a
a//ThẩmThẩm tíchtích..
DùngDùng bộtbột MgMg oxitoxit hoặchoặc bộtbột polyamidpolyamid đểđể táchtách rara khỏikhỏi tanintanin. .
Saponin
Saponin đượcđược hoàhoà tantan vàovào nướcnước rồirồi trộntrộn vớivới bộtbột polyamidpolyamid hoặchoặc bột
bột MgMg oxitoxit trêntrên nồinồi cáchcách thuỷthuỷ 10 10 phútphút đểđể cócó mộtmột khốikhối nhãonhão. . SauSau đó
đó chiếtchiết saponinsaponin từtừ khốikhối nhãonhão nàynày bằngbằng etanoletanol 80% 80% nóngnóng. . LọcLọc rồirồi bốc
bốc hơihơi b
b//DùngDùng SephadexSephadex GG-25,-25,GG-50,-50,GG-75-75: :
LượngLượng SephadexSephadex dùngdùng gấpgấp 50 50 lầnlần saponinsaponin đemđem ngâmngâm nướcnước cấtcất cho
cho trươngtrương lênlên, , gạngạn lượnglượng nướcnước thừathừa, , chocho gelgel vàovào cộtcột sắcsắc kýký..
c
c//ĐểĐể tinhtinh chếchế saponinsaponin steroidsteroid cócó thểthể dùngdùng phươngphương pháppháp kếtkết hợphợpvới với
với cholesterolcholesterol::
11gg saponinsaponin hoàhoà trongtrong 200 200mlml etanoletanol đãđã đunđun nóngnóng, , tủatủa phứcphức sẽsẽ tạotạo thành
thành. . SauSau khikhi nguộinguội đemđem lọclọc tủatủa vàvà sấysấy khôkhô. . PháPhá phứcphức bằngbằng cáchcách hoà
hoà tantan trongtrong PyridinPyridin. . SaponinSaponin tinhtinh khiếtkhiết sẽsẽ đượcđược tủatủa trongtrong eteete. .
Để
Để loạiloại hếthết cholesterolcholesterol, , tủatủa đượcđược hoàhoà tantan trongtrong metanolmetanol rồirồi lạilại tủatủa với
2.Chiết
2.Chiết xuấtxuất vàvà tinhtinh chếchế flavonoidflavonoid::
Nguyên
Nguyên tắctắc chungchung::
KhôngKhông cócó mộtmột phươngphương pháppháp chungchung nàonào đểđể chiếtchiết xuấtxuất cáccác
favonoid
favonoid vìvì chúngchúng rấtrất kháckhác nhaunhau vềvề độđộ tantan trongtrong nướcnước vàvà
trong
trong cáccác dungdung môimôi hữuhữu cơcơ. . CácCác flavonoidflavonoid glycosidglycosid
thường
thường dễdễ tantan trongtrong cáccác dungdung môimôi phânphân cựccực. . CácCác flavonflavon, ,
flavonol (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
flavonol cócó OHOH tựtự dodo ởở vịvị trítrí 7 7 tantan đượcđược trongtrong dungdung dịchdịch
kiềm
kiềm loãngloãng. . DựaDựa vàovào đóđó đểđể chiếtchiết. . VíVí dụdụ đểđể chiếtchiết rutinrutin
trong
trong hoahoa hoèhoè tata cócó thểthể dùngdùng dungdung dịchdịch kiềmkiềm NaNa22COCO3 3
loãng
loãng đểđể hoàhoà tantan flavonoidflavonoid rara khỏikhỏi nguyệnnguyện liệuliệu, , sausau đóđó
acid
ThôngThông thườngthường đểđể chiếtchiết cáccác flavonoidflavonoid glycosidglycosid, , ngườingười tata
phải
phải loạiloại cáccác chấtchất thânthân dẫudẫu bằngbằng eteete dầudầu hoảhoả sausau đóđó chiếtchiết bằng
bằng nướcnước nóngnóng hoặchoặc metanolmetanol hoặchoặc etanoletanol hayhay hỗnhỗn hợphợp
CHCl
CHCl3 3 vàvà etanoletanol. . CồnCồn ởở cáccác nồngnồng độđộ kháckhác nhaunhau vàvà nướcnước
thường
thường chiếtchiết đượcđược phầnphần lớnlớn cáccác flavonoidflavonoid. . HỗnHỗn hợphợp
CHCl
CHCl3 3 vàvà cồncồn hayhay dùngdùng đểđể chiếtchiết cáccác dẫndẫn chấtchất methoxymethoxy
flavonoid
flavonoid. . CácCác chấtchất anthocyaminanthocyamin thườngthường kémkém bềnbền vữngvững
nhất
nhất làlà cáccác acylacyl anthocyaninanthocyanin đượcđược acylacyl hoáhoá vớivới cáccác axítaxít
aliphatic
aliphatic dodo đóđó ngườingười tata thườngthường chiếtchiết bằngbằng metanolmetanol cócó
mặt
mặt củacủa cáccác acidacid yếuyếu nhưnhư acidacid aceticacetic, , tactarictactaric thaythay vìvì
HCl
ĐểĐể phânphân lậplập từngtừng chấtchất flavonoidflavonoid ngườingười tata ápáp dụngdụng
phương
phương pháppháp sắcsắc kýký cộtcột. . ChấtChất hấphấp thụthụ thôngthông dụngdụng làlà bộtbột (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
polyamid
polyamid. . CóCó thểthể dùngdùng cáccác chấtchất kháckhác nhưnhư bộtbột cellulosecellulose, ,
silicagel
silicagel, , magnesolmagnesol, , polyvinylpyrolidonpolyvinylpyrolidon. . SilicagelSilicagel dùngdùng đểđể
tách
tách cáccác chấtchất flavononflavonon, isoflavon, isoflavon. .
PolyamidPolyamid dùngdùng đểđể táchtách tấttất cảcả cáccác loạiloại flavonoidflavonoid, , khaikhai
triển
triển bằngbằng etanoletanol hoặchoặc metanolmetanol vớivới độđộ cồncồn giảmgiảm dầndần, ,
hoặc
hoặc mộtmột sốsố hỗnhỗn hợphợp dungdung môimôi kháckhác..
MuốnMuốn cócó đơnđơn chấtchất tinhtinh khiếtkhiết thìthì cầncần phảiphải sắcsắc kýký cộtcột lạilại
vài
vài lầnlần hoặchoặc sắcsắc kýký chếchế hoáhoá. . CácCác flavonoidflavonoid dimerdimer, , trimertrimer có
Chiết
Chiết xuấtxuất flavonoidflavonoid::
ĐộĐộ hòahòa tantan củacủa flavonoidflavonoid tùytùy thuộcthuộc vàovào sốsố nhómnhóm
hydroxy
hydroxy vàvà caccac nhómnhóm thểthể kháckhác củacủa chúngchúng. . SốSố nhómnhóm nàynày
cũng
cũng nhưnhư vịvị trítrí củacủa chúngchúng rấtrất kháckhác nhaunhau giữagiữa flavonoidflavonoid, ,
vì
vì vậyvậy khókhó màmà địnhđịnh mộtmột đườngđường lốilối chungchung vềvề chiếtchiết xuấtxuất. .
Tuy
Tuy thếthế, , cócó thểthể nêunêu rara mộtmột sốsố nguyênnguyên tắctắc chungchung nhưnhư
sau
sau : :
FlavonoidFlavonoid ởở hầuhầu hếthết bộbộ phậnphận củacủa câycây : : rễrễ, , gỗgỗ, , lálá, , hoahoa, ,
quả
CácCác flavonflavon vàvà flavonolflavonol cócó nhiềunhiều OHOH, , cáccác biflavonbiflavon, , auronauron, , (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
chalcon
chalcon vàvà glycozidglycozid đềuđều làlà nhữngnhững chấtchất phânphân cựccực mạnhmạnh. .
Có
Có thểthể chiếtchiết chúngchúng bằngbằng cồncồn, nước, nước riêngriêng hoặchoặc hỗnhỗn hợphợp. .
Dung
Dung môimôi cócó thểthể ápáp dụngdụng chocho hầuhầu hếthết flavonoidflavonoid làlà dungdung
dịch
dịch cồncồn 80 80 hoặchoặc 60% ( 60% (EtOHEtOH, McOH, McOH))
ChiếtChiết bằngbằng nướcnước nóngnóng ápáp dụngdụng tốttốt đốiđối vớivới cáccác
polyglycozid
polyglycozid ( (nhưnhư trườngtrường hợphợp chiếtchiết RutinRutin từtừ hoahoa hòehòe) ) vàvà
các
các antoxyaninantoxyanin. . ĐốiĐối vớivới antoxyaninantoxyanin, nên, nên chocho thêmthêm lượnglượng
nhỏ
nhỏ HClHCl vàovào nướcnước chiếtchiết nóngnóng dướidưới dạngdạng cloruaclorua, , vìvì chúngchúng
khá
khá bềnbền vữngvững vớivới nhiệtnhiệt độđộ..
FlavonoidFlavonoid dodo cócó cáccác nhómnhóm OHOH phenolphenol, , chúngchúng tantan đượcđược trong
trong kiềmkiềm. Lợi. Lợi dụngdụng tínhtính chấtchất nàynày, có, có thểthể chiếtchiết chúngchúng
bằng
bằng dungdung dịchdịch kiềmkiềm loãngloãng, , nướcnước vôivôi. . SauSau đóđó axitaxit hóahóa
dịch
dịch chiếtchiết đểđể kếtkết tủatủa flavonoidflavonoid hoặchoặc táchtách rara bằngbằng dungdung
môi
3.Chiết
3.Chiết xuấtxuất, , tinhtinh chếchế vàvà phânphân lậplập alcaloidalcaloid
Chiết
Chiết xuấtxuất..
Việc
Việc chiếtchiết xuấtxuất alcaloidalcaloid dựadựa vàovào tínhtính chấtchất chungchung sausau: : (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
AlcaloidAlcaloid nóinói chungchung làlà nhữngnhững bazơbazơ yếuyếu thườngthường tồntồn tạitại
trong
trong câycây dướidưới dạngdạng muốimuối acidacid hữuhữu cơcơ hoặchoặc vôvô cơcơ, đôi, đôi
khi
khi ởở dạngdạng kếtkết hợphợp vớivới tanintanin; ; nênnên phảiphải tántán nhỏnhỏ dượcdược liệuliệu
để
để dễdễ thấmthấm vớivới dịchdịch chiếtchiết vàvà giảigiải phóngphóng alcaloidalcaloid khỏikhỏi
muối
muối củacủa nónó bằngbằng nhữngnhững kiềmkiềm trungtrung bìnhbình hoặchoặc kiềmkiềm
mạnh
mạnh. .
HầuHầu hếthết cáccác alcaloidalcaloid bazơbazơ khôngkhông tantan trongtrong nướcnước nhưngnhưng
lại
lại dễdễ tantan trongtrong dụngdụng dịchdịch hữuhữu cơcơ ítít phânphân cựccực
(
(hydrocacbonhydrocacbon thơmthơm, chloroform, chloroform, , etherether). ). TráiTrái lạilại, các, các
muối
muối alkaloidalkaloid thườngthường tantan trongtrong nướcnước, , cồncồn vàvà khôngkhông tantan
trong
trong cáccác dungdung môimôi ítít phânphân cựccực. Mặt. Mặt kháckhác còncòn tuỳtuỳ theotheo
tính
tính chấtchất củacủa alcaloidalcaloid nhưnhưloạiloại baybay hơihơi hoặchoặc khôngkhông baybay
hơi
ĐốiĐối vớivới nhữngnhững alcaloidalcaloid baybay hơihơi đượcđược nhưnhưconiinconiin ( (trongtrong cây
cây ConiumConium MaculatumMaculatum), ), nicotinnicotin ( (trongtrong câycây thuốcthuốc lálá) )
spactein
spactein ( (trongtrong câycây CytisusCytisus scopanusscopanus) ... ) ... cócó thểthể cấtcất kéokéo
được
được bằngbằng hơihơi nướcnước thìthì sausau khikhi sấysấy khôkhô dượcdược liệuliệu, , tántán
nhỏ (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
nhỏ, cho, cho kiềmkiềm vàovào đểđể đẩyđẩy alcaloidalcaloid dạngdạng muốimuối rara dạngdạng
bazơ
bazơ rồirồi lấylấy alcaloidalcaloid rara khỏikhỏi đượcđược liệuliệu theotheo phươngphương pháppháp
cất
cất kéokéo bằngbằng hơihơi nướcnước, người, người tata thườngthường hứnghứng dịchdịch cấtcất
được
được vàovào trongtrong dụngdụng dịchdịch acidacid vàvà từtừ đóđó cócó thểthể đượcđược
muối
muối alcaloidalcaloid..
ĐốiĐối vớivới NhữngNhững alcaloidalcaloid khôngkhông baybay hơihơi ngườingười tata sửsử dụngdụng
những
a
a/ / ChiếtChiết xuấtxuất bằngbằng dụngdụng môimôi hữuhữu cơcơ ởở môimôi trườngtrường kiềmkiềm::
- - TánTán nhỏnhỏ dượcdược liệuliệu rồirồi tẩmtẩm bộtbột dượcdược liệuliệu vớivới dungdung dịchdịch
kiềm
kiềm trongtrong nướcnước. .
- - ChiếtChiết bộtbột dượcdược liệuliệu sausau khikhi đãđã kiềmkiềm hoáhoá nhưnhư trêntrên bằngbằng
dụng
dụng môimôi hữuhữu cơcơ khôngkhông phânphân cựccực thíchthích hợphợp, , dụngdụng môimôi
này
này hoàhoà tantan cáccác alcaloidalcaloid bazơbazơ vừavừa đượcđược giảigiải phóngphóng..
- - CấtCất thuthu hồihồi dungdung môimôi hữuhữu cơcơ dướidưới ápáp lựclực giảmgiảm rồirồi lắclắc
dịch
dịch chiếtchiết côcô đặcđặc vớivới dụngdụng dịchdịch acidacid loãngloãng (2 - 5%), (2 - 5%), (
(thườngthường dùngdùng acidacid hydrochlorichydrochloric, , acidacid sulfuncsulfunc, , đôiđôi khikhi
dùng
dùng acidacid axeticaxetic hoặchoặc acidacid focmicfocmic). ). CácCác alcaloidalcaloid đượcđược
chuyển
chuyển sangsang dạngdạng muốimuối tantan trongtrong nướcnước, , còncòn mỡmỡ, , sắcsắc tốtố
sterol (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
sterol …… ởở lạilại dungdung môimôi hữuhữu cơcơ. .
- - GópGóp cáccác dịchdịch chiếtchiết muốimuối alcaloidalcaloid lạilại rồirồi kiềmkiềm hoáhoá đểđể
chuyển
chuyển alcaloidalcaloid sangsang dạngdạng bazơbazơ, , lắclắc vớivới dungdung môimôi hữuhữu cơcơ
thích
b