NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.1 Kết quả ủỏnh giỏ chất lượng vắc xin trong phũng thớ nghiệm
Theo TCVN 8684-2011, mẫu của mỗi lụ ủược kiểm tra trờn cỏc mụi trường cơ bản với số lượng như sau: 2 ống thạch máu, 2 ống thạch nấm, 2 ống thạch thường, 2 ống nước thịt, 2 ống nước thịt gan yếm khí. Nhỏ 0,1 ml vắc xin cần kiểm tra vào mỗi ống môi trường. Sau khi cấy, toàn bộ môi trường kiểm tra ủược bồi dưỡng trong tủ ấm 370C, riờng mụi trường thạch nấm ủể ở nhiệt ủộ phũng, theo dừi liờn tục trong 7 ngày tất cả cỏc ống mụi trường ủều không có bất cứ loại nấm và vi khuẩn nào mọc. Kết quả kiểm tra vô trùng ủược trỡnh bày ở bảng 3.1.
Bảng 3.1. Kết quả kiểm tra chỉ tiêu vô trùng của vắc xin Công ty
nhập khẩu vắc xin
Mụi trường Nhiệt ủộ ủ (˚C)
Thời gian theo dõi (ngày)
Liều kiểm
tra (ml) Kết quả
Thạch nấm Nhiệt ủộ phũng 7 0,1 -
Thạch máu 37 7 0,1 -
Thạch thường 37 7 0,1 -
Nước thịt 37 7 0,1 -
VINAVETCO
Yếm khí 37 7 0,1 -
Thạch nấm Nhiệt ủộ phũng 7 0,1 -
Thạch máu 37 7 0,1 -
Thạch thường 37 7 0,1 -
Nước thịt 37 7 0,1 -
NAVETCO
Yếm khí 37 7 0,1 -
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Kết quả ủược tổng hợp trong bảng 3.1 cho thấy toàn bộ số ống mụi trường kiểm tra của cả hai lụ vắc xin do hai cụng ty sản xuất ủều õm tớnh sau 7 ngày theo dừi, ủạt tiờu chuẩn của quy trỡnh ủối chiếu và cũng phự hợp với các khuyến cáo về vắc xin thú y của OIE cũng như chỉ dẫn của nhà sản xuất.
3.1.2 Kết quả kiểm tra An toàn
Với mỗi lô vắc xin chúng tôi sử dụng 20 gà 4 tuần tuổi, khỏe mạnh, trong ủú 10 gà ủược tiờm vắc xin cỳm gia cầm vào dưới da cổ với liều 2ml/con và 10 gà ủối chứng khụng tiờm vắc xin.
Toàn bộ gà ủược theo dừi 21 ngày. Nếu trong quỏ trỡnh theo dừi gà phỏt triển bình thường không có dấu hiệu triệu chứng cục bộ, toàn thân và bất kỳ dấu hiệu khác thường nào thì kết luận lô vắc xin an toàn.
Bảng 3.2. Kết quả kiểm tra chỉ tiêu An toàn của vắc xin cúm gia cầm A/H5N1, chủng Re-5
Công ty nhập khẩu vắc xin VINAVETCO NAVETCO
Chỉ tiêu theo dõi Thí nghiệm ðối chứng Thí nghiệm ðối chứng
Số lượng gà thí nghiệm (con) 10 10 10 10
Tuổi dùng vắc xin (tuần) 4 0 4 0
Liều vắc xin sử dụng
(ml/con) 2 0 2 0
ðường tiêm vắc xin Tiêm dưới da 0 Tiêm dưới da 0
Thời gian theo dõi (ngày) 21 21 21 21
Biểu hiện lâm sàng Khỏe Khỏe Khỏe Khỏe
Số con có phản ứng 0 0 0 0
Tỷ lệ sống (%) 100 100 100 100
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Kết quả kiểm tra An toàn của vắc xin ủược tổng hợp trong bảng 3.2 cho thấy suốt thời gian sau khi tiờm và tại thời ủiểm 21 ngày sau khi tiờm vắc xin, gà thớ nghiệm cũng như gà ủối chứng của hai lụ vắc xin do hai hóng sản xuất ủều khỏe mạnh, không có biểu hiện bệnh, không có bất kỳ phản ứng phụ nào sau khi tiờm vắc xin. Tỷ lệ nuụi sống ở lụ thớ nghiệm và ủối chứng của cả hai lụ vắc xin của hai hóng Vinavetco và Navetco ủều ủạt 100%. Từ bảng 3.2 chỳng tụi cú thể kết luận vắc xin H5N1 Re-5 do hai hóng Vinavetco và Navetco nhập khẩu ủạt tiờu chuẩn An toàn ủối với gà trong ủiều kiện nuụi thớ nghiệm theo tiờu chuẩn tham khảo của OIE và cỏc tiờu chuẩn của nhà sản xuất ủăng ký sản phẩm.
3.1.3 Kết quả kiểm tra Hiệu lực
Với mỗi lô vắc xin chúng tôi tiến hành kiểm tra Hiệu lực trên 25 gà 4 tuần tuổi, khỏe mạnh, trong ủú 15 gà ủược tiờm vắc xin cỳm gia cầm vào dưới da cổ với liều 0,5 ml/con và 10 gà ủối chứng khụng tiờm vắc xin.
Toàn bộ gà ủược theo dừi 21 ngày, kết thỳc 21 ngày theo dừi chỳng tụi lấy mỏu chắt huyết thanh của từng gà ủể kiểm tra hiệu giỏ khỏng thể.
Theo tiêu chuẩn của OIE và hồ sơ của hãng sản xuất, gà tiêm vắc xin có hiệu giá kháng thể ít nhất 3,3 log2 thì kết luận vắc xin có hiệu lực bảo hộ.
Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng vi rút cúm H5 trong huyết thanh gà sau khi tiờm vắc xin ủược tổng hợp trong bảng 3.3 và so sỏnh hiệu giỏ khỏng thể trung bỡnh GMT của gà ủược tiờm vắc xin của hai cụng ty ủược thể hiện trong hình 3.1.
Từ kết quả nêu trong bảng 3.3 và hình 3.1, chúng tôi có thể rút ra một số nhận xột sau ủõy:
+ Gà ủối chứng của cả hai lụ vắc xin 100% khụng cú ủỏp ứng miễn dịch.
+ Tỷ lệ bảo hộ của gà ủược tiờm vắc xin H5N1 Re-5 của cụng ty Vinavetco ủạt 100% với hiệu giỏ khỏng thể trung bỡnh GMT là 7,1log2 tại thời ủiểm 3 tuần sau khi tiờm vắc xin. Tại thời ủiểm này, toàn bộ số mẫu kiểm tra ủều cú hiệu giỏ HI 4-8log2, chiếm tỷ lệ 100 % tổng số mẫu kiểm tra.
+ Tương tự như vậy, tỷ lệ bảo hộ của gà ủược tiờm vắc xin H5N1 Re-5
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Deleted: virus
của cụng ty Navetco tại thời ủiểm 3 tuần sau miễn dịch cũng ủạt 100% với hiệu giỏ khỏng thể trung bỡnh GMT là 6,9log2. Tại thời ủiểm này, hiệu giỏ HI 4-8log2 cũng chiếm tỷ lệ 100 % tổng số mẫu kiểm tra.
+ Hiệu giỏ khỏng thể trung bỡnh GMT của gà tại thời ủiểm 3 tuần sau tiờm vắc xin của cụng ty Vinavetco ủạt 7,1log2 và cao hơn hiệu giỏ khỏng thể trung bỡnh của gà ủược tiờm vắc xin của cụng ty Navetco (6,9log2), nhưng chờnh lệch này là khụng ủỏng kể.
Như vậy, so sánh với các tiêu chuẩn của OIE và hồ sơ của hãng sản xuất, mẫu vắc xin cúm gia cầm H5N1 Re-5 của hãng ðại Hoa Nông do công ty Vinavetco nhập khẩu và mẫu vắc xin cúm gia cầm H5N1 Re-5 của hãng Harbin do cụng ty Navetco nhập khẩu ủạt tiờu chuẩn về chỉ tiờu hiệu lực ủỏnh giá gián tiếp qua kháng thể kháng kháng nguyên H5 ở gà. Hiệu giá kháng thể trung bỡnh GMT của gà tại thời ủiểm 3 tuần sau tiờm vắc xin của cả hai cụng ty là tương ủương nhau.
Hỡnh 3.1. So sỏnh hiệu giỏ khỏng thể trung bỡnh GMT của gà ủược tiờm vắc xin của hai công ty Vinavetco và Navetco
Deleted: vacxin
Deleted: vacxin
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 40
Bảng 3.3. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng vi rút cúm H5 trong huyết thanh gà sau khi tiêm vắc xin
Hiệu giá kháng thể trung bình (log2)
0 1-3 4-8
Công ty nhập khâu vắc xin
Lô Tổng số mẫu
N % n % 4 5 6 7 8
GMT (log2)
Số mẫu có HGKT HI
≥ 4 log2
Tỷ lệ mẫu có HGKT HI ≥ 4 log2
(%)
TN 15 0 0 0 0 1 1 1 5 7 7,1 15 100
VINAVETCO
ðC 10 10 100 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
TN 15 0 0 0 0 1 0 3 6 5 6,9 15 100
NAVETCO
ðC 10 10 100 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Deleted: virus