Các con lai của từng cặp lai được thu lá sau khi cấy 20 ngày, tách chiết DNA để kiểm tra candidate gen xa5 bằng cặp mồi xa5add35 thiết kế có kích thước sản phẩm PCR là 179bp. Xác định cá thể con lai mang candidate gen xa5 trong quần thể con lai BC1F1, để chọn con lai tiếp tục phục vụ cho lai tạo BC2F1.
3.4.1. Cặp lai An dân 11 x Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2
Ở cặp lai An Dân 11 x Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 (Ký hiệu R53) chúng tôi kiểm tra 7 con lai thế hệ BC1F1. Qua kết quả điện di sản phẩm PCR, cho thấy có 3 cá thể mang gen giống với bố, tương đương với đối chứng dương (IRBB5) với kích thước băng DNA tương đương 179bp, đó là các mẫu: 1522, 1520, 1521.
Các cá thể này sẽ được chọn để làm nguồn vật liệu phục vụ cho lai tạo BC2F1.
Hình 3.10. Kết quả điện di sản phẩm PCR các con lai BC1F1 của tổ hợp lai An dân 11 x Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 với cặp mồi xa5add35
Ghi chú: M45: An Dân 11, U12: Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 , các số còn lại là con lai BC1F1
đ/c +: IRBB5, đ/c -: IR24
64
3.4.2. Cặp lai DT39- Quế Lâm x OM6377
Ở cặp lai OM6377 x DT39- Quế Lâm (Ký hiệu R45) chúng tôi kiểm tra 19 con lai thế hệ BC1F1. Qua kết quả điện di sản phẩm PCR, cho thấy có 5 cá thể xuất hiện băng kích thước 179 bp tương tự như băng kích thước của bố và đối chứng dương (IRBB5), đó là các mẫu: 1673, 1675, 1677, 1683, 1505. Nghĩa là các cá thể này mang candidate gen xa5 và chúng sẽ được chọn để phục vụ cho lai tạo BC2F1.
Hình 3.11. Ảnh kết quả điện di sản phẩm PCR các con lai BC1F1 của tổ hợp lai OM6377 x DT39- Quế Lâm với cặp mồi xa5add35
Ghi chú: M26: DT39-Quế Lâm, U15: OM6377 , các số còn lại là con lai BC1F1 đ/c +: IRBB5, đ/c -: IR24
3.4.3. Cặp lai Q1-8-1 x Chấn thơm
Ở cặp lai Chấn thơm x Q1-8-1 (Ký hiệu B4) chúng tôi kiểm tra 49 con lai thế hệ BC1F1. Qua kết quả điện di sản phẩm PCR, cho thấy có 21 cá thể mang gen giống với bố, tương đương với đối chứng dương (IRBB5) với kích thước băng DNA tương đương 179bp, đó là các mẫu: 303, 304, 305, 307, 308, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 385, 388, 391, 392, 394, 395, 397. Các cá thể này sẽ được chọn để tiếp tục tạo BC2F1.
65
Hình 3.12. Ảnh kết quả điện di sản phẩm PCR các con lai BC1F1 của tổ hợp lai Q1-8-1 x Chấn thơm với cặp mồi xa5add35
Ghi chú: M47: dòng Q1-8-1, U16: Chấn thơm , các số còn lại là con lai BC1F1 đ/c +: IRBB5, đ/c -: IR24
3.4.4. Cặp lai OM6976 x Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2
Ở cặp lai Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 x OM6976 (Ký hiệu D8) chúng tôi kiểm tra 3 con lai thế hệ BC1F1. Qua kết quả điện di sản phẩm PCR, cho thấy có 2 cá thể xuất hiện băng kích thước 179 bp tương tự như băng kích thước ở dòng bố và đối chứng dương (IRBB5), đó là các mẫu: 42, 43. Các cá thể này sẽ được chọn để tiếp tục tạo BC2F1.
Hình 3.13. Ảnh kết quả điện di sản phẩm PCR các con lai BC1F1 của tổ hợp lai OM6976 x Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 với cặp mồi xa5add35 Ghi chú: OM6976, U12: Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 , các số còn lại là con lai BC1F1
66
đ/c +: IRBB5, đ/c -: IR24
3.4.5. Cặp lai Thủ đô 1 x Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2
Ở cặp lai Thủ đô 1 x Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 (Ký hiệu R51) chúng tôi kiểm tra 23 con lai thế hệ BC1F1. Qua kết quả điện di sản phẩm PCR, cho thấy có 4 cá thể xuất hiện băng kích thước 179 bp tương tự như băng kích thước ở dòng bố và đối chứng dương (IRBB5), đó là các mẫu: 1334, 1344, 1348, 1349.
Các cá thể này sẽ được chọn để tiếp tục BC2F1
Hình 3.14. Ảnh kết quả điện di sản phẩm PCR các con lai BC1F1 của tổ hợp lai Thủ đô 1 x Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 với cặp mồi xa5add35
Ghi chú: M8: Thủ đô1, U12: Chiêm nhỡ Bắc Ninh 2 , các số còn lại là con lai BC1F1
đ/c +: IRBB5, đ/c -: IR24
Dựa theo kết quả kiểm tra candidate gen xa5 ở các con lai BC1F1 của 05 tổ hợp lai sử dụng cặp mồi thiết kế xa5add35, cho thấy:
Bảng 3.8. Kết quả kiểm tra candidate gen xa5
STT Ký hiệu Mẹ Bố Số con lai BC1F1
mang gen kháng xa5
1 R53 An dân 11 CNBN2 3
2 R45 DT39 OM6377 5
3 B4 Q1-8-1 Chấn thơm 21
67
4 D8 OM6976 CNBN2 2
5 R51 Thủ đô 1 CNBN2 4
68