Trong quá trình sinh trưởng, các enzym được hình thành trong tế bào và một số được tiết ra môi trường xung quanh. Trong sản xuất enzym từ xạ khuẩn chủ yếu là thu nhận các enzym ngoại bào. Không phải tất cả các VSV
đều có khả năng sinh enzym như nhau và ngay cả những chủng trong cùng một lồi cũng khơng có hoạt tính như nhau. Vì vậy, khi tuyển chọn chủng giống phải tiến hành phân lập, kiểm tra và lựa chọn các chủng có hoạt tính enzym mạnh, sinh nhiều enzym mong muốn theo từng mục đích.
Để tuyển chọn các chủng có hoạt tính enzym cao, trước hết, chúng tôi tiến hành kiểm tra sơ bộ hoạt tính enzym của các chủng. Qua kết quả kiểm tra sơ bộ, chúng tôi đã chọn ra 5 chủng có hoạt tính mạnh nhất để tiếp tục sàng lọc bước 2. Các chủng này được kí hiệu lần lượt là: TC13.1, TC15.4, TC16.4, TC12.10, TC19.9. Kết quả kiểm tra hoạt tính enzym của 5 chủng xạ khuẩn được thể hiện trên bảng 3.8.
Bảng 3.8. Hoạt tính enzym của 5 chủng xạ khuẩn lựa chọn Kí hiệu
chủng
Hoạt tính enzym (D - d, mm)
Amylaza CMC-aza Proteaza
TC13.1 8,1 ± 0,17 9,9 ± 0,23 + TC15.4 + 10,5 ± 0,29 10,1 ± 0,20 TC16.4 9,0 ± 0,12 12,1 ± 0,23 + TC12.10 6,1 ± 0,40 8,0 ± 0,28 7,3 ± 0,15 TC19.9 14,5 ±0,29 18,1 ± 0,23 19,0 ± 0,17 Chú thích: (+): Hoạt tính yếu
Tiếp theo, 5 chủng XK này được nuôi lắc trên môi trường dịch thể Gause 1 là một trong các mơi trường lên men thích hợp cho XK. Sau 4 - 5 ngày thu dịch lên men và tiến hành kiểm tra hoạt tính enzym bằng phương pháp khuếch tán trên đĩa thạch. Kết quả được trình bày trong bảng 3.9.
Bảng 3.9. Hoạt tính enzym của dịch lên men 5 chủng XK đã lựa chọn Kí hiệu
chủng
Hoạt tính enzym (D - d, mm)
Amylaza CMC-aza Proteaza
TC13.1 + 8,2 ± 0,21 11,2 ± 0,17 TC15.4 + 12,1 ± 0,20 10,3 ±0,17 TC16.4 11,5 ± 0.29 14,8 ± 0,21 13,4 ± 0,23 TC12.10 12,7 ± 0.17 14,6 ± 0,35 12,1 ± 0,23 TC19.9 12,6 ± 0.23 17,4 ± 0,35 17,2 ±0,17 Chú thích: (+): Hoạt tính yếu
Hình 3.6. Hoạt tính enzym của dịch lên men 5 chủng XK đã lựa chọn
Từ kết quả trên 2 bảng 3.8 và 3.9 cho thấy 5 chủng xạ khuẩn đều vẫn giữ được hoạt tính enzym khi chuyển từ mơi trường thạch sang mơi trường dịch thể, khả năng phân giải 3 nguồn cơ chất của 5 chủng xạ khuẩn tương đối ổn định. Chủng TC19.9 có hoạt tính enzym mạnh nhất, tiếp theo là chủng TC16.4, TC12.10, 2 chủng TC13.1 và TC15.4 chỉ có hoạt tính CMC-aza và proteaza, cịn hoạt tính amylaza rất yếu (hình 3.6). Căn cứ từ kết quả trên, chúng tôi đã lựa chọn chủng TC19.9 để tiếp tục nghiên cứu khả năng chịu nhiệt của enzym.