2.1. NGUYÊN LIỆU:
- Rễ cây gai thu hái ở Viện dược liệu trung tâm chế biến và phát triển giống cây trồng - Ngọc Hồi, Hà N ộ i. Thu hái vào ngày 15/07/2006.
- Rễ cây Đảng sâm nam thu hái ở Sapa. Thu hái vào tháng 3/2007. - Các dược liệu còn lại : Hoàng kỳ (sống và chế), Đảng sâm Bắc, Thăng ma, Sài hồ, Bạch truật, Đương quy, Cam thảo,Trần bì, Trắc bách diệp, Sa nhân mua ở Công ty dược liệu trung ương I.
2.2. PHƯƠNG TIỆN:
2.2.1. Hoá chất; hoá chất tiêu chuẩn phân tích; MeOH, Ethylacetat,
E tO H ,...
2.2.2. Thiết bị:
- Tủ sấy Shel lab. - Tủ sấy Memmert.
- Máy cất chân không Biichi R-200.
- Bể nuôi cơ quan cô lập Apelex MS : 4050 (Đức). - Bộ đồ mổ súc vật thí nghiệm và dây truyền.
- Máy bơm truyền dung dịch tự động MS : 5300 (Nhật). - Máy ghi 2 cầu Gemini MS : 7070 (Đức).
- Cân phân tích Satorius, cân kĩ thuật. - Đèn tử ngoại Camag.
- Dụng cụ khác; cốc cỏ mỏ, ống đong, dụng cụ sắc thuốc, ...
2.2.3. Súc vật thí nghiệm:
- Chuột lang cả 2 giống đạt tiêu chuẩn thí nghiệm, trọng lượng 300- 350g/con do Viện Quân Y 103 cung cấp.
- Thỏ cả 2 giống đạt tiêu chuẩn thí nghiệm, trọng lượng 2-2,2 kg/con do Viện vệ sinh dịch tế cung cấp.
2.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU:2.3.1. Nghiên cứu hoá học : 2.3.1. Nghiên cứu hoá học :
- Định tính các nhóm hoạt chất có trong phương thuốc, và các vị thuốc
bằng các phản ứng hoá học [8],[10].
- Định tính 2 nhóm hoạt chất flavonoid và Saponin có trong MNC bằng SKLM.
- Định lượng 2 nhóm hoạt chất Flavonoid và Saponin theo phương
pháp cân[10].
2.3.2. Nghiên cứu tác dụng dược lý :
2.3.2.1. Tác dụng trên hệ cơ trofn :
* Nguyên tắc : tiến hành thực nghiệm theo phương pháp Magnus: Ghi các nhu động ruột thỏ và chuột cô lập ở các thời điểm khác nhau:
+ Trạng thái nhu động ruột bình thường . + Trạng thái nhu động sau khi dùng thuốc . * Chỉ tiêu theo d õ i:
- Tần số co bóp trong 30 phút. - Biên độ co bóp trong 30 phút.
* Chỉ tiêu đánh giá : dựa vào biểu đồ ghi được so sánh biên độ co bóp của ruột sau khi có thuốc với trước khi có thuốc .
* Xử lý kết quả thực nghiệm : xử lý theo phương pháp thống kê sinh học T-student.
Công thức tính kết quả [22]; + Kết quả trung bình :
_ 1Jỉ n
Trong đó : n là số súc vật của lô thí nghiệm.
a là mức ý nghĩa (p=0,05). / l à bậc tự do /= n - l. s là độ lệchchuẩn. n \2 « - 1
+ So sánh các kết quả giữa trước và sau khi thử thuốc bằng T- test.
- Z 2
t = «l-«2
Trong đó : là giá trị trung bình của mỗi lô thí nghiệm .
rij,n2 là số súc vật của mỗi lô thí nghiệm,
làphương sai chung.