Chỳng tụi tiến hành đỏnh giỏ phương phỏp định lượng AZTR trong chế phẩm bằng quột đồng bộ phổ huỳnh quang vừa xõy dựng ở trờn với cỏc tiờu chớ sau:
- Khoảng tuyến tớnh của phương phỏp - Độ đỳng của phương phỏp
- Độ chớnh xỏc của phương phỏp
3.2.1.Khoảng tuyến tớnh.
Tiến hành khảo sỏt sự phụ thuộc tuyến tớnh giữa nồng độ với cường độ huỳnh quang của dẫn xuất AZTR trong HCl 9M trong khoảng nồng độ từ 5mg/L đến 20mg/L.
Cỏc dung dịch chuẩn: Trong bỡnh định mức 25mL cho lần lượt 1mL nước, thể tớch dung dịch AZTR chuẩn 100mg/Lcần thiết để đạt nồng độ mong muốn, 19mL dung dịch HCl đậm đặc. Lắc nhẹ cỏc dung dịch để đồng nhất,
thờm nước đến vạch và để tạo dẫn xuất ở nhiệt độ phũng thớ nghiệm 21-230
C trong 30 phỳt.
Mẫu trắng:Tiến hành tương tự trong cựng điều kiện với mẫu chuẩn.Thay thể tớch dung dịch AZTR chuẩn bằng thể tớch MeOH tương ứng.
Tiến hành quột đồng bộ phổ huỳnh quang cỏc dung dịch chuẩn trong khoảng bước súng 300 - 600nm, tốc độ quột 600nm/phỳt , độ phõn giải 1nm , độ rộng khe sỏng là 5nm, với =30nm.
Kết quả khảo sỏt khoảng tuyến tớnh được trỡnh bày ở bảng 3.5 Bảng 3.5: Kết quả khảo sỏt độ tuyến tớnh
Nồng độ dung dịch AZTR (mg/L) Thể tớch dung dịch chuẩn AZTR 10mg/L cần lấy (mL)
Cường độ huỳnh quang (a.u)
5,0 1,25 222,42 7,0 1,75 267,18 9,0 2,25 311,64 10,0 2,50 337,81 11,0 2,75 358,58 13,0 3,25 402,89 15,0 3,75 447,98 17,0 4,25 493,64 19,0 4,75 538,58 20,0 5,00 561,20
Kết quả: Phương trỡnh hồi quy: y=22.58x +109.6 R2=0.999, R= 0.9995
Hỡnh 3.15.Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tớnh giữa nồng độ và cường độ
huỳnh quang của dung dịch AZTR trong HCl 9M.
Nhận xột: Kết quả trỡnh bày ở bảng 3.5 và hỡnh 3.15 cho thấy trong khoảng nồng độ đó khảo sỏt, cường độ huỳnh quang thu được tỷ lệ thuận với nồng độ của chỳng, sự phụ thuộc thể hiện qua đường thẳng hồi quy và hệ số tương quan R= 0.9995
Như vậy phương phỏp đó xõy dựng tuyến tớnh chặt chẽ trong khoảng nồng độ khảo sỏt từ 5 mg/L - 20 mg/L.