CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
3.5.2. Hoạt tính sinh học
Kết quả thử hoạt tính các chất được thể hiện trong bảng 3.7 dưới đây.
Bảng 3.7. So sánh kết quả của Va-d với SAHA và một số chất
Tên KLPT
Tác dụng ức chế HDAC*
Tác dụng kháng tế bào ung thư SW6201 IC50 (g/mL)2 IC50 (µM) Va 33 + 0,09 0,29 Vb 354 + 0,099 0,2 Vc 427 + 0,107 0,25 Vd 352 + 0,22 0,65 7a 3 4 + 0,269 0,70 7f 427 + 0,307 0,72 7g 362 + 4,170 11,52 SAHA 264 + 0.976 3,70 Ghi chú: *
Hoạt tính của enzym bị ức chế hoàn toàn khi thử tại 10g/mL bằng phương pháp Western Blot.
1
Dòng tế bào SW620: dòng tế bào ung thư đại tràng.
2
Nồng độ (µg/mL hoặc µM) làm ức chế 50% sự phát triển của tế bào. Các kết quả được lấy trung bình qua 3 lần thử nghiệm với độ sai lệch không quá 10%.
Về tác dụng ức chế HDAC, bảng trên cho thấy tất cả các chất này đều có tác dụng ức chế hoàn toàn HDAC ở nồng độ 10 µg mL. Tuy nhiên để có thể gây ra độc tính với tế bào, các chất phải có khả năng thấm qua màng sinh học và tiếp cận được với HDAC. Do đó chúng tôi tiếp tục hành thử độc tính tế bào in vitro.
Thử nghiệm trên dòng tế bào ung thư đại tràng SW620, hoạt tính sinh học của các chất đều gấp từ 5-15 lần SAHA (giá trị IC50 của Va-d từ 0,25 µM đến 0,65 µM so với 3,70 µM), trong đó chất cho tác dụng tốt nhất là Vc (IC50
= 0,25 µM) có khả năng kháng lại loại tế bào ung thư này với hoạt tính gấp gần 15 lần so với SAHA. Điều này cho thấy việc sử dụng khung 5-aryl-1,3,4- thiadiazol mà cụ thể là việc sử dụng dị vòng (furan, thiophen) cho kết quả rất khả quan.
Thậm chí, so với kết quả thử hoạt tính của một số hợp chất mang khung 5-phenyl-1,3,4-thiadiazol mà nhóm nghiên cứu tại bộ môn Hóa Dược trường Đại học Dược Hà Nội đã công bố trước đây (các chất 7a, 7f, 7g), có thể thấy các chất này cho hoạt tính sinh học mạnh hơn hẳn. Hai chất Va và Vb sử dụng vòng furan và thiophen thay vì vòng phenyl trong 7a đều cho hoạt tính gấp hơn 2 lần. Tương tự, hoạt tính của Vc cao hơn 7f và Vd cao hơn 7g.
Ngoài ra cũng có thể thấy chất Vb (sử dụng vòng thiophen) cho hoạt tính với IC50 = 0,28 µM tốt hơn Va (sử dụng vòng furan) có IC50 = 0,29 µM. Và trên cùng vòng furan, nhóm thế -CH3 cho hợp chất Vd có IC50 = 0,65 µM gấp hơn 2,5 lần Vc sử dụng nhóm thế -Br (IC50 = 0,25 µM). Có thể giải thích điều nay là do nhóm thế methyl đã làm cho mặt phẳng vòng furan xoay đi nhiều so với vòng thiadiazol và không phù hợp với trung tâm hoạt động của HDAC.
Từ những kết quả thu được, có thể khẳng định các acid hydroxamic có khung 5-aryl-1,3,4-thiadiazol với cầu nối 6C như đã trình bày ở trên phù hợp để đem lại hoạt tính ức chế HDAC cũng như kháng tế bào ung thư.
Thêm vào đó, các chất mới tổng hợp được không chỉ có hoạt tính sinh học cao mà còn thỏa mãn các yêu cầu của quy tắc Lipinsky, điều này mở ra triển vọng cho việc nghiên cứu lâm sàng và cận lâm sàng của các chất sau này. Tóm lại, khung 5-aryl-1,3,4-thiadiazol có nhiều triển vọng thay thế vòng phenyl của SAHA nhằm tìm ra các thuốc ức chế HDAC mới.