Cao cloroform (C, 17.0g) được trộn đều với silica gel rồi nạp vào đầu cột sắc ký, tiếp theo, tiến hành giải ly bằng các hệ dung môi có độ phân cực theo thứ tự tăng dần từ cloroform đến metanol. Dung dịch giải ly được chứa trong các lọ có dung tích là 50 ml và được kiểm tra bằng SKLM. Các lọ cho kết quả SKLM giống nhau được gom thành một phân đoạn. Kết quả sắc ký cột trên cao C được trình bày ở bảng 3.2.
Nhận xét:
Kết quả sắc ký cột trên cao cloroform thu được 11 phân đoạn (FC 1 – FC 11), trong đó các phân đoạn FC 4, FC 8, FC 9 có sắc ký lớp mỏng cho vết chính rõ, đẹp nên được chọn để khảo sát tiếp. Các phân đoạn còn lại cho nhiều vết không rõ ràng nên tạm thời chưa khảo sát.
Khảo sát phân đoạn FC 4 của Bảng3.2
Phân đoạn FC 4 (Bảng 3.2) được thu ở dạng bột, sau khi sắc ký cột nhiều lần với hệ dung ly cloroform − metanol (97:3) và sắc ký điều chế, thu được 1 hợp chất dạng bột, màu trắng (5 mg). Kiểm tra bằng SKLM trên nhiều hệ dung ly khác nhau chỉ cho một vết duy nhất màu hồng sen khi hiện hình bằng dung dịch H2SO4 30%, đun nóng bản (Hình 3.2). Hợp chất này được ký hiệu là HYPO 1.
Phần khảo sát cấu trúc hóa học của hợp chất HYPO 1 được trình bày trong mục 3.4.
Khảo sát phân đoạn FC 8 của Bảng 3.2
Phân đoạn FC 8 được sắc ký cột với hệ dung môi giải ly cloroform − metanol (9:1), thu được một hợp chất dạng tinh thể, màu trắng (8 mg). Kiểm tra bằng SKLM trên nhiều hệ dung ly khác nhau chỉ cho một vết duy nhất màu tím đen khi hiện hình
Arachis hypogaea Trang 22 Nghiên cứu và kết quả
bằng dung dịch H2SO4 30%, đun nóng bản (Hình 3.2). Hợp chất này được ký hiệu là HYPO 3.
Phần khảo sát cấu trúc hóa học của hợp chất HYPO 3 được trình bày trong mục 3.4.
Khảo sát phân đoạn FC 9 của Bảng 3.2
Phân đoạn FC 9 được sắc ký cột với hệ dung môi giải ly cloroform − metanol (9:1), thu được một chất dạng bột, màu vàng (6 mg). Kiểm tra bằng SKLM trên nhiều hệ dung ly khác nhau chỉ cho một vết duy nhất màu vàng khi hiện hình bằng dung dịch H2SO4 30%, đun nóng bản (Hình 3.2). Hợp chất này được ký hiệu là HYPO 3.
Phần khảo sát cấu trúc hóa học của hợp chất HYPO 3 được trình bày trong mục 3.4.