III.1. Sơ đồ điều chế cao Etyl acetat
Mẫu cây tươi
Cao EtOH 120g
1. Ngâm dầm với EtOH tuyệt đối 2. Thu hồi dung môi dưới áp suất thấp
Chiết với PE 1. Để khô tự nhiên.
2. Sấy ở 50oC đến khi khối lượng không đổi
3. Nghiền thành bột
Bột cây khô 2kg
Bã
Dịch PE
Thu hồi dung môi dưới áp suất thấp Thu hồi dung môi
dưới áp suất thấp
Cao PE 55g
Phần không tan trong PE
Chiết với Etyl acetat
Dịch Etyl acetat
Cao EtOAc 14g
Phần không tan trong Etyl acetat
III.2. Các bước tiến hành
- Bước 1: Mẫu nguyên liệu ban đầu được chiết bằng Etanol tuyệt đối. Sau đó, cô cạn dịch chiết thu được cao Etanol.
- Bước 2: Từ cao Etanol tiến hành lắc chiết với ete dầu hỏa (PE), thu được dịch PE và phần không tan trong PE.
- Bước 3: Lấy phần không tan trong PE tiếp tục được lắc chiết với Etyl acetat. Sau đó, cô cạn dịch chiết thu được cao Etyl acetat.
- Bước 4: Tiến hành nghiên cứu sơ bộ thành phần hóa học trên cây cỏ mực bằng các phản ứng định tính một số hợp chất hữu cơ thường gặp trong thực vật.
Từ cao Etyl acetat thu được tiến hành phân lập bằng phương pháp sắc ký cột kết hợp với sắc ký lớp mỏng để cô lập hợp chất tinh khiết.
- Bước 5: Gửi mẫu sạch cô lập được đến phòng NMR, Viện hóa học, 18, Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội đo các phổ 1H, IR, 13C, DEPT, HMBC, HSQC ta nhận được các dữ liệu phổ của mẫu.
- Bước 6: Từ các dữ liệu phổ có được, tiến hành giải phổ để xác định cấu trúc hợp chất cô lập được, sau đó tiếp tục tìm hiểu một số đặc điểm, đặc tính của hợp chất đã biết.