Trong dịch tiết đường sinh dục của lợn cả trong điều kiện sinh lý và bệnh lý luôn có hệ vi sinh vật cư trú. Số lượng và chủng loại các loài vi khuẩn không ổn định mà thường xuyên thay đổi theo mức độ vệ sinh, theo mùa và theo từng cá thể khác nhau.
Theo Đoàn Thị Kim Dung và cs (2002) [5] cho biết: viêm tử cung, âm đạo ở lợn chủ yếu do tụ cầu vàng (Staphylococcus aureus), liên cầu dung huyết
(Streptococcus hemolitica) và các loại vi khuẩn: E.coli, Proteus, Krebsiella…
gây ra từ các mẫu sữa, dịch âm đạo của lợn nái mắc hội chứng MMA.
Theo Lê Minh Chí và cs (1985) [1] thì: tại khu vực TP Hồ Chí Minh các loại vi trùng như: E.coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus spp,
Proteus mirabilis và Pseudomonas là nguyên nhân gây lên bệnh viêm tử cung
trên đàn lợn nái và chúng là những vi khuẩn cơ hội thường xuyên có mặt trong chuồng trại, lợi dụng khi lợn sinh sản cổ tử cung mở chứa nhiều sản
dịch, bị xây sát chúng sẽ xâm nhập và tấn công hệ thống niêm mạc sinh dục và gây lên các hiện tượng nhiễm trùng.
• Nhóm vi khuẩn cốđịnh
* Staphylococcus (Tụ cầu khuẩn)
- Đặc điểm hình thái và tính chất bắt màu
Là những vi khuẩn hình cầu, đường kính 0,7 - 1µm, không có lông, không di động được, không sinh nha bào, không có vỏ và bắt màu Gr(-). Trong bệnh phẩm Staphylococcus thường xếp thành từng đôi, từng đám nhỏ có hình chùm nho. Trong canh khuẩn vi khuẩn xếp thành từng đám hình chùm nho.
- Đặc tính nuôi cấy
Staphylococcus sống hiếu khí hoặc kỵ khí tùy tiện, nhiệt độ thích hợp: 32 - 370C, pH: 7,2 - 7,6.
+ Môi trường nước thịt: sau khi nuôi cấy 5 - 6 giờ, vi khuẩn làm đục môi trường, sau 24 giờ môi trường đục rõ hơn và lắng cặn, không có màng.
+ Môi trường thạch thường: sau khi cấy 24h, vi khuẩn hình thành khuẩn lạc dạng S, mặt hơi ướt, bờ đều nhẵn. Màu sắc của khuẩn lạc là do vi khuẩn sinh ra. Màu vàng thẫm là S.aureus, có độc lực và có khả năng gây bệnh cho động vật. Màu trắng hoặc vàng chanh là S.citreus, không có độc lực và không gây bệnh.
+ Môi trường thạch máu: sau khi cấy 24 giờ, vi khuẩn hình thành khuẩn lạc dạng S. Nếu là tụ cầu gây bệnh sẽ có hiện tượng dung huyết.
+ Môi trường Sapman: là môi trường dùng để nuôi cấy và phân lập
tụ cầu khuẩn. Nếu là tụ cầu gây bệnh sẽ lên men đường Manit làm pH thay đổi (pH = 6,8) và môi trường có màu vàng. Ngược lại, pH = 8,4, môi trường sẽ có màu đỏ.
+ Môi trường Gelatin: cấy theo đường trích sâu, nuôi cấy ở nhiệt độ 200C, sau 2 - 3 ngày, Gelatin bị tan chảy trông giống như dạng cái phễu.
- Đặc điểm sinh hóa
+ Chuyển hóa đường: tụ cầu có khả năng lên men đường: Glucose, Lactose, Levulose, Mannose, Mannit, Saccarose. Không lên men đường Galactose.
+ Các phản ứng sinh hóa: phản ứng Catalase dương tính.
* Escherichia coli
Trực khuẩn ruột già Escherichia coli còn có tên khác là Bacterium coli
commune, Bacillus coli communis, do Escherich phân lập năm 1885 từ phân
trẻ em. Những chủng E.coli phổ thông về mặt huyết thanh học được chia thành một số type. Trong đó 1 số type đóng vai trò quan trọng trong việc gây ra 1 số bệnh ở động vật và người. Việc phân chia vi khuẩn E.coli thành các
type được căn cứ vào cấu trúc kháng nguyên.
Cấu trúc kháng nguyên của vi khuẩn E.coli gồm: kháng nguyên thân O (Somatic), kháng nguyên lông H (Flagellar), kháng nguyên vỏ K (Capsular) hoặc còn gọi là kháng nguyên OMP (Outer Memberance Protein), và kháng nguyên bám dính F (Fimbriae). Cho đến nay đã xác định được 170 type kháng nguyên O, 80 type kháng nguyên H, 56 type kháng nguyên K và 1 số kháng nguyên F.
- Đặc điểm hình thái và tính chất bắt màu
Là cầu trực khuẩn hình gậy ngắn, kích thước 2 - 3 x 0,6µm. Trong cơ thể có hình cầu trực khuẩn, đứng riêng lẻ đôi khi xếp thành chuỗi ngắn. có khi trong môi trường nuôi cấy có trực khuẩn dài 4 - 8µm, những loại này thường gặp trong canh khuẩn gà. Phần lớn E.coli di động do có lông xung quanh thân, nhưng một số không thấy di động. Vi khuẩn không sinh nha bào, có thể có giáp mô, bắt màu Gr(-). Bình thường E.coli là vi khuẩn cộng sinh, thường trực trong đường ruột gia súc, gia cầm và người. Escherichia coli là trực khuẩn thuộc họ
Enterobacteriaceae, là vi khuẩn bắt màu Gr(-), 2 đầu tròn, kích thước 2 - 3 x 0,6 µm, có lông ở xung quanh nên vi khuẩn có khả năng di động. Vi khuẩn
E.coli không hình thành nha bào nên sức đề kháng yếu, dễ bị diệt ở nhiệt độ 550C trong vòng 1 giờ, ở 600C sống được 15 - 30 phút. Các chất sát trùng như acid phenic, clorua thủy ngân (HgCl2), formol có thể diệt E.coli trong vòng 5
phút, nhưng vi khuẩn đề kháng mạnh với sự sấy khô.
- Đặc tính nuôi cấy
Theo Nguyễn Quang Tuyên (2008) [20] cho biết: E.coli là trực khuẩn hiếu khí và yếm khí tùy tiện, có thể sinh trưởng ở nhiệt độ 15 - 240C và nhiệt độ thích hợp là 370C, pH thích hợp là 7,4. Vi khuẩn dễ dàng phát triển trên các môi trường nuôi cấy thông thường như:
- Môi trường nước thịt: phát triển tốt, môi trường rất đục, có cặn lắng xuống đáy màu tro nhạt, đôi khi hình thành màu xám nhạt. Canh trùng mùi phân hôi thối.
- Môi trường thạch thường: ở 370C sau 24 giờ hình thành những khuẩn lạc hình tròn ướt, màu tro trắng nhạt, hơi lồi, đường kính 2 - 3mm. Để lâu khuẩn lạc phát triển rộng ra và có thể quan sát thấy cả những khuẩn lạc dạng R (Rough) và M (Mooth).
- Môi trường Endo: hình thành khuẩn lạc màu đỏ.
- Môi trường EMB (Eosin Methyl Blue): hình thành khuẩn lạc màu tím đen.
+ Môi trường Mule Kopman (Meller Kauffman), môi trường lục
Malasit (malachite): E.coli không mọc, môi trường Endo, E.coli có khuẩn lạc màu đỏ, môi trường EMB có khuẩn lạc màu tím đen, môi trường thạch SS có khuẩn lạc đỏ, còn trong môi trường Vison - Blai, E.coli bịức chế.
+ Môi trường Macconkey: khuẩn lạc dạng S, màu đỏ. - Môi trường Muler Kauffman: không mọc.
+ Môi trường gelatin: không làm tan chảy gelatin.
- Đặc tính sinh hóa: Gr(-), sinh Indol, phản ứng đỏ Metyl (+), không khử xitrat, lên men đường glucose, manit, không sinh H2S, sản sinh hơi
- Khả năng kháng kháng sinh
Theo Nguyễn Quang Tuyên (2008) [20] cho biết: trong chăn nuôi người ta trộn kháng sinh vào thức ăn với liều thấp để đề phòng bệnh đường ruột và kích thích sinh trưởng. Bên cạnh đó việc sử dụng kháng sinh bừa bãi trong điều trị bệnh đã làm cho sự kháng kháng sinh của vi khuẩn ngày một tăng lên. Do đó hiệu quảđiều trị bệnh giảm đi rất nhiều, thậm chí nhiều loại kháng sinh đã bị vô hiệu hóa đối với vi khuẩn.
Theo Phạm Khắc Hiếu và cs (1999) [9], khi nghiên cứu về khả năng kháng thuốc của vi khuẩn E.coli, cho biết: đã tìm thấy chủng E.coli kháng lại 11 loại kháng sinh, đồng thời chứng minh khả năng di truyền tính kháng thuốc của vi khuẩn E.coli và Salmonella qua Plasmid và E.coli phân lập từ lợn con ỉa phân trắng tỷ lệ kháng Sulphamid lên tới 89,97%. Khả năng kháng kháng sinh của vi khuẩn nói chung và vi khuẩn E.coli nói riêng tăng nhanh, lan rộng là do gen sản sinh yếu tố kháng kháng sinh nằm trong Plasmid R. Plasmid này có thể di truyền dọc và di truyền ngang cho tất cả các quần thể vi khuẩn thích hợp.
* Streptococcus (Liên cầu khuẩn)
- Đặc điểm hình thái và tính chất bắt màu:
Streptococcus có hình cầu hoặc hình bầu dục, đường kính ≤ 1µm, đôi khi có vỏ, không di động được, bắt màu gram dương. Ở bệnh phẩm liên cầu khuẩn có hình chuỗi ngắn (6 - 8 đơn vị có khi dưới hình thái song cầu). Ở môi trường lỏng liên cầu có chuỗi dài 10 - 100 đơn vị. Ở môi trường đặc liên cầu có chuỗi ngắn.
- Đặc tính nuôi cấy:
Streptococcus sống hiếu khí hay yếm khí tùy tiện, nhiệt độ thích hợp 370C, có thể được nuôi cấy trong môi trường nước thịt, môi trường thạch thường, môi trường thach máu.
- Đặc tính sinh hóa
+ Chuyển hóa đường: Streptococcus có khả năng lên men đường
Glucose, Lactose, Salixin, Saccarose. Không lên men đường Mannit, Inulin.
+ Các phản ứng sinh hóa khác: phản ứng Indol (-), Phản ứng H2S: (-), không làm đông vón huyết tương
* Salmonella
- Đặc điểm hình thái và tính chất bắt màu
Salmonella có hình gậy ngắn, hai đầu tròn, kích thước 0,4 - 0,6 x 1 - 3µm, không hình thành giáp mô và nha bào, có khả năng di động (trừ
S.gallinarum - pullorum), bắt màu gram âm.
- Đặc tính nuôi cấy
Salmonella sống hiếu khí và kỵ khí không bắt buộc, nhiệt độ thích hợp: 370C (có thể phát triển được ở nhiệt độ từ 6 - 420C), pH: 7,6 (6 - 9).
Salmonella cũng được nuôi cấy trong nhiều môi trường: môi trường nước thịt, môi trường thạch thường, môi trường Macconkey - agar, môi trường Brilliant - green - agar
- Đặc tính sinh hóa:
Chuyển hóa đường: phần lớn loài Salmonella lên men sinh hơi đường
Glucose, Mannit, Mantose, Galactose, Levulose, Arabinose. Không lên men đường Lactose và Saccarose.
• Nhóm vi khuẩn không cốđịnh
* Vi khuẩn Pseudomonas
Là những loại vi khuẩn phổ biến gây bệnh ởđộng vật và con người. Nó được tìm thấy trong đất, nước và trên các môi trường nhân tạo. Vi khuẩn
không chỉ phát triển trong môi trường hiếu khí, mà còn có thể sống trong môi trường yếm khí.
- Đặc điểm hình thái và tính chất bắt màu
Trực khuẩn thẳng hoặc hơi cong, hai đầu tròn, kích thước 0.5 - 1µm x 1 - 5 µm. Có lông ở một đầu, vi khuẩn có thể di động được, ít khi có vỏ và không sinh nha bào. Khi nhuộm bắt màu Gr(-).
- Đặc tính nuôi cấy
Trực khuẩn mủ xanh mọc dễ dàng trên các môi trường nuôi cấy thông thường, hiếu khí. Nhiệt độ thích hợp 37oC, nhưng phát triển được ở nhiệt độ 5 - 420C, pH thích hợp 7,2 - 7,5 nhưng phát triển được ở pH 4,5 - 9,0
+ Trên môi trường đặc: có thể gặp 2 loại khuẩn lạc: 1 loại to, nhẵn, dẹt, trung tâm hơi lồi, có xu hướng mọc lan và 1 loại xù xì bờ không đều, đôi khí có loại khuẩn lạc nhầy.
+ Trên môi trường thạch máu đa số gây tan máu. Trong các nuôi cấy từ bệnh phẩm thường gặp loại khuẩn lạc thứ nhất. Trong các nuôi cấy từ môi trường thường gặp loại khuẩn lạc thứ hai.
+ Trong môi trường lỏng vi khuẩn mọc thành váng ở trên. Trực khuẩn
Pseudomonas mọc được ở trên môi trường SS (Shigella salmonella).
- Đặc tính sinh hóa học
+ Pseudomonas sử dụng một số loại đường bằng hình thức oxy hóa có sinh acid như glucose, mannitol, arabinose, galactose, fructose.
+ Không lên men đường lactose.
+ Phản ứng: Oxydase (+); citrat-cimmons (+); catalase (+). + Phản ứng: Indol (-); H2S (-); LDC (-); Urease (-).