NHÂN GIỐNG IN VITRO GIỐNG CHUỐI ORITO (m acuminata AA)

NHÂN GIỐNG IN VITRO GIỐNG CHUỐI ORITO (M.acuminata AA) GVHD: Võ Thanh Phúc Thực hiện: Nhóm DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN Nguyễn Bá Anh 1810807 Nguyễn Việt Tú Anh 1912604 Đoàn Nhựt Băng 1912699 Phạm Thị Hạnh Dung 1912868 NỘI DUNG TRÌNH BÀY I Cơ sở lý thuyết II Giới thiệu đối tượng nghiên cứu III Vật liệu - phương pháp nghiên cứu IV.Kết - Thảo luận V Kết luận VI.Tài liệu tham khảo Phương pháp nhân giống truyền thống Có hiệu nhân giống thấp, ngồi chất lượng chuối bị giảm sút nhiễm vi rút, dẫn đến nguy thối hóa giống Vi nhân giống Nhân giống nhanh với số lượng lớn, tỷ lệ sống cao, sinh trưởng phát triển tốt, đồng đều, thời gian thu hoạch rút ngắn - Thu kết tốt cho nhân giống lớn Musaceae - Ở Musa spp , tác dụng có lợi cytokinin hình thành chồi nách chồi - Rất hình thành có sẵn việc nhân giống ống nghiệm chuối Orito cách sử dụng toàn thân 🡪 Mục tiêu nghiên cứu thiết lập protocorm để nhân giống ống nghiệm giống chuối Orito (M.acuminata AA) Vật liệu phương pháp Nguyên liệu thực vật Những thân chuối Orito (Musa acuminata AA) từ trang trại “Cruz” La Mana, Cotopaxi, Ecuador Môi trường nuôi cấy MS, với g/L bactoagar làm chất tạo gel + 20 g/L saccharose Chỉnh pH = 5.7 NaOH sau khử trùng 121ºC 15 phút Các giai đoạn nhân giống in vitro 1st Khử trùng vô trùng tạo chồi 2n d Môi trường nuôi cấy nhân giống 3rd Tạo rễ thích nghi ex vitro Khử trùng vô trùng tạo chồi Thân Orito Làm Nước cất vô trùng: Lần lắng 0,1% Tween 80 20% chlorine Chuyển mẫu sang Tween 80 + 20% tủ cấy > lần lắng chlorine + HgCl2 10 mL/L ascorbic acid Đưa vào môi + 50 mg/L L-Cysteine trường MS bán rắn Môi trường nuôi cấy nhân giống Mục tiêu: đánh giá loại chất điều hòa sinh trưởng với nồng độ khác để cải thiện tỷ lệ nhân giống in vitro chuối Orito Chồi phase Môi trường nhân giống MS BAP + IAA Phân đoạn ánh sáng trắng huỳnh quang liên tục 30 g/L saccharose (37 μmol/m s) nhiệt Đặt MS lỏng g/L than hoạt tính đÝ ộ 25 °tạC tưở±ng: o giai đoạn làm mát điều hòa để chồi tăng sức sống trước đưa đến giai đoạn rễ 3 Tạo rễ thích nghi ex vitro Vitroplants Đặt khay nảy mầm với cát đường hầm nhựa Che phủ Tưới cát (hạt từ 0,063 – mm), khơng có chất điều hịa sinh trưởng thực vật tần suất phút liên tục tuần Thiết kế thử nghiệm phân tích thống kê Hồn tồn ngẫu nhiên Xét nghiệm thức Lặp lại lần lần KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 01 Hình thành chồi chuối Orito vơ trùng 02 Giai đoạn nhân giống 03 Giai đoạn thích nghi tạo rễ Hình thành chồi chuối Orito vơ trùng Tỷ lệ (%) Nghiệm Giai đoạn Tạo dòng* Nhân giống* Ra rễ thích nghi* thức Mẫu nhiễm T1 T2 T3   T1 T2 T3 18.75 a 0a 6.25 a Mẫu nhiễm 1.25 a 1.31 a 1.31 a   Chiều cao Chiều dài (cm) rễ (cm) Giá thể cát 11.40 6.28 Mẫu khơng Sống sót bị nâu hóa 93.75 a 75.00 b 100.00 a 100.00 a 100.00 a 93.74 a Mẫu cấy khơng bị nâu hóa 8.5 7a 8.04 ab 6.69 b Tỷ lệ sống Số rễ/cây Số lá/cây sót (%) 7.00 4.83 100 Bảng 2: Ảnh hưởng phương thức nuôi cấy (ứng với nghiệm thức) đến giai đoạn nhân giống chuối cau Obito (Musa acuminata AA) Giai đoạn nhân giống - Bổ sung cytokinin auxin giúp hình thành chồi nách, trung bình 1.25 ÷ 1.31 chồi - Về chiều dài chồi, nghiệm thức tốt T1, nồng độ cytokinin (BAP) tăng lên, chiều dài chồi giảm ⇒ chứng ảnh hưởng có lợi cytokinin hình thành chồi nách chồi trồng ống nghiệm - Không phát diện vi sinh vật gây nhiễm 3 Giai đoạn thích nghi tạo rễ Điều kiện nhà kính/phịng thí nghiệm, sử dụng khay nảy mầm cát làm chất mà khơng cần bổ sung chất điều hịa sinh trưởng thực vật KẾT LUẬN Tạo chồi vô trùng Chuối Orito (Musa acuminata AA) Nhân giống Tác dụng của: BAP cộng với IAA tất nghiệm thức Tạo rễ thích nghi ex vitro Dùng khay nảy mầm với cát Tỷ lệ sống sót 100% Sau hai tháng sẵn sàng để trồng RESOURCES https://www.researchgate.net/publication/316881922_In_vit ro_propagation_of_the_Orito_banana_cultivar_Musa_acu minata_AA http://tapchikhcnln.vnuf.edu.vn/documents/5898355/75144 505/2.TV.%20BuiT.ThuHuong6p.pdf?fbclid=IwAR2es1eEd KYiNl87yh4OsQe7mZ48b8IoebDXWMnfeqppgugJ7mY1U Cj7ITM THANK YOU Mời cô bạn nhận xét, đặt câu hỏi ... cứu thiết lập protocorm để nhân giống ống nghiệm giống chuối Orito (M. acuminata AA) Vật liệu phương pháp Nguyên liệu thực vật Những thân chuối Orito (Musa acuminata AA) từ trang trại “Cruz” La... thức nuôi cấy (ứng với nghiệm thức) đến giai đoạn nhân giống chuối cau Obito (Musa acuminata AA) Giai đoạn nhân giống - Bổ sung cytokinin auxin giúp hình thành chồi nách, trung bình 1.25 ÷ 1.31... pháp nhân giống truyền thống Có hiệu nhân giống thấp, chất lượng chuối bị giảm sút nhiễm vi rút, dẫn đến nguy thối hóa giống Vi nhân giống Nhân giống nhanh với số lượng lớn, tỷ lệ sống cao, sinh