Nghie n cu u mo t so da c die m sinh ho

TẠP CHÍ SINH HỌC 2014, 36(1se): 158-164 NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA CHỦNG NẤM HƯƠNG LAI TỪ NÚI LANGBIANG, LÂM ĐỒNG VÀ CHỦNG THƯƠNG MẠI NHẬT BẢN Phạm Nữ Kim Hồng1, Trương Bình Ngun1*, Lê Xn Thám2, Phan Hữu Hùng1, Hoàng Ngọc Ánh1, Đỗ Thị Thiên Lý1 Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam, *nguyentb@tni.ac.vn Sở Khoa học Cơng nghệ tỉnh Lâm Đồng TĨM TẮT: Nấm hương (Lentinula edodes) loại nấm ưa chuộng, để ni trồng thành cơng cần có chủng giống tốt, suất cao, nguồn dinh dưỡng khả thích ứng với mơi trường Chủng nấm hương Len 003-009 lai từ chủng thương mại Nhật Bản (Len 009) chủng hoang dã (Langbiang, Lâm Đồng) (Len 003) Kết nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ, pH nguồn dinh dưỡng lên sinh trưởng chủng lai so với bố mẹ cho thấy, chủng lai phát triển với tốc độ nhanh tương đương với chủng thương mại gấp đôi chủng hoang dã thể số đặc tính tốt bố mẹ Chủng lai phát triển tối ưu khoảng nhiệt độ 24-27oC, đường glucose 20g/l đạm peptone 1g/l, tương tự phát triển chủng thương mại Trong đó, chúng bố mẹ phát triển tối ưu mức pH khác (pH=5 Len 009 pH=6 Len 003), lai phát triển tối ưu hai giá trị pH này, thể khả tổ hợp số ưu điểm từ chủng bố mẹ Nghiên cứu cho thấy ba chủng nấm khơng có nhu cầu đạm cao nấm men Trong thí nghiệm này, chưa xác định đặc điểm thừa hưởng tổ hợp lai từ chủng bố mẹ Từ khóa: Lentinula edodes, cao nấm men, chủng lai, Lâm Đồng MỞ ĐẦU trồng nấm hương [5] Nấm hương (Lentinula edodes) loại nấm ăn có nguồn gốc từ châu Á Thái Bình Dương, ni trồng sử dụng rộng rãi giới Theo Chen (2005) [1], loài nấm giàu vitamin (A, B D), khoáng chất (P, K Fe), amino acid thiết yếu (cystin, histidin, arginin, glutamic acid), đặc biệt có chứa lentinan-một loại β-glucan có khả điều hịa miễn dịch, kháng ung thư kháng tác động virus Theo Yoshida et al (1968) [7], nuôi trồng nấm, đặc biệt nuôi trồng nấm hương, nguồn dinh dưỡng yếu tố mơi trường đóng vai trò quan trọng ảnh hưởng trực tiếp đến trình phát triển hệ sợi hình thành thể nấm Hệ sợi nấm hương phát triển tốt nhiều nguồn carbon khác nhau, từ monosacchride polysaccharide, tốt đường glucose Trong peptone amino acid xem nguồn nitơ tốt cho phát triển hệ sợi nitrate nitrite lại khơng thích hợp Ngồi ra, pH nhiệt độ hai yếu tố mơi trường có ảnh hưởng lớn đến hoạt tính enzyme nên ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển hệ sợi hình thành thể nấm hương [1] Ở Nhật Bản, Hàn Quốc Trung Quốc, nấm hương nuôi trồng qui mô lớn đem lại hiệu kinh tế cao Ở Việt Nam nói chung, tỉnh Lâm Đồng nói riêng, đến chưa có sở sản xuất qui mô loại nấm có nhiều chuyên gia đưa chủng giống chất lượng cao từ nước ngồi ni trồng Khi tiến hành nuôi trồng, đặc điểm nhiệt độ thể, hình dạng, kích thước thể, nhiệt độ thích hợp cho phát triển hệ sợi, khơng giống với giống nấm hương khác Như vậy, giống nấm chất lượng tốt, suất cao có khả thích ứng cao với điều kiện tự nhiên chỗ yếu tố quan trọng định thành công nuôi 158 Năm 2008, thu thập chủng nấm hương hoang dã thuộc lồi Lentinula edodes, dịng Đơng Bắc Á thuộc chi Lentinula, họ Marasmiaceae, Agaricales (ký hiệu Len 003) Một số nghiên cứu cho thấy chủng nấm có tính chất ưu việt sử dụng cho việc ni trồng phát triển điều kiện nuôi trồng nhân tạo, thời gian phát triển hệ sợi tương đối ngắn, khả Pham Nu Kim Hoang et al hình thành mầm nấm cao [2] Ngồi ra, thời gian qua, chúng tơi sưu tập lưu giữ giống nấm hương có chủng thương mại nhập nội từ Nhật Bản (ký hiệu Len 009), chưa khảo sát, đánh giá điều kiện nuôi trồng Đà Lạt Nhằm tạo chủng vừa có nguồn gốc địa, thích nghi tốt với mơi trường vừa cho suất, chất lượng cao, thực lai tạo chủng nấm hoang dã thu thập địa phương với chủng thương mại nhập nội từ Nhật Bản theo phương pháp di-mon mating Miles (1996) [3] Theo đó, chúng tơi ni trồng thu thể nhằm tách bào tử sợi song nhân hai chủng nghiên cứu Bào tử sợi song nhân chủng Len 003 tiếp tục cấy vào đĩa petri khác quan sát kính hiển vi nhằm tìm hệ sợi đơn bào tử Cấy dòng đơn nhân Len 003 với dòng song nhân Len 009 đĩa petri Khi hệ sợi hai chủng tiếp xúc với nhau, đỉnh sợi đơn nhân phía ngược lại sợi song nhân xuất mấu liên kết, q trình song nhân hóa xảy Trong nghiên cứu này, đánh giá số đặc điểm sinh học hóa sinh chủng nấm hương lai (Len 003-009) từ chủng địa (Len 003) với chủng thương mại Nhật Bản (Len 009) VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Chủng nấm hương hoang dã Len 003 thu rừng rộng núi Langbiang, Lâm Đồng Chủng Len 009 thương mại hóa nguồn gốc Nhật Bản Chủng lai Len 003-009 kết lại tạo theo phương pháp di-mon mating Len 003 Len 009 Các chủng nuôi cấy ống nghiệm thạch nghiêng môi trường PGA (200g khoai tây, 20g glucose 15g agar 1l mơi trường), giữ 4oC Phịng Cơng nghệ Vi sinh, Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên Khi tiến hành thí nghiệm, ba chủng nấm Len 003, Len 009 Len 003-009 ủ tủ ấm nhiệt độ 25oC ba ngày, sau cấy vào đĩa petri chứa môi trường PGA, nuôi nhiệt độ phòng (18±2oC) Khi hệ sợi ba chủng phát triển kín mặt đĩa, dùng khn inox trịn, rỗng (ø = mm) vơ trùng cắt hệ sợi chủng theo vòng tròn đồng tâm thành mẫu nhỏ chứa sợi nấm Năm mẫu nấm chủng sử dụng cho công thức ni cấy nhiệt độ phịng Sau cấy 48 (qui ước giờ), đo đường kính hệ sợi đĩa đo 24 tiếng 144 Hai đường thẳng qua tâm mẫu nấm chọn nhằm thu giá trị trung bình đường kính hệ sợi Tốc độ phát triển hệ sợi tính theo Schwantes & Salttler (1971) [4]: V = ΔX/ΔT Trong đó, V tốc độ mọc hệ sợi (µm/giờ); ΔX bán kính hệ sợi phát triển từ đến 144 (µm); ΔT thời gian hệ sợi phát triển tương ứng (giờ) Ảnh hưởng nhiệt độ pH môi trường lên phát triển hệ sợi với ngưỡng nhiệt độ 18, 21, 24, 27, 30, 33oC; ngưỡng pH 4, 5, 6, Cả hai thí nghiệm, mẫu nấm cấy vào đĩa petri chứa môi trường PGA pH điều chỉnh dung dịch NaOH 1M HCl 1M máy đo pH để bàn Hanna Nghiên cứu ảnh hưởng glucose lên phát triển hệ sợi thực môi trường PGA (thành phần khoai tây agar không đổi) có nồng độ glucose sáu mức 10, 15, 20, 25, 30 35g/l Nghiên cứu ảnh hưởng peptone cao nấm men lên phát triển hệ sợi thực mơi trường PGA có bổ sung pepton cao nấm men nồng độ 1, 2, 3, 4, g/l (đối chứng môi trường PGA) Việc lập bảng biểu, tính tốn thơng số thực Microsoft Excel 2007, độ tin cậy 95%; hàm Descriptive Statistics, ANOVA KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Ảnh hưởng nhiệt độ lên phát triển hệ sợi Theo Chen (2005) [1], nấm hương có khả thích nghi để phát triển giải nhiệt độ rộng từ 5-32oC, nhiên nhiệt độ tối ưu cho phát triển hệ sợi khoảng 24-26oC Tốc độ phát triển hệ sợi chủng nghiên cứu mức nhiệt độ khác thể bảng hình 7a Kết cho thấy, ba chủng nấm phát triển điều kiện nhiệt độ môi trường 30oC Ở nhiệt độ 33oC, Len 009 hóa đen sau cấy, tiếp đến Len 003159 TẠP CHÍ SINH HỌC 2014, 36(1se): 158-164 009 Len 003 sau 144 tất mẫu cấy ba chủng không phát triển (hình 2) Đối với Len 003, hệ sợi phát triển tối ưu mức 24oC, hệ sợi chủng Len 009 003009 phát triển thích hợp hai ngưỡng 24oC (lần lượt 194,66 201,25 µm/giờ) 27oC (lần lượt 195,96 202,47 µm/giờ) Như phát triển ba chủng có chủng hoang dã chưa hóa khơng khác nhận xét Chen (2005) [1] dải nhiệt độ nấm hương Bảng Tốc độ (µm/giờ) phát triển hệ sợi chủng nấm hương ngưỡng nhiệt độ Nhiệt độ nuôi cấy (oC) Chủng 18 21 24 27 30 Len 003 72,16±1,45 67,49±3,50 107,81±2,63 87,15±4,05 21,62±1,32 Len 009 172,89±4,71 173,26±3,50 194,66±2,39 195,96±4,83 126,56±1,88 Len 003-009 186,13±2,59 185,02±2,37 201,25±3,30 202,47±3,52 139,15±3,96 33 0 Hình Hệ sợi nấm ni cấy 33oC Hình Hệ sợi nấm sau 144 24oC a Len 003; b Len 009; c Len 003-009 a Len 003; b Len 009; c Len 003-009 So sánh phát triển ba chủng cho thấy, chủng hoang dã Len 003 phát triển yếu Len 003-009 cao nuôi cấy sáu mức nhiệt độ Cụ thể, 24oC, hệ sợi Len 009 Len 003-009 có tốc độ phát triển 194,66 201,25 µm/giờ, cao hẳn Len 003 (107,81 µm/giờ) Chủng Len 003-009 lai lại có tốc độ phát triển nhanh hai chủng bố mẹ Len 003 009 Giải thích cho trường hợp này, Tokimoto & Kawai (1998) [6] cho số phương pháp chọn tạo giống nấm hương, phương pháp lai bắt cặp dịng đơn nhân đa nhân (di-mon mating) giúp loại bỏ đột biến có hại, tạo nên tổ hợp lai có tốc độ sinh trưởng mạnh chủng bố mẹ nên mức pH tối ưu cho hệ sợi nấm phát triển thường 4,5-5,5 [1] Bảng 2, hình 7b cho thấy ảnh hưởng pH môi trường lên phát triển chủng nấm hương Kết cho thấy, ba chủng nấm hương nghiên cứu có chủng hoang dã lai từ chủng hoang dã thích hợp với mơi trường acid nhẹ Hệ sợi Len 003-009 bố mẹ, phát triển mơi trường có pH thay đổi từ đến mức pH=5, tốc độ trung bình hệ sợi chủng lai cao (191 µm/giờ) với phát triển Len 009 Ngoài ra, tốc độ phát triển cao cịn tìm thấy pH=6; mức pH mà hệ sợi bố mẹ Len 003 phát triển mạnh so sánh năm mức (82,89 µm/giờ) Nghĩa lai có phát triển cao hai mức pH (một tương tự bố, tương tự mẹ) Như vậy, đánh giá ảnh hưởng pH lên phát triển hệ sợi, lai thể đặc điểm tương tự bố mẹ, nói cách khác, lai tổ hợp số ưu điểm từ bố mẹ Ảnh hưởng pH môi trường lên phát triển hệ sợi Nấm hương phát triển dải pH rộng (3-7) không đa số loại nấm khác, loại nấm ưa môi trường acid nhẹ 160 Pham Nu Kim Hoang et al Bảng Tốc độ (µm/giờ) phát triển hệ sợi ba chủng nấm hương ngưỡng pH pH môi trường nuôi cấy Chủng Len 003 72,48±1,84 79,43±0,61 82,89±0,61 73,78±1,23 Len 009 178,53±2,79 191,55±2,65 183,45±1,00 182,87±1,00 Len 003-009 177,50±1,98 191,25±1,13 190,42±2,35 183,75±0,73 72,05±1,23 177,37±2,65 180,42±1,45 Hình Hệ sợi nấm mơi trường pH=5 sau 144 Hình Hệ sợi nấm mơi trường có nồng độ glucose tối ưu sau 144 a Len 003; b Len 009; c Len 003-009 a Len 003; b Len 009; c Len 003-009 Ảnh hưởng glucose lên phát triển hệ sợi Kết cho thấy lai Len 003-009 có tốc độ phát triển cao nhất, cao bố mẹ sáu nồng độ glucose: cao 20 g/l (204,31 µm/giờ) thấp 35 g/l (176,90 µm/giờ) Nhu cầu mức glucose chủng lai tương tự chủng bố mẹ Len 009 khác với chủng hoang dã Len 003 Ở Len 009, hệ sợi phát triển cao nồng độ 20 g/l (195,44 µm/giờ) Len 003 cần nguồn glucose từ 30-35 g/l phát triển tối đa (73,56 µm/giờ) (bảng hình 7c) Mặc dù nhu cầu nồng độ glucose lai len 003-009 tương tự Len 009, mặt hình thái, quan sát mắt thường, hệ sợi chủng lai có đặc điểm tương tự Len 003, cụ thể hệ sợi mọc tương đối dày, chằng chịt, khuynh hướng hình thành nhiều hệ sợi khơng khí tạo nên khuẩn lạc có màu trắng bơng, Len 009 có hệ sợi mỏng, vươn xa theo bề mặt mơi trường, tạo hệ sợi khơng khí (hình 4) Tốc độ phát triển hệ sợi Len 003-009 xấp xỉ chủng bố mẹ thương mại cao hẳn chủng hoang dã cho thấy lai thừa hưởng đặc tính tốt từ bố, mẹ, hai Bảng Ảnh hưởng Glucose lên tốc độ phát triển hệ sợi (µm/giờ) Chủng Len 003 Len 009 Len 003009 Nồng độ glucose (g/l) 10 65,08±2,98 185,80±1,13 15 67,83±1,78 191,74±1,02 20 68,92±0,99 195,44±1,16 25 69,97±2,26 185,80±1,41 30 73,56±2,51 174,69±2,35 35 71,35±2,97 164,08±1,53 187,83±1,51 198,25±1,50 204,31±2,06 188,45±1,58 183,16±1,45 176,90±1,41 Ảnh hưởng peptone lên phát triển hệ sợi Nitơ nguồn dinh dưỡng khơng thể thiếu q trình tổng hợp ngun sinh chất xây dựng cấu trúc nấm hương Quá nhiều hay nitơ ảnh hưởng đến phát triển hệ sợi thể nấm Nghiên cứu Chen (2005) [1] cho tỷ lệ C/N chất thích hợp cho q trình phát triển hệ sợi nấm hương nên 161 TẠP CHÍ SINH HỌC 2014, 36(1se): 158-164 dao động khoảng 17/1 đến 40/1 Ảnh hưởng nguồn đạm peptone lên phát triển hệ sợi bảng 4, hình 7d Theo tốc độ phát triển cao lai Len 003-009 ni cấy mơi trường PGA có bổ sung g/l peptone, đạt 203,68 µm/giờ cao so với đối chứng (198,68 µm/giờ) So sánh nồng độ lại với đối chứng cho thấy, bổ sung vào môi trường g peptone, phát triển hệ sợi giảm xuống đáng kể Nhu cầu đạm peptone chủng lai tương tự chủng bố mẹ Len 009 (hệ sợi phát triển cao có 1g peptone lít mơi trường PGA) khác biệt rõ ràng so với chủng bố mẹ Len 003 Quá trình phát triển hệ sợi chủng hoang dã Len 003 cần bổ sung lượng đạm cao gấp đôi chủng để phát triển đến mức cao (từ 74,06 µm/giờ bổ sung g peptone đến 79,15 µm/giờ bổ sung g peptone) Nồng độ peptone tăng cao làm giảm tốc độ phát triển ba chủng Bảng Ảnh hưởng peptone lên tốc độ phát triển hệ sợi (µm/giờ) Chủng Len 003 Len 009 Len 003009 Nồng độ Pepton (g/l) Đối chứng 71,10±0,93 196,74±2,27 74,06±1,47 202,74±2,53 79,15±1,03 122,72±3,48 69,22±1,06 103,59±3,91 62,15±2,92 99,48±2,26 60,07±5,47 92,36±1,32 198,68±2,77 203,68±2,42 121,92±2,58 102,99±3,52 98,68±1,47 93,24±1,41 Hình Hệ sợi nấm mơi trường có nồng độ peptone tối ưu sau 144 Hình Hệ sợi nấm mơi trường PGA a Len 003; b Len 009; c Len 003-009 sau 144 a Len 003; b Len 009; c Len 003-009 Ảnh hưởng cao nấm men lên phát triển hệ sợi Bảng 5, hình 7e cho thấy, chủng lai Len 003-009 bố mẹ khơng thích hợp phát triển mơi trường có nguồn đạm từ cao nấm men Sự phát triển hệ sợi chủng ni cấy mơi trường có bổ sung cao nấm men từ g thấp nuôi cấy môi trường đối chứng (PGA) Nguồn cao nấm men cao ức chế sinh trưởng ba chủng Đặc biệt, tốc độ phát triển chủng lai Len 003-009 môi trường có cao nấm men thấp nhiều ni cấy mơi trường khơng có nguồn đạm Cụ thể, phát triển hệ sợi giảm từ 198,68 xuống cịn 78,13 µm/giờ bổ sung vào mơi trường 1g cao nấm men Hệ sợi tiếp tục giảm theo chiều tăng lượng đạm nấm men bổ sung vào môi trường nuôi cấy Kết cho thấy ba chủng nghiên cứu khơng có nhu cầu đạm cao nấm men Việc xác định tổ hợp lai có hay khơng thừa hưởng đặc tính bố mẹ dựa khảo sát chưa thể kết luận 162 Pham Nu Kim Hoang et al Bảng Ảnh hưởng cao nấm men lên tốc độ phát triển hệ sợi (µm/giờ) Nồng độ Cao nấm men (g/l) Chủng Đối chứng 71,10±0,93 59,59±3,77 46,49±3,42 41,86±2,49 28,47±0,95 Len 003 Len 009 196,74±2,27 188,90±2,18 164,41±3,88 136,46±2,56 121,30±4,26 Len 003198,68±2,77 78,13±3,01 65,04±2,84 60,43±1,61 57,74±1,71 009 17,88±1,32 74,48±0,73 49,06±2,44 Hình Ảnh hưởng nhiệt độ (a), pH (b), glucose (c), peptone (d) cao nấm men (e) lên phát triển hệ sợi ba chủng nấm hương KẾT LUẬN Phương pháp lai bắt cặp dòng đơn nhân đa nhân loại bỏ đột biến có hại bố mẹ, tạo nên lai có tốc độ sinh trưởng nhanh hay chủng bố mẹ Con lai có tốc độ phát triển cao thí nghiệm ảnh hưởng nhiệt độ glucose (lần lượt 202,47 204,31 µm/giờ); phát triển tương tự chủng thương mại thí nghiệm pH (191 µm/giờ), pepton (203 µm/giờ) cao nấm men (196-198 µm/giờ) Trong chủng hoang dã phát triển với tốc độ thấp tất thí nghiệm Chủng lai phát triển tối ưu khoảng 2427oC (201-202 µm/giờ), pH=5-6, nồng độ glucose peptone 20g/l (204,31 µm/giờ) g/l (203,68 µm/giờ) Ở 24oC mức phát triển tối ưu chủng hoang dã, 27oC mức tối ưu chủng thương mại Tương tự, lai phát triển cao hai mức pH, mức tương tự Len 009 (pH=5), tương tự Len 003 (pH=6) Khi bổ 163 TẠP CHÍ SINH HỌC 2014, 36(1se): 158-164 sung đạm cao nấm men, tốc độ phát triển lai lẫn bố mẹ chậm hẳn so với không bổ sung TÀI LIỆU THAM KHẢO Chen A W., 2005 What is Shiitake In: Free from Poverty - Mushroom Growers' Handbook - Shiitake Cultivation Mush World, Seoul, Korea, pp 1-11 Lê Hoàng Phương Lê, Đỗ Thị Thiên Lý, Lê Huyền Ái Thúy, Trương Bình Nguyên, 2010 Nghiên cứu số đặc điểm sinh học chủng nấm hương Lentinula edodes hoang dã, phát núi Langbian, Đà Lạt Tạp chí Cơng nghệ sinh học, 8(3B): 1397-1404 Miles P G., 1996 Genetics and Breeding of Mushrooms - from Bensaude and Kniep to Molecular Genetics In: Royse D J (ed.) Mushroom Biology and Mushroom Products, Pennsylvania, USA pp 11-23 Schwantes H O., Salttler P W., 1971 Methoden zur Messung der Wachstumsgeschwindigkeit von Pilzmycelien Oberhess Naturwiss Zeitschr., 38: 5-18 Tanaka A., Miyazaki K., Murakami H., Shiraishi S., 2004 Sequence characterized amplified region markers tighly linked to the mating factors of Lentinula edodes Genome, 47(1): 156-162 Tokimoto K., Kawai A., 1998 Effect of the physical properties of Lentinula edodes bedlogs on fruiting body production Mycoscience, 39: 217-219 Yoshida T., Taguchi H., Teramoto S., 1968 Studies on submerged culture of Basidiomycetes V On sugar metabolism of Shiitake (Lentinus edodes) J Ferment Technol., 46: 125-131 A STUDY ON BIOLOGICAL CHARACTERISTICS OF HYBRID OF Lentinula edodes FROM A WILDSTRAIN (LANGBIANG MOUNTAIN, LAM DONG) AND A COMMERCIAL ONE (JAPAN) Pham Nu Kim Hoang1, Truong Binh Nguyen1, Le Xuan Tham2, Phan Huu Hung1, Hoang Ngoc Anh1, Do Thi Thien Ly1 Tay Nguyen Institute for Scientific Research, VAST Lam Dong Department of Science and Technology SUMMARY Lentinula edodes is a favorable edible mushroom in the world Its successful cultivation requires not only good and high yield strains but also the appropriate nutrient sources and environmental conditions A hybrid strain (Len 003-009) is the result of the mating between a commercial strain (Japan) (Len 009) and a wild one (Langbiang mountain, Lam Dong) (Len 003) Studying some biological characteristics of the hybrid showed that its growth rate was similar to or quicker than that of the commercial strain and about twice as rapid as that of the wild one The hybrid also represented some heredity characteristics from its parents In addition, the optimal growth of the hybrid and the commercial strain were similar with the temperature from 24 to 27 degree Celsius, the concentration of glucose and peptone being 20 g/l and g/l, respectively Moreover, its parents could only optimally grow at the different levels of pH (pH=5 in Len 009 and pH=6 in Len 003), while the hybrid could that in both mentioned levels Again, this showed good characteristics of hybrid got from its parents All strains did not have any demand for yeast extract during their growth and development Thus, it could not evaluate whether there was any inheritance from its parents or not from this experiment Keywords: Lentinula edodes, yeast extract, hybrid strains, Lam Dong Ngày nhận bài: 15-7-2013 164 ... (JAPAN) Pham Nu Kim Hoang1, Truong Binh Nguyen1, Le Xuan Tham2, Phan Huu Hung1, Hoang Ngoc Anh1, Do Thi Thien Ly1 Tay Nguyen Institute for Scientific Research, VAST Lam Dong Department of Science... sung cao n? ? ?m men t? ?? g thấp nuôi c? ??y m? ?i trường đối chứng (PGA) Ngu? ?n cao n? ? ?m men cao ? ?c chế sinh trưởng ba chủng Đ? ?c bi? ?t, t? ? ?c độ ph? ?t tri? ?n chủng lai Len 003-009 m? ?i trường c? ? cao n? ? ?m men thấp... Ảnh hưởng peptone l? ?n ph? ?t tri? ?n hệ sợi Nitơ ngu? ?n dinh dưỡng khơng thể thi? ?u q trình t? ??ng hợp ngun sinh ch? ?t xây dựng c? ? ?u tr? ?c n? ? ?m hương Quá nhi? ?u hay nitơ ảnh hưởng đ? ?n ph? ?t tri? ?n hệ sợi thể