Ứng dụng của phương pháp điện di

Một phần của tài liệu SINH học PHÂN tử và tế bào (Trang 22 - 25)

1. Trong y tế:

 Điện di protein huyết thanh:

Là một cách để theo dõi, phát hiện bất thường trên xét nghiệm, chẳng hạn như mức độ protein tổng số/ albumin máu bất thường, protein nước tiểu mức độ cao, nồng độ canxi cao, hoặc số lượng tế bào máu trắng hoặc đỏ máu thấp.

Khi các triệu chứng cho thấy một tình trạng viêm, bệnh tự miễn dịch, một bệnh nhiễm trùng cấp tính hoặc mãn tính, rối loạn thận hoặc gan, hoặc nguyên

nhân mất protein.

Khi một bác sĩ đang điều tra các triệu chứng cho thấy đau tủy, chẳng hạn như đau xương, thiếu máu, mệt mỏi, gãy xương không giải thích được, hoặc nhiễm khuẩn tái phát, để tìm sự hiện diện của một dải protein đặc trưng (globulin miễn dịch đơn dòng) trong vùng beta hay gama, nếu một dải sắc nét được nhìn thấy, bản chất của một globulin miễn dịch đơn dòng sẽ được xác nhận bởi điện di immunofixation.

 Điện di thuốc trị liệu

Tác dụng: chữa bệnh bằng cách đưa các ion vào cơ thể hoặc lấy các ion thuốc có hại ra khỏi cơ thể.

Ví dụ: Muốn lấy một ion có hại (Ca++) ra khỏi cơ thể thì ta đặt điện cực trái dấu vào vùng da nhiễm ion, điện cực đó sẽ hút các ion này ra khỏi cơ thể về phía nó.

Tác dụng của dòng điện một chiều:

+ Tác dụng giãn mạch: Làm tăng cường tuần hoàn và dinh dưỡng, tăng chuyển hóa chống viêm.

+ Tác dụng lên hệ thần kinh: Tại cực dương có tác dụng giảm đau, giảm co thắt, giảm trương lực cơ. Tại cực âm có tác dụng kích thích làm tăng trương lực cơ.

+ Tác dụng của ion thuốc: Không gây tổn thương da, không gây lây truyền các bệnh đường máu như khi tiêm.

2. Trong nông nghiệp:

Giúp phát hiện nhanh những tính chất nổi bật của lúa như mùi thơm, protein, amylose,…

Giúp các nhà chọn giống thực hiện công tác chọn lọc, tạo giống lúa thuần, giống lúa mới một cách nhanh nhất, rẻ tiền và hiệu quả cao.

Chọn ra được dòng Nếp Bè 1-2 có chiều dài hạt dài hơn giống đối chứng, năng suất cao hơn 15% và hàm lượng protein trên 10%

3. Trong công nghệ sinh học:

 Điện di agarose gel có nhiều ứng dụng như:

Ước lượng kích thước của các phân tử DNA sau khi thực hiện phản ứng cắt hạn chế (ví dụ: lập bản đồ hạn chế của DNA được tạo dòng…).

Phân tích các sản phẩm PCR (ví dụ: trong chẩn đoán di truyền phân tử hoặc in dấu di truyền…).

Phân tách DNA hệ gen đã được cắt hạn chế trước khi thẩm tích Southern, hoặc RNA trước khi thẩm tích Northern.

 Điện di được ứng dụng để kiểm tra độ tinh sạch và định lượng protein Do tính đơn giản của phương pháp, điện di được áp dụng phổ biến để đánh giá độ tinh sạch và định lượng protein. Ví dụ, điện di được áp dụng phổ biến để theo dõi protein sạch hay không mà phép thử nghiệm enzyme không làm được. Ngay cả khi có một trắc nghiệm enzyme tốt đi nữa, ta cũng nên kiểm tra các mẫu protein bằng điện di trong quá trình tinh sạch protein bởi vì phương pháp điện di cho phép chúng ta quan sát được các tạp chất có thể có.

Dựa vào tính linh động khác nhau của hầu hết các protein mà điện di thường được dùng để ước lượng khối lượng phân tử của các chuỗi polypeptide.

Để chuẩn độ thí nghiệm điện di, một số polypeptide có khối lượng phân tử đã được biết trước được đem chạy điện di đồng thời với các chuỗi polypeptide chưa biết, và tính linh động tương đối Rf của mỗi loài được xác định. Tính linh động

tương đối được tính bằng cách chia khoảng cách protein di chuyển cho khoảng cách của chất nhuộm di chuyển. Chất nhuộm là một phân tử nhỏ mang điện tích và có màu nên di chuyển nhanh hơn nhiều so với các protein. Do chất nhuộm có màu nên cho phép ta thấy được dấu vết của nó đi trước và từ đó ta tính được giá trị Rf ngay cả khi vệt dấu chạy không chính xác như nhau. Đối với phân tích này điều quan trọng là không để vệt dấu ăn màu đi ra khỏi gel, nếu không ta không thể tính được giá trị Rf. Với protein chuẩn nên có ít nhất năm loại protein biết khối lượng phân tử khác nhau để chúng tạo phân bố khắp trong gel để ta có thể ước lượng khối lượng protein chưa biết của mẫu.

 Phương pháp điện di mao quản nói chung và phương pháp điện di mao quản điện động học mixen nói riêng góp phần phân tích nhiều loại chỉ tiêu trong thực phẩm như đường, các aminoaxit, các peptide, chất béo, vitamin, các chất phụ gia, các chất độc vi lượng cả vô cơ và hữu cơ.

Một phần của tài liệu SINH học PHÂN tử và tế bào (Trang 22 - 25)

Tải bản đầy đủ (DOC)

(55 trang)
w