a. Nguyên liệu và hóa chất
- Nghệ vàng cú thu hoạch ở Bình Dương được rửa sạch, xắt lát, sấy khô nhẹ trong mắt va trữ dé sử dụng trong các thí nghiệm.
- Bột curcuminoid tinh (Trung tim Sâm & Dược liệu TP Hỗ Chí Minh) - Ethanol 96 tỉnh (Trung Quốc).
- Bột rau câu Việt Xô GOLD Agar Agar (Công ty cô phân Việt Xô).
BỊ
4d vá @©á¿ tt=e
ATA SOmaeen,
Hình 2.2: Bội rau câu agar
b. Thiết bị
Máy đo quang phổ hấp thu VIS (Thermo Scientific - Helios Epsilon).
Máy đo màu (Minolta CR-300 Series).
“May đo độ im (Sartorius CPA2245).
2.4. Phuong pháp nghiên cứu
2.4.1. Đánh giá cảm quan
Mẫu sản phẩm được quan sát va đánh giá các yếu tố sau trong điều kiện thưởng
tại phỏng thí nghiệm:
- Độ đồng nhất: sự đồng đều trong toàn bộ khói sản phẩm, không có lợn con,
hay các hat rin hoặc các cặn, tạp không tan.
- Độ mịn: Mật cắt sản phẩm min, lang, bóng, đông déu, không gỏ ghẻ.
- Độ trong: quan sat độ trong của san phẩm ở điều kiện thường trong phòng thi
nghiệm,
29
GVHD: TS. Lê Thị Hồng Nhan SVTH: Phan Minh Hạnh
- Độ dai: sản phim không bị vờ khi cảm nằm hay lấy ra khỏi khuôn, cắt mẫu.
- Mau sắc: ghi nhận mau sắc của san phẩm.
- Mùi: ngứi và ghi nhận mùi của sản phẩm.
2.4.2. Phương pháp đo độ lún kim
a. Nguyén tắc:
Đánh giá độ cứng của nén sản phẩm bằng độ lún sâu của kim thả rơi tự do vào
nên.
b. Cach thực hiện:
Dùng một thanh kẹp giữ chặt ông trụ thủy tỉnh thăng đứng, đài 56cm; đặt sao cho tiếp xúc bẻ mặt mẫu. Cho mẫu thạch cần đo đặt ngay phía dưới ống trụ. Sử dụng kim với khối lượng m = 0,1151g. Dat kim sao cho dau nhọn của cây kim hướng xuống dưới, chú ý giữ cây kim sao cho hướng thang đứng, ôn định tại một mức nhất định (vi các lẫn khác thí nghiệm tiếp theo cũng phải cế định kim ở mức đó để có kết qua so sánh chính xác). Khi cây kim đã ổn định thi ta cho nó rơi theo
đường ống mao dẫn ghim vào mẫu thạch. Dùng thước đo chiều dai kim bị lún trong sản phẩm.
Kim Gid, kẹp
Ông trụ thủy tính
Mẫu đo
mg...
Hình 2.3: Sơ dỏ hé thống đo độ lún kim
Mỗi mẫu thạch tương ứng với một ty lẻ xác đỉnh. thí nghiệm được lập lại 3 lan tại 3 vị tri khác nhau trên cùng một mẫu.
30
GVHD: TS. Lê Thị Hong Nhan SVTH: Phan Minh Hạnh
2.4.3, Phương pháp đo mau theo hệ mau CIE
a. Nguyén tắc
Dựa trên cơ sở ánh sáng phan xạ tir bắt cứ bẻ mặt có màu nado cũng có thé quy vẻ hỗn hợp của ba tia mau: đó (red); xanh lá (green); xanh đa trời (blue) với ty lệ thích hợp. Các mau được đo bằng phương pháp kích thích ba giá trị màu gidng như cam nhận của mắt người hoặc đo phô phản xạ.
Trong qua trinh do ánh sáng được chiều tới mẫu đo. Ánh sáng phản xạ đi qua một hệ thông ông kính vả tới bộ cam biến, bộ cảm biến nảy dùng dé đo cường độ ảnh sáng của moi mau va chuyén tín hiệu cam nhận được cho một máy tinh. Tại đó, các tín hiệu này được đối chiếu với giá trị cảm nhận tương ứng của 3 loại tế bảo hình nón trong mắt người được xác định theo chuẩn quan sat của CIE.
- Không gian màu
Hai không gian màu thuộc hệ thong CIE được sử dụng phé biến nhất là CIE -
Lab va CIE - LCh [28, 29]
-
` s
1x
Hình 2.4: Không gian máu CEI Lab và CEL LCh
® Không gian màu CIE - Lab
Đề thuận lợi cho việc tính toán va so sánh các mau với nhau, năm 1976 CIE giới thiệu một hệ thông sắp xép màu sắc CIELab. Trong đó sử dụng 3 thông số:
L: độ sảng.
a! tọa độ mau trên trục đó- lục.
b: tọa độ mau trên trục vàng- lam.
GVHD: TS. Lê Thị Hỗng Nhan H SVTH: Phan Minh Hạnh
Giao điểm của 2 trục a và b là điểm vô sắc (đen. ghi, trắng tùy thuộc vào độ sáng). Những đoạn có cùng tông mau trong mặt phang ab năm trên một đoạn thang kéo dai từ điểm trung tâm ra phía ngoài. Trục độ sáng L có giá trị tir 0, ứng với mau den đến 100 ứng với màu trăng. Những màu có cùng độ sáng năm trên mặt phăng song song với mặt phang giấy
&k‹ bia. are
Không gian màu CEILab
° Không gian màu CIE - LCh
Không gian màu LCh sử dụng chung biéu đồ với không gian màu Lab nhưng
thay vi sử dụng trục tọa độ vuông thì nó lại sử dụng trục tọa độ hình trụ.
L: thể hiện độ sang, có giá trị 0-100 (gốc tọa độ là 50).
C: thể hiện cường độ màu.
h: thé hiện góc màu, liên quan đến tông màu.
Góc màu được biểu điển trên vòng tròn màu, theo chiều ngược kim đồng
hd, có những giá trị đặc biệt sau: 0 hay 360°; màu đỏ; 90°: màu vàng; 180°;
mau xanh lục. 270°: màu lam, .
Cac giá trị C và h được xác định từ a va b theo công thức:
Cưởng độ màu C = Va’ +b?
|
Góc mau # = arctan | —
La
b. Cách thực hiện:
Tiến hành: đo mau bang máy Minolta hiệu CR-300, Nhật Bản. Sử dụng
không gian mau CIELab.
GVHD: TS. Lẻ Thị Hang Nhan SVTH: Phan Minh Hanh
Cat mẫu sản phẩm sao cho độ day trong khoảng 1,00 em. Các kích thước
khác lớn hơn đường kinh do của thiết bị (khoáng 0.5 cm). Dat mẫu vật lên nén gạch
men trắng. sau đó đặt phía trên một lam kính thủy tỉnh. Đầu đo của thiết bị dat sát
vào lam kính thúy tinh và vuông góc với mặt nén. Do 3 lân, so sánh va lay giá trị
trung binh.
2.4.4. Do quang phô hap thu
Tiền hành trên máy quang phô hap thu Helios Epsilon.
Mau sản phẩm được hòa tan trong dung môi Ethanol với nông độ thích hợp.
Lọc dé loại bó cặn không tan nêu can.
- Xác định bước sóng hấp thu cực đại: Quang phổ hắp thu của dung địch
được quét từ 350 đến 700nm. Quan sat phd, xác định bước sóng hap thu cực đại.
- Do độ hap thu tại bước sóng xác định: dung địch được cho vào cuvet. đặt
trong máy. Cải dat bước sóng hap thu va đọc giá trị.
1.4.5. Xác định phân bố kích thước hạt
Nguyên tắc: Khi anh sáng va đập vào các hat, sự phân tán xảy ra. Anh sáng
được phân tan theo mọi hướng nhưng các hạt lớn bị phân tán phía trước, con các hạt
nhỏ hơn thì bị phân tán ở cạnh và phía sau. Đèn Vonfam, với bước sóng ngắn hơn, thích hợp hơn tia laser He-Ne có bước sóng dài hơn để tạo các mẫu phân tán tốt trong các hạt nhỏ hơn. Bước sóng cảng ngắn thì càng đo được các hạt cảng nhỏ.
Đường kính hạt được tính toán đựa vào thuyết Mie theo mẫu phân tán quan sát
được.
Thiết bị: Kết quả đo DLS được thực hiện trên máy Horiba LA 920 tại phòng thí nghiệm Trọng điểm Quốc gia- Trung tâm Vật liệu Polymer & Composit- Đại học
Bách Khoa TP. Hỗ Chí Minh.
2.4.6. Xác định bề mặt sản phẩm
Nguyên tắc. Kính hiển vi điện tử quét (Scanning Electron Microscope. viết tắt
SEM) là một loại kính hiển vi điện tử có thé tạo ra ảnh với độ phân giải cao của bè mặt mẫu vật sử đụng chùm điện tử hẹp quét trên bẻ mặt mẫu. Việc tạo ảnh của mẫu
vật được thực hiện thong qua việc ghi nhận và phân tích các bức xạ phát ra tir tương
GVHD: TS. Lê Thị Hong Nhan SVTH: Phan Minh Hạnh
tác của chim điện tử với bẻ mặt mẫu vật.
Thiết bị: Mẫu được đo SEM bang thiết bị Jeol JSM-7401F tại phòng thí nghiệm hiển ví điện tử quét - Viện khoa học và công nghệ Việt Nam.
2.5. Xôi dung thực hiện
2.5.1. Khao sát hệ nền thạch agar
2.5.1.1. Khao sát anh hirdng của tỷ lệ nước/bột agar
Cho vao một lượng bột agar được cân chỉnh xác m (g) vào cốc thủy tinh. Sau đó cho V (ml) nước tương ứng với một tỷ lệ (nước/bột agar) cần khảo sát rồi dun
sôi, khuấy đều. Khi bột agar tan hoản toàn trong nước thành một hỗn hợp trong sánh. d6 hỗn hợp này vào khuôn chờ hỗn hợp nguội và đông đặc hoàn toàn. Bao gói kin mẫu, trữ trong tủ lạnh ở 10 °C hay đem đánh giá các tinh chất của sàn phẩm
theo cảm quan. độ lún kim.
Các khảo sát được tiên hanh lần lượt tại các tỷ lệ nước/bột agar: 30/1; 40/1;
50/1; 60/1; 70/1; 80/1; 90/1; 100/1; 110/1; 120/1 (ml/g).
2.5.1.2. Khao sát ảnh hưởng của nhiệt độ
Cách tiến hành tương tự như trên. Khi nước sôi khuấy nhanh hệ, đo nhiệt độ khi hệ sôi và tan hoàn toàn. Đề hỗn hợp vào khuôn, cắm nhiệt kế vào đo nhiệt độ bắt đâu đông đặc và kết thúc đông đặc của hỗn hợp.
Các tỷ lệ hệ nền được thay đối như trên.
2.5.2. Chuẩn bị dịch nghệ dạng huyền phù
2.5.2.1. Tạo dich nghệ huyén phù
34
GVHD: TS. Lê Thị Héng Nhan SVTH: Phan Minh Hạnh
Hình 2.5: Sơ dé tách curcuminoid từ nghệ vàng Curcuma longa L, Bình Dương
Bột nghệ vàng được chiết bằng dung dịch EtOH ở nhiệt độ 40-70°C, với ti lệ
bột : dung môi EtOH thích hợp và lọc tách bã. Dịch chiết được loại bớt một phan dung môi bằng cô quay chân không. Dịch nghệ được sục hơi nước ở áp suất cao.
Tinh đầu được lôi cuốn theo hơi nước ra ngoài. Nhựa và một phan curcuminoid tách ra và bam dưới đấy bình. Sau khi sục và tách, thu được dịch huyền phù microcurcuminoid. Dich nay được trừ lạnh khoảng 10°C trong khoảng 24 gid. Sau khi trữ lạnh cũng thu được một phan curcumin vả nhựa kích thước to lắng xuống day bình. Gan lay phản dịch huyền phù lơ lửng bên trên dé sử dụng cho các nghiên cứu tiếp theo,
35
GVHD: TS. Lẻ Thị Hồng Nhan SVTH: Phan Minh Hanh
Dich huyền phủ đánh giá cảm quan, nông độ curcumin, phan bộ và hình thái
huyền phù (DLS, SEM).
2.5.2.2. Xác định nông độ huyén phù
a. Nay dung đưởng chuân.
Cân lượng curcuminoid tỉnh. hòa tan va định mức bing EtOH dé có các nồng độ xác định. Do độ hap thu tại bước sóng hap thu A=425nm. Từ các kết quả thu được, xây dựng biểu thức liên hệ: C= f(A).
b. Xác định nông độ curcuminoid trong mau: