Ở đây tơi chọn phƣơng pháp bố trí thí nghiệm theo phƣơng pháp cổ điển
Các thơng số cần tối ƣu trong quá trình thuỷ phân bằng enzyme đầu ,xƣơng cá sơn la là: Tỷ lệ nƣớc/cơ chất(W/NL); tỷ lệ enzyme so với cơ chất (E/ NL), nhiệt độ thủy phân, thời gian thuỷ phân.
a. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu thích hợp
Đầu hoặc xƣơng cá sơn la đã xay nhỏ(100g)
Rã đơng
Thủy phân
( Tỉ lệ E / NL :0.3%, nhiệt độ thủy phân 55 C, thời gian thủy phân 4h ) Nƣớc 25% 50 % 75% 100% Bất hoạt enzyme Lọc Phần rắn Rửa sạch Sấy Xay Bột khống Xác định khối lƣợng của bột khống Chọn tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu tối ƣu
Hình 2.4 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu thích hợp
Đầu, xƣơng cá sơn la đã xay nhỏ đƣợc rã đơng ở nhiệt độ 40C qua đêm trong tủ lạnh.Cho vào 4 cốc thủy tinh 250ml mỗi cốc 100g mẫu đánh số thứ tự từ 1 tới 4 rồi cho nƣớc cất vào với tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu lần lƣợt là: 25%, 50%, 75%, 100% khuấy đều hỗn hợp bằng đũa thủy tinh. Thực hiện quá trình thuỷ phân bằng enzyme ở pH tự nhiên của cơ chất.Tỉ lệ enzyme so với nguyên liệu là 0.3%. Nhiệt độ thủy phân 55°C, thời gian thủy phân 4h. Sau khi kết thúc quá trình thuỷ phân bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 95°C trong 15 phút. Sau đĩ dùng rây để lọc tách riêng phần rắn và dịch lọc. Rửa sạch phần rắn phần xƣơng đem sấy ở 100°C trong 2h rồi đem xay nhỏ. Thu đƣợc bột khống.
b. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỉ lệ enzyme so với nguyên liệu
Đầu, xƣơng cá sơn la đã xay nhỏ đƣợc rã đơng ở nhiệt độ 40
C qua đêm trong tủ lạnh.Cho vào 6 cốc thủy tinh 250ml mỗi cốc 100g mẫu đánh số thứ tự từ 1 tới 6 rồi cho nƣớc cất vào với tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu tối ƣu đã đƣợc xác định ở thí nghiệm trên, khuấy đều hỗn hợp bằng đũa thủy tinh. Thực hiện quá trình thuỷ phân bằng enzyme ở pH tự nhiên của cơ chất. Nhiệt độ thủy phân 55°C, thời gian thủy phân 4h.Tỉ lệ enzyme so với cơ chất lần lƣợt là: 0,1%; 0,2%; 0,3%; 0,4%; 0,5%; 0,6% . Sau khi kết thúc quá trình thuỷ phân bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 95°C trong 15 phút. Sau đĩ dùng rây để tách riêng phần rắn và dịch lọc. Rửa sạch phần rắn phần xƣơng đem sấy ở 100°C trong 2h rồi đem xay nhỏ. Thu đƣợc bột khống.
Đầu hoặc cá sơn la đã xay nhỏ(100g)
Rã đơng
Thủy phân
( Tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu: tối ƣu, nhiệt độ thủy phân 55 C, thời gian thủy phân 4h ) 0.1% 0.2% 0.3% 0.4% 0.5% 0.6% Bất hoạt enzyme Lọc Phần rắn Rửa sạch với nƣớc Sấy Xay Bột khống Xác định lƣợng bột khống thu đƣợc
Tỉ lệ enzyme so với nguyên liệu tối ƣu
Hình 2.5 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỉ lệ enzyme so với nguyên liệu tối ƣu
c. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ thủy phân thích hợp
Đầu (xƣơng )cá sơn la đã xay nhỏ (100g)
Rã đơng
Thủy phân ( Tỉ lệ W / NL :tối ƣu, tỉ lệ E / NL tối ƣu, thời gian thủy phân 4h )
Nhiệt độ 40 C 45 C 50 C 55 C 60 C 65 C Bất hoạt enzyme Lọc Phần rắn Rửa sạch Sấy Xay Bột khống Xác định lƣợng bột khống thu đƣợc
Chọn thời gian thủy phân thích hợp
Hình 2.6 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ thủy phân
Thuyết minh sơ đồ bố trí thí nghiệm:
Đầu, xƣơng cá sơn la đã xay nhỏ đƣợc rã đơng ở nhiệt độ 40C qua đêm trong tủ lạnh.Cho vào 6 cốc thủy tinh 250ml mỗi cốc 100g mẫu đánh số thứ tự từ 1 tới 6 rồi cho nƣớc cất vào với tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu tối ƣu đã đƣợc xác định ở thí nghiệm trên, khuấy đều hỗn hợp bằng đũa thủy tinh. Thực hiện quá trình thuỷ phân bằng enzyme ở pH tự nhiên của cơ chất, thời gian thủy phân 4h, tỉ lệ enzyme so với cơ chất tối ƣu. Nhiệt độ thủy phân lần lƣợt là: 40 C; 45 C; 50 C; 55 C; 60 C; 65 C. Sau khi kết thúc quá trình thuỷ phân bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 95°C trong 15 phút. Sau đĩ dùng rây lọc để tách riêng phần rắn và dịch lọc. Rửa sạch phần rắn phần xƣơng đem sấy ở 100°C trong 2h rồi đem xay nhỏ, thu đƣợc bột khống.
c. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian thủy phân Đầu, xƣơng cá sơn la đã xay nhỏ đƣợc rã đơng ở nhiệt độ 40
C qua đêm trong tủ lạnh.Cho vào 5 cốc thủy tinh 250ml mỗi cốc 100g mẫu đánh số thứ tự từ 1 tới 5 rồi cho nƣớc cất vào với tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu tối ƣu đã đƣợc xác định ở thí nghiệm trên, khuấy đều hỗn hợp bằng đũa thủy tinh. Thực hiện quá trình thuỷ phân bằng enzyme ở pH tự nhiên của cơ chất, tỉ lệ enzyme so với cơ chất tối ƣu, nhiệt độ thủy phân tối ƣu, thời gian thủy phân lần lƣợt là:1h; 2h; 3h; 4h; 5h. Sau khi kết thúc quá trình thuỷ phân bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 95°C trong 15 phút. Sau đĩ dùng rây lọc để tách riêng phần rắn và dịch lọc. Rửa sạch phần rắn phần xƣơng đem sấy ở 100°C trong 2h rồi đem xay nhỏ, thu đƣợc bột khống.
Đầu (xƣơng )cá sơn la đã xay nhỏ(100g)
Rã đơng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Thủy phân ( Tỉ lệ nƣớc so với nguyên liệu: tối ƣu, tỉ lệ enzyme so với nguyên
liệu tối ƣu, nhiệt độ thủy phân tối ƣu ) Thời gian(h) 1 2 3 4 5 Bất hoạt enzyme Lọc Dịch lọc Phần rắn Rửa sạch Sấy Xay Bột khống Xác định lƣợng khống thu đƣợc
Thời gian thủy phân thích hợp
2.4.3Sản xuất bột khống từ đầu và xƣơng cá sơn la bằng phƣơng pháp hĩa học 2.4.3.1Qui trình dự kiến sản xuất bột khống bằng phƣơng pháp hĩa học
Cặn ly tâm
Ly tâm Dầu
Sản phẩm thủy phân lỏng
Hình 2.8 Qui trình dự kiến sản xuất bột khống bằng phƣơng pháp hĩa học
Đầu ( xƣơng) cá sơn la đã xay nhỏ
Rã đơng (4 C)
Thủy phân bằng NaOH
Xay Sấy ở 100 C trong 2h Phần rắn Lọc Rửa sạch bằng HCl 1% Bột khống Dịch lọc
Thuyết minh qui trình:
Đầu ( xƣơng) cá sơn la đã xay nhỏ đƣợc rã đơng ở nhiệt độ 40C qua đêm trong tủ lạnh. Cân 100g và cho vào cốc thuỷ tinh 250ml. Sau đĩ thực hiện quá trình thủy phân để xác định các thơng số tối ƣu.
Sau khi kết thúc quá trình thuỷ phân lấy cốc thuỷ tinh ra khỏi bể ổn nhiệt. Dùng rây lọc để lọc tách phần dịch lọc và thu phần rắn(xƣơng). Sau đĩ rửa bằng nƣớc rồi rửa lại bằng HCl 1% để trung hịa hết NaOH sử dụng trong quá trình thủy phân. Đem sấy bán thành phẩm ở 100 oC trong 2h rồi đem xay thu đƣợc bột khống.