2.2.4.1 Giai đo n s n xu t cao n m bào ng
2.2.4.1.1 Kh o sát quá trình x lý nguyên li u 2.2.4.1.1.1 Kh o sát quá trình x lý enzyme
M c tiêu thí nghi m:
Ch n ra ch đ x lý enzyme thích h p, cho hi u su t thu h i d ch cao và v n đ m b o đi m c m quan t t v màu. T đó, s áp d ng ti p t c cho quá trình trình trích ly cao n m sau này.
Trình bày thí nghi m.
Thông s c đnh.
- Kh i l ng các nghi m th c: 20 g
- Nhi t đ x lý v i enzyme xenlulase là 550C.
- Nhi t đ x lý enzyme protease là 550C trong 120 phút v i hàm
l ng là 0.05%. Thông s kh o sát. - L ng enzyme xenlulase. - Th i gian x lý nguyên li u. . Xác đnh ch tiêu h t nêm t cao n m bào ng . Xác đ nh ch tiêu h t nêm t cao
n m bào ng m Hàm l ng Acid amin Hàm l ng lipid Carbohydrate N ng l ng Ch tiêu vi sinh
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 48
- Có 4 giá tr hàm l ng enzyme và 4 giá tr th i gian x lý đ c kh o sát cho t ng enzyme nh sau
Hàm l ng enzyme: 0,05 %, 0,1%, 0,15% và 0,2%.
Th i gian x lý: 30 Phút, 60 phút, 90 phút, 120 phút.
Cách ti n hành:
Có 16 nghi m th c c n kh o sát
B ng 2.1 : B ng mã hóa các nghi m th c x lý enzyme xenlulase
Enzyme Th i gian(phút) 0.05% 0.1% 0.15% 0.2% ’ X11 X21 X31 X41 ’ X12 X22 X32 X42 ’ X13 X23 X33 X43 ’ X14 X24 X34 X44
- Cân 20g nguyên li u cho m i nghi m th c, b sung 40 ml n c c t vào m i nghi m th c.
- Xay nh h n h p nguyên li u và n c.
- i u ch nh pH h n h p v 4.5.
- Các nghi m th c đ c x lý enzyme v i các hàm l ng enzyme và trong th i gian khác nhau.
- B t ho t enzyme nhi t đ 80ºC/ ’.
- Trích ly 1000C trong 5 phút.
- L c thu d ch sau trích ly.
- i u ch nh pH d ch trích v 6.5.
- X lí v i enzyme protease. - B t ho t protease 800C/ ’
- Xác đ nh hàm l ng acid amin có trong m u b ng ph ng pháp
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 49
- Xác đ nh hi u su t thu h i ch t khô c a các nghi m th c b ng ph ng
pháp s y đ n kh i l ng không đ i.
- ánh giá c m quan v màu, mùi, v c a d ch thu đ c.
- Ti n hành thí nghi m song song v i m u đ i ch ng là nguyên li u t i đ c b sung ml n c và xay nh sau đó trích ly b ng n c 1000C/ ’, sau đó l c thu đ c d ch.
H i đ ng đánh c m quan ít nh t ng i đ đ m b o đ tin c y. Thí nghi m đ c l p l i 3 l n đ đ m b o đ tin c y.
Cách đánh giá nghi m th c:
- Ch tiêu đánh giá Hàm l ng acid amin thu đ c, hi u su t thu h i ch t khô và c m quan.
- Nghi m th c m c tiêu: Ch n nghi m th c cho hi u su t thu h i ch t khô, hàm l ng acid amin là cao nh t, kèm theo đó là s n ph m cho c m quan t t.
- Cách tính hi u su t thu h i ch t khô
- Ti n hành đánh giá c m quan v mùi, v theo b ng c m quan sau:
B ng 2.2: B ng c m quan v màu s c, mùi v
Tên ch tiêu i m Yêu c u
Màu s c 5 Màu vàng nh t đ c tr ng c a d ch n m 4 Màu vàng nh t ho c vàng h i nâu 3 Màu vàng nâu 2 Màu vàng r t nh t ho c vàng nâu đ m 1 Màu tr ng h i vàng nh t nh t
0 Không màu ho c có màu l
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 50 4 Mùi n m 3 Mùi th m nh 2 Mùi th m r t nh 1 M t mùi c a n m 0 Mùi l khó ch u V 5 V ng t l đ c tr ng c a n m 4 V ng t l 3 V ng t l nh 2 V ng t l r t nh 1 Không có v ng t 0 V l khó ch u
Sau đó s d ng ph n m m Statgraphic plus , đ th ng kê k t qu .
- Xác đ nh hàm l ng acid amin trong m u theo m c 5.3.4 2.2.4.1.1.2 Kh o sát quá trình l nh đông ch m
M c tiêu thí nghi m:
Ch n ra th i gian và nhi t đ rư đông thích h p, nh m thu đ c hi u xu t trích ly là cao nh t. Trình bày thí nghi m. Thông s c đnh. - Kh i l ng các nghi m th c: 20 g - L nh đông ch m 24 gi . Thông s kh o sát.
- M u đông l nh đư xay nhuy n và không xay nhuy n.
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 51
Có 2 nghi m th c c n kh o sát
B ng 2.3 : B ng mã hóa các nghi m th c quá trình x lý l nhăđ ng ch m STT Xay nhuy n Nghi m th c
1 Tr c l nh đông D11
2 Sau l nh đông D12
- Cân 20g nguyên li u cho m i nghi m th c, sau đó c t nh nguyên li u.
- i v i m u xay nhuy n tr c l nh đông thì b sung thêm ml n c, sau đó đi xay nhuy n.
- L nh đông gi và ti n hành rư đông.
- i v i m u xay nhuy n sau l nh đông thì sau khi rư đông thêm ml n c, sau đó đi xay nhuy n.
- Sau đó trích ly b ng n c 1000C trong 5 phút.
- L c thu d ch sau trích ly.
- X lí v i enzyme protease. - B t ho t protease 800C/ ’
- Xác đ nh hàm l ng acid amin có trong m u b ng ph ng pháp sorensen.
- Xác đnh hi u su t thu h i ch t khô c a các nghi m th c b ng ph ng
pháp s y đ n kh i l ng không đ i.
- ánh giá c m quan v màu, mùi, v c a dch thu đ c.
- Ti n hành thí nghi m song song v i m u đ i ch ng là nguyên li u t i đ c c t nh sau đó trích ly b ng n c 1000C/ ’, sau đó l c thu đ c d ch.
H i đ ng đánh c m quan ít nh t ng i đ đ m b o đ tin c y. Thí nghi m đ c l p l i 3 l n đ đ m b o đ tin c y
Cách đánh giá nghi m th c:
- Ch tiêu đánh giá: Hàm l ng acid amin thu đ c, hi u su t thu h i ch t khô và c m quan.
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 52
- Nghi m th c m c tiêu: Ch n nghi m th c cho hi u su t thu h i ch t khô cao, hàm l ng acid amin là cao nh t, kèm theo đó là s n ph m cho c m quan t t.
- Cách tính hi u su t thu h i ch t khô, đánh giá c m uan và đ nh l ng
hàm l ng acid amin nh m c 2.2.4.1.1.1
2.2.4.1.1.3 Kh o sát quá trình ch n k t h p v i làm l nh nhanh
M c tiêu thí nghi m:
Tìm ra nhi t đ và th i gian ch n thích h p, nh m phá v thành t bào n m, h tr quá trình trích ly.
Trình bày thí nghi m.
Thông s c đnh.
- Kh i l ng các nghi m th c: 20 g.
- Làm l nh nhanh nhi t đ 100C trong 1 phút.
Thông s kh o sát.
- Nhi t đ và th i gian ch n.
- Có 4 giá tr v nhi t đ và 4 giá tr th i gian ch n nh sau
Nhi t đ ch n: 700C ; 750C, 800C và 900C.
Th i gian ch n ’, ’, ’, ’.
Cách ti n hành:
Có 16 nghi m th c c n kh o sát
B ng 2.4 : B ng mã hóa các nghi m th c ch n các nhi tăđ và th i gian khác nhau
Nhi t đ Th i gian(phút) 700C 750C 800C 900C ’ C11 C21 C31 C41 ’ C12 C22 C32 C42 ’ C13 C23 C33 C43 ’ C14 C24 C34 C44
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 53 - Cân 20g nguyên li u cho m i nghi m th c, c t nh nguyên li u.
- Các nghi m th c đ c ch n các m c nhi t đ và th i gian nh trên.
- Làm l nh nhanh t i nhi t đ 10ºC/1’.
- Xay nhuy n nguyên li u, b sung thêm ml n c. - Sau đó trích ly b ng n c 1000C trong 5 phút. - L c thu d ch sau trích ly.
- X lí v i enzyme protease.
- B t ho t protease 800C/ ’.
- Xác đ nh hàm l ng acid amin có trong m u b ng ph ng pháp
sorensen.
- Xác đ nh hi u su t thu h i ch t khô c a các nghi m th c b ng ph ng
pháp s y đ n kh i l ng không đ i.
- ánh giá c m quan v màu, mùi, v c a dch thu đ c.
- Ti n hành thí nghi m song song v i m u đ i ch ng là nguyên li u t i đ c c t nh sau đó trích ly b ng n c 1000C/ ’, sau đó l c thu đ c d ch.
H i đ ng đánh c m quan ít nh t ng i đ đ m b o đ tin c y. Thí nghi m đ c l p l i 3 l n đ đ m b o đ tin c y.
Cách đánh giá nghi m th c:
- Ch tiêu đánh giá:Hàm l ng acid amin thu đ c, hi u su t thu h i ch t khô và c m quan.
- Nghi m th c m c tiêu: Ch n nghi m th c cho hi u su t thu h i ch t khô cao, hàm l ng acid amin là cao nh t, kèm theo đó là s n ph m cho c m quan t t.
- Cách tính hi u su t thu h i ch t khô, đánh giá c m quan và đ nh l ng
hàm l ng acid amin nh m c 2.2.4.1.1.1 2.2.4.1.1.4 So sánh các bi n pháp x lý nguyên li u
M c tiêu thí nghi m:
Tìm ra thông s t i u c a quá trình x lý nguyên li u, d a vào thông s t i u c a các nghi m th c trên.
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 54
Trình bày thí nghi m.
Thông s c đnh.
- Kh i l ng các nghi m th c: 20 g.
Thông s kh o sát.
- Thông s t i u c a các giai đo n trên.
Cách ti n hành:
- Cân 20g nguyên li u cho m i nghi m th c, c t nh nguyên li u.
- Các nghi m th c c n kh o sát là thông s t i u c a các giai đo n trên. - Sau đó trích ly b ng n c 1000C trong 5 phút.
- L c thu d ch sau trích ly.
- X lí v i enzyme protease. - B t ho t protease 800C/ ’
- Xác đ nh hàm l ng acid amin có trong m u b ng ph ng pháp sorensen.
- Xác đnh hi u su t thu h i ch t khô c a các nghi m th c b ng ph ng
pháp s y đ n kh i l ng không đ i.
- ánh giá c m quan v màu, mùi, v c a dch thu đ c.
- Ti n hành thí nghi m song song v i m u đ i ch ng là nguyên li u t i đ c c t nh sau đó trích ly b ng n c 1000C/ ’, sau đó l c thu đ c d ch.
H i đ ng đánh c m quan ít nh t ng i đ đ m b o đ tin c y. Thí nghi m đ c l p l i 3 l n đ đ m b o đ tin c y.
Cách đánh giá nghi m th c:
- Ch tiêu đánh giá: Hàm l ng acid amin thu đ c, hi u su t thu h i ch t khô và c m quan.
- Nghi m th c m c tiêu: Ch n nghi m th c cho hi u su t thu h i ch t khô cao, hàm l ng acid amin là cao nh t, kèm theo đó là s n ph m cho c m quan t t.
- Cách tính hi u su t thu h i ch t khô, đánh giá c m uan và đ nh l ng
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 55
2.2.4.1.2 Kh o sát quá trình trích ly
2.2.4.1.2.1 Kh o sát t l nguyên li u và dung môi
M c tiêu thí nghi m:
Ch n đ c t l v nguyên li u và dung môi phù h p, thu n l i cho quá trình trích ly.
Trình bày thí nghi m.
Thông s c đnh.
- Kh i l ng các nghi m th c: 60ml d ch n m đ c xay nhuy n t 20 gam nguyên li u và ml n c).
- Nhi t đ trích ly 800C trong 30 phút.
- Nhi t đ x lý enzyme protease là 550C trong 120 phút v i hàm
l ng là 0.05%.
- N ng đ dung môi ethanol là 50%.
Thông s kh o sát.
- T l nguyên li u và dung môi.
- Có 4 giá tr v nguyên li u và dung môi là: 1/4, 1/6, 1/8, 1/10
Cách ti n hành:
Có 8 nghi m th c c n kh o sát:
B ng 2.5 : B ng mã hóa các nghi m th c kh o sát t l nguyên li u và dung môi STT T l nguyên li u và dung
môi
Nghi m th căđ i v i
dungămôiălƠăn c
Nghi m th căđ i v i dung môi là ethanol
1 1/ 4 N1 E1
2 1/6 N2 E2
3 1/8 N3 E3
4 1/10 N4 E4
- Cân 20g nguyên li u cho m i nghi m th c.
- X lý nguyên li u b ng thông s t i u c a giai đo n trên.
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 56
- L c thu d ch sau trích ly.
- Cô đ c các m u v 40ml d ch trích ly.
- X lí v i enzyme protease. - B t ho t protease 800C/ ’.
- Xác đ nh hàm l ng acid amin có trong m u b ng ph ng pháp sorensen.
- Xác đnh hi u su t thu h i ch t khô c a các nghi m th c b ng ph ng
pháp s y đ n kh i l ng không đ i.
- ánh giá c m quan v màu, mùi, v c a dch thu đ c.
H i đ ng đánh c m quan ít nh t ng i đ đ m b o đ tin c y. Thí nghi m đ c l p l i 3 l n đ đ m b o đ tin c y.
Cách đánh giá nghi m th c:
- Ch tiêu đánh giá: Hàm l ng acid amin thu đ c, hi u su t thu h i ch t khô và c m quan.
- Nghi m th c m c tiêu: Ch n nghi m th c cho hi u su t thu h i ch t khô cao, hàm l ng acid amin là cao nh t, kèm theo đó là s n ph m cho c m quan t t.
- Cách tính hi u su t thu h i ch t khô, đánh giá c m uan và đ nh l ng
hàm l ng acid amin nh m c 2.2.4.1.1.1 2.2.4.1.2.2 Kh o sát quá trình trích ly b ng n c M c tiêu thí nghi m: Ch n đ c ch đ x lý v nhi t đ và th i gian trích ly b ng n c phù h p. Trình bày thí nghi m. Thông s c đnh. - Kh i l ng các nghi m th c: 20 g - T l t i u giai đo n trên.
Thông s kh o sát.
- Nhi t đ và th i gian trích ly b ng n c.
- Có 4 giá tr v nhi t đ và 4 giá tr th i gian trích ly b ng n c
SVTH: NGUY N THANH H NG TRANG 57
Nhi t đ : 80, 85, 90 và 950C.
Th i gian trích ly: ’, ’, ’ và ’.
Cách ti n hành:
Có 16 nghi m th c c n kh o sát