VII. Lập bản đồ bằng phân tích bộ bốn (tetrad analysis)
(A) Bản đồ di truyền Bản đồ v ậ t lý
3. Nhận diện gene (tạo dòng cDNA và xác định trình tự) 1. Bản đồ di truyền (2-5 cM) Nhiễm sắc thể Trình tự DNASTS 1000 kb). Các th2. Bản đồ vật lý (bưản viđồện YAC xếp gối nhau. (B) 4. Xác định trình tự (đầy đủ Bộ gene Người vào 4/2003)
Hình 4.24 Hai cách so sánh khoảng cách bản đồ (A và B); khoảng cách bản
đồ dỉ truyền được cho bằng đơn vị cM trên một nhiễm sắc thể và khoảng cách vật lý được cho bằng số kilobase trong trình tự DNA.
Gần đây, một nỗ lực to lớn đã được tập trung hướng tới thu nhận cho được một bản đồ di truyền của bộ gen người (xem hình 4.24, và các trang web http://www.genome.gov/ và http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Omim/). Bằng cách sử dụng các chỉ thị phân tử (molecular markers) khác nhau (hiện giờđược bết có tới hàng ngàn marker trải khắp bộ gene người) như: (i) các đa hình độ dài phân đoạn DNA (restriction fragment length
polymorphism = RFLPs), nghĩa là các biến đổi trong các trình tự DNA của các sinh vật thuộc một loài nào đó mà có thể xác định được bằng sự tách đoạn các trình tự này nhờ sử dụng các enzyme giới hạn (chương 10), vì sự biến đổi nằm bên trong vị trí giới hạn; và RFLPs có thể được sử dụng để đo độ đa dạng của một gene trong quần thể; hay (ii) Vị trí trình tự đích
(sequence tagged site = STS), đó là một trình tự độc nhất từ một vị trí nhiễm sắc thểđã biết mà có thể khuyếch đại bằng phương pháp PCR; các STS hoạt động như là những marker vật lý cho việc lập bản đồ bộ gene
(genome mapping) và tạo dòng (cloning) v.v...
• Lưu ý: Vấn đề lập bản đồ bằng phân tích bộ bốn ở các vi nấm và vi tảo tạm dừng tại đây bởi vì nó sẽđược trình bày đầy đủ trong giáo trình Di
truyền học vi sinh vật và ứng dụng. Các hiện tượng tái tổ hợp bên trong gene (recombination within genes) và phép phân tích bổ trợ (complemen- tation) hay là trắc nghiệm cis-trans (cis-trans test) sẽ được đề cập trong chương 6 và trình bày chi tiết trong giáo trình vừa nói trên.