(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)

(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu khả năng ức chế tế bào ung thư vú (MCF7) của cao chiết cây ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)

BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Bùi Văn Thiện NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƢ VÚ (MCF-7) CỦA CAO CHIẾT CÂY NGẢI TRẮNG (Curcuma aromatica Salisb) LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – 2021 BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Bùi Văn Thiện NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƢ VÚ (MCF-7) CỦA CAO CHIẾT CÂY NGẢI TRẮNG (Curcuma aromatica Salisb) Chuyên ngành : Sinh học thực nghiệm Mã số : 8420114 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC TS Bùi Đình Thạch Thành phố Hồ Chí Minh – 2021 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài luận văn thạc sĩ: “Nghiên cứu khả ức chế tế bào ung thư vú (MCF-7) cao chiết ngải trắng (Curcuma aromatica Salisb)” thực dƣới hƣớng dẫn TS Bùi Đình Thạch Các kết nghiên cứu, số liệu, thông tin luận văn đƣợc thu thập, xử lý xây dựng cách trung thực, không chép, đạo văn Tôi xin chịu hồn tồn trách nhiệm thơng tin, số liệu, liệu nội dung luận văn Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2021 Ngƣời cam đoan Bùi Văn Thiện ii LỜI CẢM ƠN Trƣớc tiên, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến TS Bùi Đình Thạch, ngƣời tận tình giúp đỡ, động viên, hƣớng dẫn định hƣớng cho q trình học tập nghiên cứu để hồn thành luận văn Thạc sĩ Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Sinh học nhiệt đới, thầy cô giảng viên Học Viện Khoa học Công nghệ thuộc Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện, thuận lợi nhƣ dẫn tận tình giúp tơi hồn thành khóa học Tôi xin chân thành cảm ơn đến tất bạn bè anh chị phụ trách thuộc Viện Sinh học nhiệt đới, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam bên cạnh động viên vƣợt qua khó khăn học tập làm việc Và cuối cùng, tơi xin dành tình cảm trân trọng thân thƣơng đến bố, mẹ, anh, chị, vợ thành viên gia đình bên cạnh động viên giúp giúp vƣợt qua khó khăn học tập, nghiên cứu làm việc Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2020 Học viên Bùi Văn Thiện iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT FACS : Fluorescence-activated cell sorting DMSO : Dimethyl sulfoxit DPPH : 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazy EtOH : Ethanol FACS : Fluorescence-activated cell sorting FBS : Fetal Bovine Serum HPLC : High Performance Liquid Chromatography Max : Giá trị cao Min : Giá trị thấp OD : Optical Density Pen/Strep : Penicillin/Streptomycin PI : Propidium iodide SE : Sai số chuẩn TB : Trung bình TLK : Trọng lƣợng khơ iv DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1: Thành phần hoá học (>5%) Curcuma aromatica (Anoop, 2015) 10 Bảng 2.2: Mồi xuôi mồi ngược sử dụng phản ứng Real time PCR 30 Bảng 3.1: Hàm lượng nước củ Ngải trắng 32 Bảng 3.2: Hàm lượng tro khoáng củ Ngải trắng 33 Bảng 3.3: Ảnh hưởng nhiệt độ ly trích lên hàm lượng hoạt chất ly trích từ củ Ngải trắng 34 Bảng 3.4: Ảnh hưởng thời gian ly trích lên hàm lượng curcumol ly trích từ củ Ngải trắng 36 Bảng 3.5: Ảnh hưởng dung mơi ly trích lên hàm lượng curcumol phenolic ly trích từ củ Ngải trắng 37 Bảng 3.6: Hiệu suất thu hồi cao chiết hàm lượng phenolic tổng số cao chiết củ Ngải trắng 39 Bảng 3.7: Hàm lượng curcumol tổng số cao chiết củ Ngải trắng 40 Bảng 3.8: Hoạt tính nhặt gốc tự DPPH cao chiết từ củ Ngải trắng ascorbic acid 42 v DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1: Củ phần mặt đất Curcuma aromatica (Sikta cs., 2018) Hình 1.2: Cấu trúc nguồn tự nhiên curcumol (Wei, 2019) 12 Hình 3.1: Kết HPLC mẫu cao chiết củ Ngải trắng 40 Hình 3.2: Ảnh hưởng cao chiết Ngải trắng curcumol lên tăng sinh tế bào MCF-7 phương pháp WST-1 sau 24h, 48h 72h 44 Hình 3.3: H nh ảnh tế -7 nhuộm Ho chst 33342 ưới tác động củ c o chiết gải trắng 46 Hình 3.4: Ảnh hưởng cao chiết Ngải trắng lên apoptosis tế bào MCF-7 cytometry flow 47 Hình 3.5: Tỉ lệ tế bào MCF-7 vào tr nh poptosis s u xử lý với cao chiết Ngải trắng 24h, 48h 72h a, b, c: khác biệt có ý nghĩ thống kê, p < 0,05.) 48 Hình 3.6: Ảnh hưởng cao chiết Ngải trắng lên biểu Bcl-2 tế bào MCF-7 a, b, c: Khác biệt có ý nghĩ thống kê với p < 0,05 49 Hình 3.7: Ảnh hưởng cao chiết Ngải trắng lên biểu Bax tế bào MCF-7 Khơng có khác biệt có ý nghĩ thống kê với p > 0,05 50 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iii DANH MỤC BẢNG BIỂU iv DANH MỤC HÌNH ẢNH v MỤC LỤC TÓM TẮT MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY NGẢI TRẮNG 1.1.1 Phân loại thực vật 1.1.2 Đặc điểm thực vật học 1.1.3 Thành phần hoá học 1.1.4 Tác dụng dƣợc lí Ngải trắng 13 1.2 SƠ LƢỢC VỀ UNG THƢ VÚ 16 1.2.1 Dịch tễ học 16 1.2.2 Yếu tố nguy gây ung thƣ vú 17 1.2.3 Các phƣơng pháp điều trị ung thƣ vú 18 CHƢƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 20 2.2 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 20 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.3.1 Hoàn thiện quy trình ly trích thu nhận cao chiết từ củ Ngải trắng 20 2.3.2 Xác định hàm lƣợng hoạt chất cao chiết: phenolic, curcumol 24 2.3.3 Xác định hoạt tính kháng oxy hố cao chiết 25 2.3.4 Xác định hoạt tính apoptosis cao chiết mơ hình tế bào ung thƣ vú 26 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 HỒN THIỆN QUY TRÌNH LY TRÍCH THU NHẬN CAO CHIẾT TỪ CỦ CÂY NGẢI TRẮNG 32 3.1.1 Xác định hàm lƣợng nƣớc 32 3.1.2 Xác định hàm lƣợng khoáng 33 3.1.3 Khảo sát nhiệt độ ly trích 34 3.1.4 Khảo sát thời gian ly trích 35 3.1.5 Khảo sát dung mơi ly trích 37 3.2 XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG HOẠT CHẤT TRONG CAO CHIẾT 38 3.2.1 Xác định hàm lƣợng Phenolic cao chiết 38 3.2.2 Xác định hàm lƣợng Curcumol cao chiết 40 3.3 XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG OXI HÓA CỦA CAO CHIẾT NGẢI TRẮNG 41 3.4 XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH APOPTOSIS CỦA CAO CHIẾT NGẢI TRẮNG TRÊN MƠ HÌNH TẾ BÀO UNG THƢ VÚ 44 3.4.1 Kiểm tra độc tính tế bào 44 3.4.2 Đánh giá phân mảnh tế bào 45 3.4.3 Xác định khả ức chế tế bào ung thu vú (MCF-7) thông qua biểu gen bax bcl-2 48 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 52 4.1 KẾT LUẬN 52 4.2 KIẾN NGHỊ 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 PHỤ LỤC 69 ... ? ?Nghiên cứu khả ức chế tế bào ung thƣ vú (MCF-7) cao chiết Ngải Trắng (Curcuma aromatica Salisb)? ?? đƣợc đề xuất thực Mục tiêu nghiên cứu Đánh giá đƣợc khả ức chế tế bào ung thƣ vú MCF-7) cao chiết. .. - Bùi Văn Thiện NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƢ VÚ (MCF-7) CỦA CAO CHIẾT CÂY NGẢI TRẮNG (Curcuma aromatica Salisb) Chuyên ngành : Sinh học thực nghiệm Mã số : 8420114 LUẬN VĂN THẠC SĨ... apoptosis cao chiết mơ hình tế bào ung thƣ vú A Kiểm tra độc tế bào Kiểm tra độc tế bào cao chiết Ngải trắng dòng tế bào MCF-7  Phƣơng pháp giải đông nuôi cấy tăng sinh tế bào Các dịng tế bào đƣợc cung