PHẦN 2: BÁO CÁO THÍ NGHIỆM BÀI 2: PHÂN TÍCH ACID AMINE BẰNG SỰ CHUYỂN HÓA PITC
5.3. Trong mẫu bột cá phân tích
Hàm lượng (mg/g) Nhiều nhất Ít nhất
Mẫu 1 Glu Gly
Mẫu 2 Glu Gly
− So với mẫu chuẩn thỡ nồng ủộ của acid amine trong mẫu phõn tớch thấp hơn, cú thể do quá trình thủy phân chưa hoàn toàn, do sai lệch do quá trình tính toán khối lượng,
− Các peak hẹp hiệu quả phân ly (separating efficiency) cao
− Các peak hoàn toàn tách rời tính chọn lọc (selectivity) cao hệ thống cú ủộ phõn giải (resolution) Rs cao
− Các peak tách ra rõ rệt, các acid amine có cùng cấu tạo phân tử giống nhau thì các peak xếp gần nhau
− Từ ủồ thị ta thấy ứng với cỏc ủộ pha loóng mẫu khỏc nhau thỡ nồng ủộ nhận ủược cũng khỏc nhau. ðộ pha loóng càng thấp thỡ nồng ủộ nhận ủược càng cao nhưng sự chờnh lệch khụng ủỏng kể.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Nguyễn Thị Thu Võn, Phõn tớch ủịnh lượng, NXB ðại học Quốc gia TPHCM, 2004, 541 trang.
2. Phạm Luận, Phương pháp phân tích phổ nguyên tử, NXB ðại học Quốc gia Hà Nội, 2006. 295 trang.
3. Trần Bích Lam, Thí nghiệm phân tích thực phẩm, NXB ðại học Quốc gia TPHCM, 2006, 115 trang.
4. Trung tõm Dịch vụ Phõn tớch Thớ nghiệm, Hướng dẫn thớ nghiệm Xỏc ủịnh Na, Ca, Fe trong thực phẩm trên máy quang phổ hấp thu nguyên tử AAS và Phân tích acid amine bằng sự chuyển hóa PITC.
MỤC LỤC
PHầN 1: GIỚI THIỆU VỀ TRUNG TÂM THÍ NGHIỆM ... 1
I.DỊCHVỤKHOAHỌC ... 1
1.1. Phân tích, kiểm tra chất lượng sản phẩm ... 1
1.2. Nghiên cứu ... 1
1.3. đào tạo... 1
1.4. Dịch vụ Tư Vấn và các dịch vụ khác ... 2
II.NĂNGLỰCHOẠTðỘNG ... 2
2.1. Phòng Nghiên Cứu Triển Khai... 2
2.2. Phòng Phân Tích Sắc Ký... 2
2.3. Phòng Công Nghiệp Tài Nguyên Môi Trường: ... 3
2.4. Phòng Hữu Cơ Nông Sản Thực Phẩm ... 3
III.TRANGTHIẾTBỊHIỆNðẠI ... 3
3.1. Thiết Bị Cộng Hưởng Từ Hạt Nhân (NMR) ... 3
3.1.1. Chức năng ... 3
3.1.2. Khả năng phân tích ... 3
3.1.3. ðối tượng mẫu ... 4
3.2. Máy Quang Phổ Phát Xạ Plasma (ICP), máy Hấp Thu Nguyên Tử (ASS) ... 4
3.2.1. Chức năng ... 4
3.2.2. Khả năng phân tích ... 4
3.2.3. ðối tượng mẫu ... 4
3.3. Máy Sắc Ký Lỏng Ghép Khối Phổ (LC – MSn)... 4
3.3.1. Chức năng ... 4
3.3.2. Khả năng phân tích ... 4
3.3.3. ðối tượng mẫu ... 5
3.4. Máy Sắc Ký Lỏng Ghép Khối Phổ Ba Tứ Cực... 5
3.4.1. Chức năng ... 5
3.4.2. Khả năng phân tích ... 5
3.4.3. ðối tượng mẫu ... 5
3.5. Máy sắc kí ghép khối phổ nhiều lần (GC – MS*)... 5
3.5.1. Chức năng ... 5
3.5.2. Khả năng phân tích ... 5
3.5.3. ðối tượng mẫu ... 6
3.6. Máy Real time PCR... 6
3.6.1. Chức năng ... 6
3.6.2. Khả năng phân tích ... 6
3.6.3. ðối tượng mẫu ... 6
3.7. Thiết bị nhiễu xạ tia X (XRD)... 6
3.7.1. Chức năng ... 6
3.7.2. Khả năng phân tích ... 6
3.7.3. ðối tượng mẫu ... 7
3.8. Mỏy sắc kớ ghộp khối phổ với ủộ phõn giải cao (HRGC/HRMS)... 7
3.8.1. Chức năng ... 7
3.8.2. Khả năng phân tích ... 7
3.8.3. ðối tượng mẫu ... 7
PHầN 2: BÁO CÁO THÍ NGHIỆM BÀI 1: XÁC ðỊNH NA, CA, FE TRONG THỰC PHẨM TRÊN MÁY QUANG PHỔ HẤP THU NGUYÊN TỬ AAS ... 8
I.MỤCðÍCHTHÍNGHIỆM ... 8
II.TỔNGQUANVỀPHƯƠNGPHÁPQUANGPHỔHẤPTHUVÀPHÁTXẠ NGUYÊNTỬ–AASVÀAES ... 8
2.1. Giới thiệu về phương pháp quang phổ hấp thu – phát xạ nguyên tử ... 8
2.2. Những vấn ủề chung về hấp thu và phỏt xạ nguyờn tử ... 9
2.2.1. Sự xuất hiện phổ hấp thu và phát xạ nguyên tử... 9
2.2.2. Cường ủộ của vạch phổ hấp thu nguyờn tử ... 12
2.2.3. Những ưu và nhược ủiểm của phộp do AAS... 15
2.2.4. ðối tượng và phạm vi ứng dụng của phương pháp hấp thu – phát xạ nguyên tử ... 17
2.3. Nguyờn tắc và trang bị của phộp ủo ... 18
2.3.1. Kỹ thuật nguyên tử hóa mẫu... 20
2.3.2. Nguồn phỏt bức xạ ủơn sắc... 30
2.3.3. Hệ thống ủơn sắc và mỏy quang phổ hấp thu nguyờn tử... 34
2.3.4. Trang bị phát hiện, Detector, Photomultiplier... 36
2.4. Các phương pháp phân tích cụ thể ... 37
III.TIẾNHÀNHTHÍNGHIỆM... 39
3.1. Nguyên tắc chung ... 40
3.2. Dụng cụ và thiết bị ... 40
3.3. Hóa chất và thuốc thử... 40
3.4. Tiến hành thí nghiệm... 41
3.4.1. Lấy mẫu và ủồng nhất mẫu... 41
3.4.2. Xử lý mẫu bằng phương pháp vô cơ hóa khô... 41
3.4.3. Pha loóng mẫu trong nền ủể ủo trờn mỏy AAS ... 42
3.4.4. Tiến hành ủo trờn mỏy ... 43
IV.SỐLIỆUTHÍNGHIỆM ... 44
4.1. Khối lượng mẫu cõn ban ủầu... 44
4.2. Hệ số pha loãng ... 44
4.3. Số liệu phân tích Na ... 44
4.3.1. ðường chuẩn của Na ... 44
4.3.2. Số liệu ủo cỏc mẫu... 45
4.4. Số liệu phân tích Ca... 45
4.4.1. ðường chuẩn của Ca... 45
4.4.2. Số liệu ủo cỏc mẫu... 46
4.5. Số liệu phân tích Fe ... 46
4.5.1. ðường chuẩn của Fe ... 46
4.5.2. Số liệu ủo cỏc mẫu... 47
V.TÍNHTOÁNKẾTQUẢ ... 48
5.1. Công thức tính ... 48
5.2. Xử lý kết quả ... 48
5.3. Kết quả tính toán cho các nguyên tố ... 48
5.3.1. Kết quả tính toán cho Na ... 49
5.3.2. Kết quả tính toán cho Ca ... 50
5.3.3. Kết quả tính toán cho Fe... 51
VI.NHẬNXÉT... 52
VII.BÀNLUẬN ... 52
7.1. Mục ủớch của xử lớ mẫu ... 52
7.1.1. Phương pháp khô ... 52
7.1.2. Phương pháp ướt... 53
7.1.3. Phương pháp kiềm chảy ... 53
7.2. Mục ủớch dựng LaCl3 và CsCl... 53
7.3. Phõn tớch Na ủo phỏt xạ, cũn Ca và Fe ủo hấp thu... 54
PHẦN 2: BÁO CÁO THÍ NGHIỆM BÀI 2: PHÂN TÍCH ACID AMINE BẰNG SỰ CHUYỂN HÓA PITC... 55
I.MỤCðÍCHTHÍNGHIỆM ... 55
II. TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO – HPLC... 55
2.1. Khái niệm ... 55
2.2. Nguyên tắc của quá trình sắc ký trong cột ... 56
2.3. Cỏc ủại lượng ủặc trưng của sắc ký ủồ... 57
2.3.1. Thời gian lưu thực t’r (Retention time) ... 57
2.3.2. Hệ số dung lượng K’(Capacity Factor) ... 58
2.3.3. ðộ chọn lọc... 58
2.3.4. Số ủĩa lý thuyết N ... 58
2.3.5. ðộ phân giải R (Resolution ) ... 59
2.3.6. Hệ số khụng ủối xứng T (Tailing factor)... 59
2.4. Phân loại sắc ký và ứng dụng ... 60
2.5. Hệ thống HPLC ... 60
2.5.1. Bỡnh ủựng dung mụi ... 61
2.5.2. Bộ khử khí Degasse ... 62
2.5.3. Bơm cao áp ... 62
2.5.4. Bộ phận tiêm mẫu (injection) ... 62
2.5.5. Cột sắc ký ... 62
2.5.6. Detector... 63
2.5.7. Bộ phận ghi tín hiệu... 63
2.5.8. In kết quả ... 63
2.6. Lựa chọn pha tĩnh, pha ủộng ... 64
2.7. Tiến hành ủo trờn hệ thống HPLC... 66
2.7.1. Chuẩn bị dụng cụ và máy móc ... 66
2.7.2. Chuẩn bị dung mụi pha ủộng... 66
2.7.3. Chuẩn bị mẫu ủo HPLC... 66
2.7.4. Cỏch ủo HPLC ... 66