Phân loại xạ khuẩn theo ISP

Một phần của tài liệu Nghiên cứu kháng sinh do streptomyces 183 216 tổng hợp nên (Trang 28)

- Xác định đặc điểm hình thái và sắc tố hòa tan:

+ Môi trường xác định: từ ISP1 đến ISP5 đã được tiệt trùng, đổ vào hộp Petri, mỗi MT làm 4 đĩa. Cấy zigzac bào tử Streptomyces 183.216 lên bề mặt thạch, ủ ở 28-29˚C. Tiến hành quan sát sau khi nuôi cấy 7, 14, 21 ngày.

+ Màu của khuẩn ty khi sinh: Quan sát trực tiếp trên bề mặt khuẩn lạc, có thể có màu đỏ (R), màu vàng (Y), xanh lá cây (G), xanh da trời (B), tím (V), xám (Gy), trắng (W). Trường hợp có các màu xen kẽ thì ghi các màu liền nhau.

+ Màu của khuẩn ty cơ chất: Quan sát mặt sau của khuẩn lạc (mặt dưới của đĩa Petri), thường có các màu vàng nâu, vàng nâu ánh đỏ, da cam, vàng nâu ánh xanh da trời, vàng nâu lẫn xanh lá cây, tím. Nếu thấy các màu trên thì ký hiệu là (1), nếu không thấy thì ký hiệu là (0).

+ Chuỗi bào tử và bề mặt bào tử được quan sát dưới kính hiển vi điện tử có độ phóng đại cao.

Dạng chuỗi bào tử: thẳng (R), uốn cong (RF), móc câu (RA), lò xo (S), nếu chuỗi bào tử có đầy đủ các đặc điểm thì ghi đầy đủ các đặc điểm (ví dụ: SRA: chuỗi lò xo móc câu).

Bề mặt bào tử có các dạng đặc điểm sau đây: phẳng nhẵn (sm), sần sùi mụn cơm (wa), có gai (sp), có tóc (ha).

+ Sắc tố hòa tan nằm ngay trong môi trường, có các màu vàng, xanh, đỏ, tím. Nếu có màu ký hiệu là (1), không có màu ký hiệu là (0).

- Xác định sắc tố melanoid: nuôi cấy xạ khuẩn trên môi trường ISP6, ISP7 đã hấp tiệt trùng, ủ ở 28-29˚C, quan sát ở ngày thứ 2, thứ 4. Nếu có màu đen hoặc nâu đen ký hiệu là (1), không có ký hiệu (0).

- Khả năng tiêu thụ nguồn carbon:

Nuôi cấy bào tử trên các MT có chứa các nguồn đường khác nhau (các ISP9), đánh giá ở ngày thứ 12, 14, 16.

Nếu bào tử phát triển manh hơn hoặc bằng khi nuôi cấy trên môi trường ISP9 chứa đường glucose (chứng dương), thì kí hiệu là (+). Nếu bào tử không phát triển mạnh bằng khi nuôi cấy trên môi trường ISP không có đường (chứng âm), thì ký hiệu là (-). Nếu không phát triển rõ ràng, mạnh hơn chứng âm và kém hơn chứng dương ký hiệu là (±).

Một phần của tài liệu Nghiên cứu kháng sinh do streptomyces 183 216 tổng hợp nên (Trang 28)