2.1 Thời gian, địa điểm và nội dung nghiên cứu
Thí nghiệm được thực hiện từ tháng 5 năm 2022 đến tháng 10 năm 2022 tại phòng thí nghiệm Trung tâm Nông nghiệp Ứng dụng Công nghệ cao tỉnh Bến Tre.
Nội dung 1: Điều tra hiện trang sâu đầu den (Opisina arenosella) tai 3 xã Tan Thanh Bình, Tân Phú Tây và Tân Binh, huyện Mỏ Cay Bắc tỉnh Bến Tre.
Nội dung 2: Thí nghiệm nghiên cứu đánh giá hiệu lực kiểm soát sâu đầu đen tuổi 2 và tuổi 5 của 6 hoạt chất Azadirachtin, Emamectin benzoate, Dinotefuran,
Bacilluss thuringiensis var. Kurstaki, Flubendiamide, Petroleum Spray Oil 99%, trong phong thi nghiém.
Nội dung 3: Thí nghiệm xác định tac động ảnh hưởng của 2 hoạt chất Emamectin benzoate và Flubendiamide ấu trùng bọ đuôi kìm tuổi 4 ở các thời điểm thả sau khi xử lý thuốc 1 giờ, sau xử lý thuốc 24 giờ và sau xử lý thuốc 72 giờ trong điều kiện phòng
thí nghiệm.
2.2 Vật liệu nghiên cứu
- Bọ đuôi kim Chelisoches sp., sâu đầu den O. arenosella.
-Dụng cụ nhân nuôi: Lá cây dừa, hộp nhựa có kích thước 28,5 x 17 x 9,2 cm,
lồng mica 30 x 30 x 25 em.
-Dung cụ thí nghiệm: hộp nhựa tròn đường kính 10 cm, cao 6,5 cm (500 mL),
hộp nhựa 17 x 11,6 x 5,6 cm, kẹp gap, bao tay, cân tiểu ly, kẹp gap côn trùng, hộp nhựa kích thước 28,5 x 17 x 9,2 cm, số tay ghi chép.
-Dụng cụ điều tra: dao, kéo, liềm, dây, bao, bút và số ghi chép.
Hình 1.7 Dụng cụ điều tra.
- Điều kiện thí nghiệm: Nhiệt độ và ầm độ phòng thí nghiệm (28 + 2°C, 75 + 5%), thời gian chiếu sáng (L:D) là 12 giờ.
2.3 Phương pháp nghiên cứu
2.3.1 Điều tra hiện trạng sâu đầu đen hại dừa tại Bến Tre
Phương pháp thực hiện
Tại huyện Mỏ Cày Bắc, tỉnh Bến Tre điều tra ngẫu nhiên 30 vườn mỗi xã 10 vườn để nghiên cứu hiện trạng sâu đầu đen gây hại, mật độ au trùng và mật độ nhộng sâu đầu đen hại dừa, mỗi vườn có điện tích tối thiểu 5000 m?.
Mỗi vườn điều tra 5 điểm ngẫu nhiên trên 2 đường chéo góc, mỗi điểm điều tra 10 cây. Trên mỗi cây thu ngẫu nhiên 30 lá chét (các lá nằm giữa tàu dừa), mỗi lá chét được kiểm tra dưới kính lúp cầm tay dé xác định số lượng từng giai đoạn phát triển của sâu đầu đen hại dừa (sâu non, nhộng). Trên vườn ghi nhận số lượng cây dừa bị gây hại, số lượng tàu lá bị hại, đánh giá các cấp độ hại theo tiêu chuẩn thang phân cấp (5 cấp hại)
của Cục BVTV (2020).
Chỉ tiêu theo dõi:
- Tỷ lệ (%) số cây bị hại trên vườn: = (số lượng cây bị sâu đầu đen hại dừa gây
hại/50) x 100
- Tỷ lệ (%) tàu lá bị hại = (số tàu lá bị hại/tổng số tàu lá điều tra) x 100 Phân cấp đánh giá mức độ hại như sau:
CO: Tàu lá không bị hại.
Cl: Tàu lá có < 20% lá chét bi hại.
C2: Tàu lá có 21 - 40% lá chét bị hại.
C3: Tàu lá có 41 - 60% lá chét bị hại.
C4: Tàu lá có 61 - 80% lá chét bị hại.
C5: Tàu lá có > 80% lá chét bị hại.
- Chỉ số hại (%) = [NI x 1) + (N2 x 2) +... (N5 x5)]/(ẹx5) x 100
Trong đó:
NI là số tàu lá bị hại ở cấp 1
N2 là số tàu lá bị hại ở cấp 2 N3 là số tàu lá bị hại ở cấp 3 N4 là số tàu lá bị hại ở cấp 4 N5 là số tàu lá bị hại ở cấp 5.
5 là cấp hại cao nhất của thang phân cấp N là tổng số tàu lá điều tra
- Mật số sâu non sâu đầu đen hại dừa (con/30 lá chét) - Mật số nhộng sâu đầu đen hại dừa (nhộng/30 lá chét) 2.3.2 Nhân nguồn sâu dau den hại dừa O. arenosella
Sâu đầu đen (O. arenosella) được thu tại vườn dừa có GPS 10.169879N 106.351745E tại xã Tân Thành Bình, huyện Mỏ Cày Bắc, tỉnh Bến Tre. Sâu đâu đen được nhân nuôi trong hộp côn trùng có kích thước 28,5 x 17 x 9,2 cm có san lá dừa.
Tiến hành cắt lá dừa già về bỏ vào hộp hai ngày thay 14 đừa một lần nhằm đảm bảo có đủ nguồn thức ăn cho sâu đầu đen (trong điều kiện nhiệt độ 28 + 2°C, âm độ 70 + 5%, thời gian chiếu sáng 12 giờ) cho đến khi vũ hóa và sinh sản đủ số lượng F1 để thực hiện
thí nghiệm.
2.3.3 Nhân nuôi bọ đuôi kìm.
Bọ đuôi kìm (C. variegatus) được thu tại vườn có GPS 10.168936N 106.351043E
tại xã Tân Thành Bình, huyện Mỏ Cay Bắc, tỉnh Bến Tre. Cho các cá thé bọ đuôi kìm
thu được vao hộp nhựa (kích thước 28,5 x 17 x 9,2 cm) có lá dừa khô va mụn dừa ở
trong, có lưới thông khí và cho sâu đầu den hai dita vào dé làm thức ăn. Nuôi cho đến khi bọ đuôi kìm hóa thành trùng và đẻ trứng. Tiếp tục nhân nuôi từ trứng dé thu được bọ đuôi kìm tuổi 4. Hằng ngày kiểm tra và cho thêm sâu vào dé dam bảo đủ thức ăn cho
bọ đuôi kìm.
2.3.4 Đánh giá hiệu lực trừ sâu đầu đen của một số thuốc BVTV trong điều kiện
phòng thí nghiệm
2.3.4.1 Thí nghiệm đánh giá hiệu lực trừ sâu đầu đen tuéi 2 của một số thuốc BVTV
trong phòng thí nghiệm
Chuẩn bị lá dừa cho thí nghiệm, lá được thu về từ vườn chưa phun thuốc ở Bến Tre, lá được lau sạch lại với nước và dé khô tự nhiên, kế tiếp cắt lá dừa với chiều dài 10 - 13 cm và nhúng lá vào dung dịch có hoạt chất tương ứng với từng nghiệm thức trong 3 giây, sau đó dùng kẹp vớt ra dé khô tự nhiên từ 15 - 25 phút rồi xếp đều vào các hộp
nhựa vuông kích thước 17 x 11,6 x 5,6 cm, mỗi hộp nhựa vuông chứa 7 14 dừa đã nhúng
dung dịch.
Thí nghiệm đánh giá hiệu lực phòng trừ các loại thuốc trên sâu đầu đen được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố, với 7 nghiệm thức và 3 lần lặp lại. Tiến hành cho sâu đầu đen tuổi 2 vào hộp nhựa đã chuẩn bị sẵn. Mỗi nghiệm thức gồm 3 hộp nhựa, mỗi hộp nhựa chứa 10 au trùng sâu đầu đen. Theo dõi thí nghiệm vào thời điểm
12, 24, 48 và 72 giờ sau xử lý.
Chỉ tiêu theo dõi
-Hiệu lực thuốc được tính theo công thức của Abbott:
-Hiệu lực trừ sâu (%) = ((Ca - Ta)/ Ca) x 100
Trong đó:
Ta: Số ấu trùng sống ở nghiệm thức sau xử lý
Ca: Số ấu trùng sống ở nghiệm thức đối chứng sau xử lý
2.3.4.2 Thí nghiệm đánh giá hiệu lực trừ sâu đầu đen tuỗi 5 của một số thuốc BVTV
trong phòng thí nghiệm
Thí nghiệm thực hiện tương tự như trên ấu trùng sâu đầu đen tuổi 2 nhưng thay
băng âu trùng sâu đâu đen tuôi 5.
Bảng 2.1 Các nghiệm thức trong thí nghiệm đánh giá hiệu lực gây chết ấu trùng sâu đầu
đen
Nghiệm thức Tên hoạt chất/chủng Liều lượng sử dụng
i Azadirachtin 5 mL/L nước 3 Bacilluss thuringiensis var. kurstaki 2 g/L nudc
3 Dinotefuran 0,5 g/ L nước
4 Emamectin benzoate 0,5 g/L nước 5 Flubendiamide 0,4 g/L nude 6 Petroleum Spray Oil 99% 10 mL/L nước
7 Nước (Đối chứng) -
2.3.5 Thí nghiệm xác định tác động của một số thuốc BVTV đến ấu trùng BĐK tuổi 4 ở các thời điểm sau khi xử lý thuốc
2.3.5.1 Thời điểm thả BĐK sau khi xử lý thuốc 1 giờ
Thí nghiệm được bố trí theo kiểu đơn yếu tố hoàn toàn ngẫu nhiên, 3 nghiệm thức (2 loại thuốc BVTV có hiệu quả nhất ở thí nghiệm mục 2.3.4 là Emamectin benzoate, Flubendiamide va 1 đối chứng nước) và 3 lần lặp lại. Mỗi nghiệm thức sử dụng 50 ấu trùng sâu đầu đen và theo dõi 20 cá thé bọ đuôi kìm tuổi 4.
Chuẩn bị lá dừa cho thí nghiệm, lá được thu về từ vườn không phun thuốc ở Bến Tre, lá được lau sạch lại với nước và để khô tự nhiên, kế tiếp cắt lá đừa với chiều dài 10
— 13 cm và nhúng lá vào dung dịch có hoạt chất tương ứng với từng nghiệm thức trong 3 giây, sau đó dùng kẹp vớt ra đề khô tự nhiên từ 15 - 25 phút rồi xếp đều vào các hộp nhựa vuông kích thước 17 x 11,6 x 5,6 cm, mỗi hộp nhựa vuông chứa 7 lá dừa đã nhúng dung địch. Sau đó thả 10 ấu trùng sâu đầu đen tuổi 2, 10 ấu trùng sâu đầu đen tuổi 3, 10 ấu trùng sâu đầu đen tuổi 4, 10 au trùng sâu đầu đen tuổi 5 và 10 ấu trùng sâu đầu đen tuổi 6 vào mỗi nghiệm thức và sau 1 giờ tiến hành phóng thích 20 cá thể (10 cặp) bọ đuôi kìm tuổi 4. Thí nghiệm được theo dõi sau 12, 24, 48 và 72 giờ.
Chỉ tiéu theo doi
- Số bọ đuôi kìm chết hàng ngày tại các thời điểm theo đõi (con/ngày).
- Hiệu lực thuốc đối với bọ đuôi kìm được tính theo công thức của Abbott:
Khả năng gây chết bọ đuôi kìm (%) = ((Ca-Ta)/Ca) x 100
Trong đó:
Ta: Số bọ đuôi kìm sống ở nghiệm thức sau xử lý.
Ca: Số bọ đuôi kìm sống ở nghiệm thức đối chứng sau xử lý.
2.3.5.2 Thời điểm tha BĐK sau khi xử lý thuốc 24 giờ
Thí nghiệm tiến hành tương tự thí nghiệm thả bọ đuôi kìm sau khi xử lý thuốc 1 giờ nhưng thả bọ đuôi kìm sau khi xử lý thuốc 24 giờ.
2.3.5.3 Thời điểm thả BĐK sau khi xứ lý thuốc 72 giờ
Thí nghiệm tiến hành tương tự thí nghiệm thả bọ đuôi kìm sau khi xử lý thuốc 24 giờ nhưng thả bọ đuôi kìm sau khi xử lý thuốc 72 giờ.
2.4 Phương pháp xử lý số liệu
Toàn bộ số liệu trong thí nghiệm được xử lý bằng Microsoft Excel và xử lý thống kê theo ANOVA và trắc nghiệm phân hạng LSD bằng phần mềm Rstudio.
CHƯƠNG 3