 phút → rửa nước cất vô trùng 4-5 lần + Gắp vào đĩa petri vô trùng, dùng dao cấy, panh cấy lấy hạt đưa vào môi trường nhân giống ban đầu – Khử trùng mẫu chồi: Rửa lại với nước cất vô trùng 4-5 lần → ngâm HgCl2 trong vòng 5-7 phút → rửa với nước cất vô trùng 4-5 lần→ gắp mầm đĩa petri vô trùng tách hết non → Khử lại HgCl2 trong vòng phút → rửa với nước cất vô trùng 4-5 lần→ đưa chồi vào môi trường nhân giống ban đầu 3 Nhân giống (nhân nhanh): Môi trường nhân giống: môi trường MS (Murashigeskoog,1962) có bổ sung chất điều hịa sinh trưởng với tỉ lệ phù hợp tùy lồi – Mơi trường vào mẫu hạt: MS + 100ml nước dừa + 20g đường + 50g khoai tây + 5,2g agar/1 lít Sau 6-8 tuần cấy chuyển sang môi trường nhân nhanh MS + 100ml nước dừa+ 1mg Kinitin + 20g đường + 5,2g agar/ lít Sau 8-12 tuần cấy chuyển sang mơi trường rễ – Môi trường vào mẫu chồi: Môi trường vào chồi ban đầu: MS + 100ml nước dừa + 10g đường + 1,5mg BA + 4,6g agar/1 lít, Sau 6-8 tuần chuyển sang môi trường nuôi cấy lát mỏng MS + 100ml nước dừa + 10g đường + 1mg Kinitin + 4,6g agar/1 lít Sau 6- tuần chuyển sang môi trường nhân nhanh MS + 100ml nước dừa + 1mg Kinitin + 20g đường + 5,2g agar/ 1lít Lưu ý: Nhiệt độ thích hợp để nhân giống địa lan 22 – 26°C, pH thích hợp 5,5 – 4 Tái sinh hoàn chỉnh in vitro: – Khi số giống đạt tiêu chuẩn cần thiết, cấy chuyển sang môi trường rễ (MS + 10g đường+ 0,3mg NAA + 1g than hoạt tính + 5,2g agar/1 lít) Chuyển vườn ươm: - Khi đạt tiêu chuẩn cao 5-7cm, 3-4 lá, có rễ thật dài 3-4c, tiến hành với giá thể dớn, dinh dưỡng N:P:K + vi lượng + Vi ta sau 3-4 tháng đưa vườn sản suất Video: Các phương pháp khác • Phương pháp nhân giống lan phương pháp ni cấy mơ (vi-intro) • Phương pháp cho người mới: B1 : Chọn giống lan B2 : Ra chai lan cấy mô B3: Rửa lan nước B4: Xử lí nấm cho B5 : Ngâm thuốc kích rễ cho B6 : Giữ ẩm cho làm quen với môi trường B7: Xử lý giá thể cho lan cấy mô B8: Trồng lan cấy mô vào chậu nhỏ B9: Đưa lan vườn ươm Ưu điểm nhược điểm phương pháp • Ưu điểm : - Nhân với số lượng lớn, tạo số lượng cá thể nhiều đồng loạt, thích hợp nhân giống nhà vườn lớn cho tỉ lệ giống đồng - Giống đồng phẩm chất, giúp trì nguồn gen quý Nhất với giống có đặc tính quý lan, pp giúp giữ mùi thơm, vẻ đẹp nhiều đặc tính tốt mẹ, đem lại giá trị khác mặt kinh tế cung độ quý - Hệ số nhân giống cao so với pp nhân giống khác - Cây tạo cá thể vô trùng, không lợ yếu tố nấm, sâu bệnh hại cây, có khả sinh trưởng mạnh - Rút ngắn trình chọn lọc số dịng, giống việc chọn tạo giống • Nhược điểm: - Số lượng không nhiều Đặc biệt với lan, thời gian sinh trưởng chậm nhân giống vườn lan thời gian - Tốn chi phí, cơng sức, thời gian nghiên cứu, địi hỏi trình độ kĩ thuật cao,sự xác, tỉ mỉ -> Nhìn chung sử dụng biện pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật giải pháp tối ưu lúc Giúp nhân y hệt mẹ, với số lượng lớn thời gian ngắn Ứng dụng thực tiễn phương pháp nuôi cấy mô tế bào Do nhu cầu thị trường khơng đủ,các lồi hoa lan bị khai thác ạt dẫn đến việc khan "cung khơng đủ cầu" Vì việc nhân giống hoa lan phương pháp nuôi cấy mô tế bào nhằm đáp ứng nhu cầu thị trường đồng thời mở hướng phát triển hứa hẹn cho công nghiệp buôn bán hoa lan Thành tựu: - Sau nhiều nghiên cứu ni cấy thành cơng số loài hồ điệp loài lan thuộc chi hoàng thảo Hiện, phịng thí nghiệm vườn ươm Viện nghiên cứu quốc gia Huế có lượng lớn giống giống huấn luyện 5-6 tháng.Hứa hẹn thành công mở đường phát triển thời gian gần - Cùng với thành tựu to lớn đạt sản xuất nơng nghiệp, ngành sản xuất hoa lan có bước tiến đáng kể Sự phát triển ngành trồng hoa cảnh nói chung hoa Lan nói riêng khơng làm đẹp hình ảnh Việt Nam mắt du khách đến với xứ sở nhiệt đới mà cịn ngành sản xuất cơng nghiệp đem lại hiệu kinh tế cao Ngày nay, sau gần 30 năm nghiên cứu phát triển, công nghệ nhân giống phương pháp nuôi cấy mô tế bào ứng dụng thành công, hầu hết tỉnh có phịng thí nghiệm invitro, đặc biệt có quy mô lớn thành phố lớn Hà Nội, Hồ Chí Minh,… Ví dụ: Tại Khu nơng nghiệp cơng nghệ cao TP.HCM (AHTP) có trung tâm hoạt động lĩnh vực ni cấy mơ, có quy mơ phịng nhân giống trang bị 18 tủ cấy, phịng sáng để chăm sóc cây, với cơng suất khoảng 12 triệu cây/năm, thực sưu tập 150 giống lan, chọn giống mà thị trường ưa chuộng Hàng năm, có khoảng 12,6 triệu lan giống nuôi cấy mô sản xuất ra, chiếm 79,1% tổng sản lượng giống nuôi cấy mơ tồn TP.HCM - Trung tâm cơng nghệ sinh học TP.HCM lai tạo thành công 50 tổ hợp lai giống lan nhập với lan nhập với lan rừng Việt Nam Trong đó, có 40 cá thể lai nhà khoa học đánh giá có triển vọng, có dòng lan bảo hộ dòng lan nộp đơn chờ bảo hộ Hết Thành viên nhóm 2: Nhóm trưởng: Nguyễn Quốc Anh Trần Minh Trang Nguyễn Trà My Bùi Hạnh Quyên Nguyễn Ngọc Long Vũ Khánh Vy Vương Cẩm Tú Trần Tuấn Minh (31) Nguyễn Trí Nghĩa 10 Hồ Ngân Giang 11 Trương Minh Đức 12 Đoàn Phương Thảo (21) 13 Đỗ Quang Huy ... • Quy trình nhân giống hoa lan phương pháp ni cấy mơ tế bào • Ứng dụng thực tiễn phương pháp nuôi cấy mô tế bào A Phương pháp nuôi cấy mô: Định nghĩa: - Là phương pháp tổng hợp kỹ thuật sử dụng. .. suất Video: Các phương pháp khác • Phương pháp nhân giống lan phương pháp nuôi cấy mô (vi-intro) • Phương pháp cho người mới: B1 : Chọn giống lan B2 : Ra chai lan cấy mô B3: Rửa lan nước B4: Xử... -> Nhìn chung sử dụng biện pháp ni cấy mơ tế bào thực vật giải pháp tối ưu lúc Giúp nhân y hệt mẹ, với số lượng lớn thời gian ngắn Ứng dụng thực tiễn phương pháp nuôi cấy mô tế bào Do nhu cầu