3.1.1.1. Tổng hợp N-acetyl-L-tyrosin:
Sơ đồ phản ứng:
Cách tiến hành: Cho vào bình cầu hai cổ: 18,00 g (0,1mol) L-tyrosin, 32,0 ml H2O, 50,0 ml NaOH 2M (0,1 mol), khuấy đều. Làm lạnh bình cầu bằng nước đá xuống 5o
C. Nhỏ từ từ vào hỗn hợp 8 lần, mỗi lần 30,0 ml NaOH 2M (0,06 mol) và 3,0 ml (0,032 mol) anhydrid acetic. Giữ nhiệt độ 5oC trong suốt phản ứng và chú ý NaOH 2M luôn cho trước trong quá trình nhỏ. Tiếp tục khuấy ở nhiệt độ phòng thêm 30 phút để loại anhydrid dư. Điều chỉnh dung dịch trong bình tới pH=2 với H2SO4 6N sau đó để lạnh qua đêm, L-tyrosin dư sẽ kết tủa. Lọc bỏ tủa, cất quay đến kiệt phần dịch lọc thu được chất rắn màu trắng. Thêm 150,0 ml ethanol để hòa tan N-acetyl-L-tyrosin, lọc bỏ phần muối vô cơ không tan. Cất chân không đến kiệt dịch lọc sau đó cất thêm tới khi hết acid acetic thu được chất bán rắn màu vàng nhạt. Thêm 20,0ml H2O, để lạnh từ từ sản phẩm nhanh chóng kết tinh, lọc, rửa bằng HCl 1N 2 lần, rồi rửa bằng nước, sấy khô thu được chất kết tinh màu trắng.
Kết quả:
- Khối lượng sản phẩm 17,35g, hiệu suất 78,21%.
- Kết tinh lại trong methanol thu được tinh thể không màu hình kim, nhiệt độ nóng chảy 148,7oC-150,5oC (152-153oC theo tài liệu [17]).
- Sắc ký lớp mỏng cho một vết Rf = 0,58 (dicloromethan: methanol= 9: 1), không hiện màu với ninhydrin.
3.1.1.2. Tổng hợp N-acetyl-L-tyrosin ethyl ester: Sơ đồ phản ứng:
Chuẩn bị một bình cầu hai cổ 250 ml. Thêm 9,2 ml ethanol (0,16 mol), làm lạnh bên ngoài bằng nước đá xuống khoảng 5oC. Nhỏ vào từ từ 4,7 ml (0,06mol) SOCl2 và đun hồi lưu trong 1 giờ để loại khí HCl sinh ra. Thêm vào bình phản ứng 11,15 g (0,05 mol) N-acetyl-L-tyrosin đã hòa tan trong 25 ml ethanol (0,43 mol). Tiếp tục đun hồi lưu trong 3 giờ thì phản ứng kết thúc. Cất quay đến kiệt dịch phản ứng thu được chất bán rắn màu vàng nhạt. Thêm 10,0 ml ethanol 30o, làm lạnh từ từ sản phẩm nhanh chóng kết tinh. Lọc, sấy tủa thu được chất rắn kết tinh màu trắng.
Kết quả:
Khối lượng sản phẩm: 9,5 g. Hiệu suất phản ứng: 75,64%
Nhiệt độ nóng chảy: 126,3 - 127,8oC
Sắc ký cho một vết Rf= 0,57 (hệ diclomethan: methanol=9:1).