2.1 Nội dung, thời gian và địa điểm thực hiện
Nội dung 1: Xác định mật số khi phóng thả ong ký sinh Trichospilus pupivorus
ra ngoài các vườn dừa đê kiêm soát sâu dau đen Opisina arenosella.
Nội dung 2: Xác định chu kỳ khi phóng tha ong ky sinh Trichospilus pupivorus ra ngoài các vườn dừa đê kiêm soát sâu dau đen Opisina arenosella.
Thời gian thực hiện thí nghiệm từ tháng 09 năm 2022 đến tháng 01 năm 2023.
Tiến hành thực hiện thí nghiệm ở các vườn dita tại tỉnh Bến Tre.
2.2 Vật liệu và dụng cụ sử dụng trong nghiên cứu
Ong ký sinh nhộng 7 pupivorus được nhân nuôi trong phòng thí nghiệm.
Các dụng cụ nhân nguồn: hộp nhựa hình chữ nhật (25 x 15 x 8,5 cm), tuýp nhựa (1,5 x 5 cm), nắp chai nhựa, mật ong 30% phanh gap côn trùng, kéo, bút, giấy note, hộp nhựa tròn 500 mL, hộp nhựa tròn 160 mL, bông gòn, khăn giấy.
Dụng cụ phóng thả: kềm bam ghim, dao cắt giấy, hộp nhựa 100 mL, dây chun, thùng giấy 35 x 25 x 25.
Hinh 2.3 Dụng cụ thí nghiệm
A. Vật liệu phóng thả; B Hộp 100 mL; C. Vật liệu lấy chỉ tiêu 2.3 Điều kiện khí hậu
Bảng 2.1 Đặc điểm thời tiết từ tháng 07/2022 đến tháng 01/2023 tại tỉnh Bến Tre
Tháng/năm _~ = tim l0 Tổng oe ome arr oe
(giờ) (%)
07/22 161,4 27,6 190,8 83 08/22 183,4 27A 193,6 83 09/22 171,1 27,2 250,4 85 10/22 156,7 26,8 359,8 86 11/22 155,4 272 188.4 84 12/22 207,7 26.4 216 78 01/23 246,9 26,3 30,2 16
Bang 2.1 cho thấy tổng số giờ nắng thấp nhất vào thang 11 với 155,4 giờ và tháng 1 năm 2023 có tổng số giờ nắng co nhất với 246,9 giờ. Nhiệt độ trung bình giao động trong khoảng 26,3 °C — 27,6 °C giao động không cao , tháng 12 năm 2022 đến tháng 1 năm 2023 lượng mưa rất thấp với tổng lượng mưa 27,6 và 30,2 mm, từ tháng 7 đến tháng 11 năm 2022 có lượng mưa rất lớn rất lớn, cao nhất lên đến 359,8mm vào tháng 10. Độ 4m trung bình giao động trong khoảng 76 — 83% độ âm trung bình giao động
không lớn.
2.4 Phương pháp nghiên cứu
2.4.1 Nhân nguồn ong ký sinh nhộng Trichospilus pupivorus
Nguồn ong ký sinh nhộng Trichospilus pupivorus được cung cấp từ Chi cục Bao vệ Thực vật tỉnh Bến Tre và nhân nuôi trên ký chủ phụ theo phương pháp của Bộ môn
Bảo vệ Thực Vật. Sâu sáp Galleria mellonella L. được dùng làm kí chủ phụ cho qua trỡnh nhõn nuụi ong ký sinh nhộng 77ichospiẽus pupivorus. Sõu sỏp sau một thời gian
được nuôi trong phòng thí nghiệm bằng nguồn thức ăn nhân tạo, khi đã trưởng thành sẽ được cho vào hộp nhựa chữ nhật (25 x 15 x 8,5 cm) có nắp lưới thông khí và lót thêm khăn giấy dùng dây chun cột chặt để có định nắp hộp.
Sau 6 ngày sâu sẽ hóa thành nhộng hoàn toàn, tiếp theo đó sẽ dùng kéo cắt nhộng ra khỏi kén dé lay nhộng sử dụng cho việc nhân nuôi ong 7: pupivorus. Cho ong 7s pupivorus nguồn ký sinh lên nhộng sâu sáp G. mellonella (ki chủ phụ), sau đó cho vào hộp nhựa hình chữ nhật (25 x 15 x 8,5 em) có nắp lưới thông khí và bổ sung
thêm bông gòn được tam mật ong 30% vào trong hộp, dùng dây chun cột chặt dé cô định nắp hộp.
Sau 13 đến 14 ngày kể từ ngày ký sinh tiến hành lay nhộng đã ký sinh ra và lựa chọn giữ lại một số dé vào hộp nhựa tròn 160 mL dùng làm nguồn cho lần ký sinh tiếp theo, còn lại lưu trữ vào các hộp 100 mL có nắp đục 16 nhỏ thông khí. Sau 17 đến 18 ngày ké từ ngày ký sinh, ong 7. pupivorus thành trùng sẽ phá bỏ lớp vỏ ngoài của nhộng
kí chủ từ bên trong và chui ra ngoài.
2.4.2 Nghiên cứu mật số phóng thả ở điều kiện ngoài đồng
Phương pháp thực hiện
Tiến hành thả trên 4 vườn, vườn dita được chon dé tiến hành phóng thả thiên địch phải tuân thủ các điều kiện đều trồng giống dừa xiêm, độ tuôi từ 7 — 10 năm tuổi, mật độ cây trên vườn cây cách nhau tối thiểu 5m, diện tích tối thiêu mỗi vườn 1,5 ha, các vườn cách nhau tối thiểu 5 km.
Tại mỗi vườn tiến hành treo các hộp chứa ong chuyên dụng phía dưới tán dừa (ở độ cao khoảng 1,5 —2 m, các điểm phóng thả được phân bố đều trong vườn thí nghiệm.
Mỗi vườn dừa thí nghiệm được tiến hành phóng thả bốn lần, mỗi lần thả cách
nhau 30 ngày.
Chọn 4 mật số phóng thả cho mỗi vườn thí nghiệm như sau:
ằ - Nghiệm thức 1: Khụng phúng thả.
* _ Nghiệm thức 2: Phóng thả 1000 ong ký sinh nhộng/1000 m dừa mỗi lần thả, thả 4 lần, mỗi lần cách 30 ngày.
* - Nghiệm thức 3: Phóng thả 3000 ong ký sinh nhộng/1000 m? dừa mỗi lần thả, thả 4 lần, mỗi lần cách 30 ngày.
* - Nghiệm thức 4: Phóng thả 5000 ong ký sinh nhộng/1000 m? dita mỗi lần thả, thả 4 lần, mỗi lần cách 30 ngày.
2.4.3 Nghiên cứu chu kỳ phóng thả ở điều kiện ngoài đồng
Phương pháp thực hiện
Tiến hành thả trên 3 vườn, vườn dừa được chon để tiễn hành phóng thả thiên địch phải tuân thủ các điều kiện đều trồng giống dừa xiêm, độ tuôi từ 7 — 10 năm tuổi, mật độ cây trên vườn cây cách nhau tối thiểu 5m, diện tích tối thiểu mỗi vườn 1,5 ha, các vườn cách nhau tối thiểu 5 km.
Tại mỗi vườn tiến hành treo các hộp chứa ong chuyên dụng phía dưới tan đừa (ở độ cao khoảng 1,5 — 2 m, các điểm phóng thả được phân bố đều trong vườn thí nghiệm với mật số thiên địch phóng tha 5000 ong ký sinh/1000 m7 dừa.
Chọn 3 khoảng cách thời điểm các lần phóng thả như sau:
ằ - Nghiệm thức 1: Khụng thả ong ký sinh
* Nghiệm thức 2: Thả 4 lần (cách 30 ngày), mỗi lần thả 5000 ong ký sinh/1000 m? dừa.
* Nghiệm thức 3: Tha 10 lần (cách 10 ngày), mỗi lần thả 2000 ong ký sinh/1000 m' dừa.
2.4.4 Chỉ tiêu theo đõi bao gồm
Chỉ tiêu được ghi nhận trước khi phóng thả và sau 15; 30; 45; 60; 75; 90; 105;
120 ngày ké từ khi phóng thả thiên địch, theo phương pháp thu mẫu và điều tra mật số sâu đầu đen, thiên địch.
- Tỷ lệ tàu lá bị hại (%) = (số tàu lá bị hại / tổng số tàu lá điều tra) x 100 Phân cấp đánh giá mức độ hại như sau:
Co: Tau lá không bị hại
C¡: Tàu lá có < 20% lá chét bị hại Co: Tàu lá có 21 — 40% lá chét bị hại C3: Tàu lá có 41 — 60% lá chét bị hại C4: Tàu lá có 61 — 80% lá chét bị hại
Cs: Tàu lá có > 80% lá chét bị hại
- Chi số hại (%) = [(Nix 1) + (N2 x 2) +... (Ns x 5)]/(Nx 5) x 100
Trong đó:
Ni là số tàu lá bị hại ở cấp 1
Na là số tàu lá bị hại ở cấp 2 Na là số tàu lá bị hại ở cấp 3 Ni là số tau lá bị hại ở cấp 4 Ns là số tau lá bị hại ở cấp 5
5 là cấp hại cao nhất của thang phân cấp N là tổng số tàu lá điều tra.
- Mật số ấu trùng sâu đầu den hại dừa (con/30 lá chét) - Mật số nhộng sâu đầu đen hại dừa (nhộng/30 lá chét)
- Hiệu quả kiểm soát (%) tại thời điểm 60, 90, 120 ngày sau phóng thả Kết quả thu được theo công thức Henderson-Tilton như sau:
Ta x Cb
0⁄41 a
HOO) = (1- Tee ) x 100%
Trong đó:
H (%): khả năng kiểm soát tính theo phan trăm
Ca: số lượng cá thể côn trùng sống ở công thức đối chứng sau xử lý Cb: số lượng cá thé côn trùng sống ở công thức đối chứng trước xử lý Ta: số lượng cá thé côn trùng sống ở công thức thí nghiệm sau xử ly
Tb: số lượng cá thé côn trùng sống ở công thức thí nghiệm trước xử lý 2.5 Phương pháp xử lý số liệu
Sử dụng phần mềm Microsoft Excel 2019 tính toán và vẽ đồ thị.
Anova trắc nghiệm phân hang bằng phần mềm SAS 9.1
ơ-.ằ-