Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 3 doc
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 3 doc
... kế trên cơ sở các trình tự của
RAPD markers.
50
3 -
5 -3
).
Nguyên tắc của PCR được trình bày trong hình 3. 2 và 3. 3. T
DNA polymerase (gọi tắt là Taq pol) bắt đ
tổng hợp (synthetic oligonucleotide) ... 95
o
C /30 giây, 50
o
72
o
C/1 phút
- 72
o
C/10 phút
- 4
o
C
- Chạy điện di để h 3. 7)
- -2 0
o
C
- đ ư
bằng thực tham khảo.
- và
Taq pol, s...
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 1 ppsx
... nucleotide):
Công nghệ DNA tái tổ hợp
8
XbaI /37
o
C
EcoRI /37
o
C
10 mM.
-
1 L ( - - .
-
hai một .
-
sẽ
.
- -2 0
o
C (hoặc -8 0
o
C
(ice bath).
II. Các enzyme trùng hợp
1. DNA polymerase ...
- Ứng dụng chính
+ 5’ pN
OH
5’ P
3 OH
5’ P
Mg
2+
enzyme
5’ P
3 OH
5’ P
3 OH
3 OH
enzyme
3 P
+ 2P
i
3 P
5’
5’
3 OH
3 OH
5’...
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 2 potx
... nóng chảy nó.
- -
t - -
- -
.
Công nghệ DNA tái tổ hợp
42
- -tube (eppendorf tube)
.
- 1-2 th
(0,5 M ammonium acetate, 10 mM magnesium acetate, 1
-tube.
- 37
o
(< - -
.
... Công nghệ DNA tái tổ hợp
29
4
o
C đến 30
o
.
thường được dùng
Tr - - - - - -
-
. Các đoạn DNA sẽ dị...
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 4 pot
...
2. Tạo dòng trong bacteriophage M 13
-
.
-
tru
:
- E. coli
-
galactosidase (Z -
) gen -
-
-thiogalactoside (IPTG)
-gal.
-
-
- -
Công nghệ DNA tái tổ hợp
97
...
- (ori)
.
- -
khởi đầu
.
- (promoter) để tiến hành
lai.
-
.
- chỉ thị thể tái tổ
hợp.
như là:
- được
.
- tách
g...
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 5 pps
... C
LAI
chèn
32
P
để làm mẫu dò
E
E
-
Eco
RI
- chèn
-
- -
quang
-
Cố định DNA
trên màng lai
-
- Trung hòa
-
-
Eco
RI
-
Công nghệ DNA tái tổ hợp
104
1 5-2 3 kb), cosmid ... quan tâm (mẫu dò).
,
thường .
32
5.2).
(smear) trên gel
(Hình 5 .3) .
( 2-1 0
.
-
Hind -
Southern blot.
Công nghệ...
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 6 pps
...
(complementary DNA)
tổng hợp cDNA do
.
. Q
cDNA qua ba enzyme
reverse transcriptase. (2) Biến tính và c -cDNA
Công nghệ DNA tái tổ hợp
1 53
hóa
0,5
.
- Vector gt10.
E. coli
.
- Vector ... như sau:
- chi loại bỏ
chi.
- Sac Xba
Xba
500 bp trong DNA của bacteriophage
lac
các vector gt19.
2 .3. Vector gt22 và gt 23
chi 3
Công nghệ...
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 7 pptx
...
trong phức
hợp kháng
nguyên-
kháng thể
bắt màu với
cơ chất
Đĩa ELISA (microtiter plate) có 96 giếng
Công nghệ DNA tái tổ hợp
166
:
- 16S rRNA.
-
eukaryote định vị.
- .
1 (Hình ... thể được kiểm soát
bằng những thay đổi trong hoạt tính của β-galactosidase.
Công nghệ DNA tái tổ hợp
155
Chương 7
gen tái tổ hợp trong
Escherichia...
Giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp
... chiết DNA từ những sinh vật khác nhau; 2)
Cắt và nối DNA ở những điểm đặc hiệu để tạo ra DNA tái tổ hợp (DNA mang các gen có
nguồn gốc khác nhau), ví dụ: DNA plasmid có mang gen của người; 3) ... bằng do sự hợp nhất của các dNTP ở đầu 3 .
+ Tổng hợp sợi thứ hai của cDNA trong tạo dòng cDNA.
+ Tổng hợp DNA sợi đôi từ các khuôn mẫu sợi đơn trong phát sinh đột biến i...
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Phụ lục ppt
... viện cDNA (cDNA library).
DNA khuôn mẫu (template DNA) .
(sao chép) hoặc khuếch đại DNA (PCR)
.
DNA polymerase. mẫu
.
Công nghệ DNA tái tổ hợp
184
(palindrome). Đoạn DNA mạch kép có
trình ... Southern blot )
Công nghệ DNA tái tổ hợp
180
) phương pháp
như …
, gen công nghệ DNA
ta thích hợp hơn, có thể
bằng công nghệ sinh học
trước...
Cong nghe DNA tai to hop
... gen xác định.
Bên cạnh các giáo trình như: sinh học phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ
chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp sẽ giúp sinh viên tiếp cận ... đạ
i
- 2 primer (F và R)
- Taq pol
- 4 loại dNTP
- Đệm và các muối khoáng
Công ngh. DNA tái t. h.p 36
đầu 3 .
+ Tổng hợp sợi thứ hai của...