C DEX (µg/mL)
3.8.Xác định hàm lƣợng PAR, CPM và DEX trong thuốc Coldko và đánh giá độ đúng của phép phân tích theo phƣơng pháp thêm chuẩn
đánh giá độ đúng của phép phân tích theo phƣơng pháp thêm chuẩn
Tiến hành pha thuốc viên n én Coldko do Công ty cổ phần dược phẩm Nam Hà – Việt Nam sản xuất. Thành phần theo công bố là 500mg PAR, 2mg CPM và 10mg DEX, số lô sản xuất: 10111; ngày sản xuất: 15/09/2010; hạn sử dụng: 15/09/1012
Khối lượng trung bình viên thuốc: m = 2,9884 mg .
Xử lý mẫu thuốc: Cân 10 viên thuốc, tính khối lượng trung bình mỗi viên, đem nghiền nhỏ thành bột mịn, rồi lấy chính xác lượng bột tương đương chứa 500 mg PAR, 2 mg CPM và 10 mg DEX cho vào bình định mức 100 mL, thêm dung dịch HCl 0,1 M, lắc kỹ cho tan hoàn toàn, định mức đến vạch, ta được 100 mL, đem lọc, bỏ khoảng 20 mL dung dịch đầu, lấy 5 ml dung dịch lọc pha loãng thành 50 ml ta được dung dịch chứa hàm lượng tương đương PAR là 50 g/mL, CPM là 0,2 g/mL và DEX là 1 g/mL. Tiếp tục pha loãng đến khi dung dịch thuốc Coldko có hàm lượng như ở bảng 3.25
Bảng3.25: Hàm lượng PAR, CPM và DEX trong mẫu thuốc Coldko
Mẫu 1 2 3 4 5
C0PAR 12,50 10,00 8,00 6,25 3,125
C0DEX 0,25 0,20 0,16 0,125 0,0625
C0CPM 0,05 0,04 0,032 0,025 0,0125 C0là nồng độ PAR, CPM và DEX (g/mL) trong các mẫu thuốc Coldko; C0là nồng độ PAR, CPM và DEX (g/mL) trong các mẫu thuốc Coldko; Thực hiện phép đo độ hấp thụ quang của các hỗn hợp trong khoảng bước sóng 210 - 285nm, cứ 0,5nm lấy 1 giá trị. Từ kết quả đo quang tiến hành tính
hàm lượng PAR, DEX và CPM theo chương trình lọc Kalman , kết quả được trình bày ở bảng 3.26
Bảng3.26: Kết quả tính nồng độ, sai số PAR, CPM, DEX trong mẫu thuốc Coldko
Mẫu C0PAR C0CPM C0DEX CPAR CCPM CDEX RE% CPAR RE% CCPM RE% CDEX 1 12,50 0,25 0,05 12,61 0,58 0,00 0,86 131,70 100,00 2 10,00 0,20 0,04 10,11 0,51 0,00 1,06 153,28 100,00 3 8,00 0,16 0,032 8,09 0,45 0,00 1,14 182,44 100,00 4 6,25 0,125 0,025 6,32 0,34 0,00 1,18 175,54 100,00 5 3,125 0,063 0,013 3,17 0,16 0,00 1,32 154,04 100,00
C0là nồng độ PAR, CPM và DEX (g/mL) trong các mẫu thuốc Coldko; C là nồng độ PAR, CPM và DEX tính toán được;
RE% CPAR, RE% CCPM và RE% CDEX là sai số phép xác định hàm lượng PAR, CPM và DEX.
Nhận xét: Qua bảng có thể xác định được PAR trong hỗn hợp tương đối chính xác vì PAR có hàm lượng lớn, còn sai số mắc phải trong phép xác định CPM và DEX là quá lớn . Vì vậy để xác định hàm lượng PAR , CPM và DEX trong mẫu thuốc Coldko chúng tôi sử dụng phương pháp thêm chuẩn.
Đánh giá độ đúng của phương pháp bằng cách thêm vào dung dịch mẫu phân tích m ột lượng chính xác PAR , CPM và DEX đã biết nồng độ . Đem quét phổ và tính độ thu hồi PAR, CPM và DEX trong mẫu qua đó đánh giá độ tin cậy của phép phân tích.
Pha các dung dịch chuẩn PAR, CPM, DEX có CPAR = 25 μg/mL, CCPM
= 25 μg/mL và CDEX = 25 μg/mL. Sau đó , lấy 12,5 mL dung dịch thuốc Coldko cho vào 14 bình định mức 25 ml, đánh số thứ tự rồi tiến hành thêm lần lượt thể tích các dung dịch chuẩn PAR , CPM và DEX như bảng 3.27, sau đó định mức bằng dung dịch HC l 0,1M.
Bảng 3.27. Thành phần các dung dịch chuẩn PAR, CPM và DEX thêm vào dung dịch mẫu thuốc Coldko
Mẫu Vthuốc (mL) VPAR (mL) VDEX (mL) VCPM (mL)
1 12,5 - - 6,0 2 12,5 - - 5,0 3 12,5 - - 4,0 4 12,5 - - 3,0 5 12,5 - 6,0 - 6 12,5 - 5,0 - 7 12,5 - 4,0 - 8 12,5 - 3,0 - 9 12,5 - 6,0 6,0 10 12,5 - 5,0 5,0 11 12,5 - 4,0 5,0 12 12,5 - 3,0 3,0 13 12,5 0,5 - - 14 12,5 1,0 - - Trong đó:
Vthuốc là thể tích mẫu thuốc Coldko có chứa hàm lượng tương đương PAR là 12,5 g/mL, CPM là 0,05 g/mL và DEX là 0,25 g/mL.
VPAR là thể tích PAR có nồng độ tương ứng là CPAR = 25 μg/mL thêm vào dung dịch mẫu.
VCPM là thể tích CPM có nồng độ tương ứng là CCPM = 25 μg/mL thêm vào dung dịch mẫu.
VDEX là thể tích DEXcó nồng độ tương ứng là CDEX = 25 μg/mL thêm vào dung dịch mẫu.
Đem quét phổ ở bước sóng từ 210-285nm và dùng kết quả đo độ hấp thụ quang để tính toán xác định hàm lượng PAR , CPM và DEX qua đó tính độ thu hồi của chúng.
Bảng 3.28: Kết quả tính nồng độ, sai số của PAR, CPM, DEX trong dung dịch mẫu thuốc Coldko
Mẫu C0PAR C0CPM C0DEX [PAR] [CPM] [DEX] Rev(%)
CPAR Rev(%) Rev(%) CCPM Rev(%) CDEX 1 6,25 6,025 0,125 6,32 6,02 0,44 99,85 2 6,25 5,025 0,125 6,34 5,17 0,17 102,94 3 6,25 4,025 0,125 6,32 3,99 0,40 99,13 4 6,25 3,025 0,125 6,32 2,95 0,42 97,42 5 6,25 0,025 6,125 6,33 -0,04 6,33 103,36 6 6,25 0,025 5,125 6,33 -0,01 5,40 103,74 7 6,25 0,025 4,125 6,33 0,02 4,39 100,53 8 6,25 0,025 3,125 6,33 0,02 3,39 100,88 9 6,25 6,025 6,125 6,31 6,00 6,48 99,62 10 6,25 5,025 5,125 6,31 5,02 5,49 100,21 11 6,25 4,025 4,125 6,31 4,02 4,46 99,70 12 6,25 3,025 3,125 6,32 2,98 3,45 98,52 13 6,75 0,025 0,125 6,76 -0,02 0,27 101,46 14 7,25 0,025 0,125 7,26 -0,07 0,31 100,81 Trong đó: C0
PAR, C0CPM và C0DEX (μg/mL) là hàm lượng PAR, CPM và DEX trong thuốc Coldko trước khi thêm chuẩn.
[PAR], [CPM] và [DEX] là lượng chất chuẩn PAR, CPM và DEX thêm vào mẫu pha chế. CPAR, CCPM và CDEX (μg/mL) là hàm lượng PAR, CPM và DEX xác định được sau khi thêm chuẩn. Rev(%) CPAR, Rev(%) CCPM , Rev(%) CDEX (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
là độ thu hồi của PAR, CPM và DEX.
Nhận xét: Qua bảng 3.28 cho thấy độ thu hồi của PAR từ 100,81% đến 101,46%, của CPM là từ 98,52% đến 102,94% và của DEX là từ 100,88% đến 103,74% . Độ thu hồi của PAR, CPM và DEX đều mắc sai số nhỏ (<5%). Vì vậy chúng tôi kết luận có thể dùng phương pháp thêm chuẩn để tính hàm lượng của PAR, CPM và DEX trong mẫu thuốc Coldko.
KẾT LUẬN
Sau một thời gian nghiên cứu, chúng tôi rút ra một số kết luận sau:
1. Đã tìm được điều kiện tối ưu để xác định đồng thời PAR, CPM và DEX trong cùng hỗn hợp: bước sóng ứng với độ hấp thụ quang cực đại của dung dịch PAR λmax = 244 nm, CPM λmax = 264 nm và DEX λmax = 278 nm; trong môi trường axit HCl 0,1M độ hấp thụ quang của PAR , CPM và DEX ổn định và đạt cực đại; khoảng thời gian tối ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang là khoảng 30 phút sau khi pha và tại nhiệt độ phòng.
2. Đã kiểm tra được tính cộng tính độ hấp thụ quang của các chất trong hỗn hợp đối với các mẫu giả tự pha. Xác định được LOD, LOQ và khoảng tuyến tính của PAR là từ 0,2 đến 25 g/mL, của CPM là từ 0,2 đến 30 g/mL và của DEX là từ 5,00 đến 100 g/mL
3. Đã xác định đồng thời PAR, CPM và DEX trong hỗn hợp 2 cấu tử tự pha với kết quả:khi hàm lượng PAR > CPM trên 240 lần và CPM > PAR trên 100; hàm lượng PAR > DEX trên 40 lần và DEX > PAR trên 55 lần và hàm lượng DEX > CPM lớn hơn trên 40 lần và CPM > DEX trên 10 lần thì phương pháp lọc Kalman mắc sai số lớn hơn 5% đối với cấu tử có nồng độ nhỏ và mắc sai số nhỏ đối với cấu tử có nồng độ lớn (<3-5%); với hỗn hợp 3 cấu tử chỉ xác định được PAR trong hỗn hợp tương đối chính xác , sai số mắc phải trong phép xác định DEX và CPM là lớn . Cần phải sử dụng phương pháp thêm chuẩn để xác định hàm lượng PAR, CPM và DEX trong mẫu thuốc Coldko.
4. Sử dụng phương pháp thêm chuẩn xác định PAR, CPM và DEX trong mẫu thuốc Coldko tự pha với độ thu hồi như sau: PAR từ 100,81% đến 101,46%, của CPM là từ 98,52% đến 102,94% và của DEX là từ 100,88% đến 103,74% .
Như vậy, việc dùng phương pháp lọc Kalman sử dụng kết quả đo quang để xác định hàm lượng PAR, CPM và DEX đơn giản, tính toán khá chính xác, điều đó cho phép mở ra triển vọng rất lớn nếu được áp dụng vào thực tiễn.