4.1.1 Các yếu tố môi trường trong thí nghiệm huyết học (hồng cầu, bạch cầu).
Nhiệt ủộ pH Oxy hũa tan
Sáng Chiều Sáng Chiều Sáng Chiều
27,04±
0,9
28,5±
0,85
7,72±
0,17
7,74±
0,19
5,03±
0,69
4,29±
0,66
Bảng 4.1: Nhiệt ủộ, pH, Oxy của thớ nghiệm ảnh hưởng nitrite lờn một số chỉ tiêu huyết học cá tra
Cỏc yếu tố mụi trường ủược ủo vào 2 thời ủiểm sỏng, chiều. Đo trước khi thu mẫu 15 phút.
Kết quả cho thấy cỏc yếu tố mụi trường khụng cú sự biến ủộng lớn trung bỡnh hàm lượng oxy dao ủộng từ 3-5mg/l. Nhiệt ủộ trong ngày khụng cú sự trờn lệch lớn từ 27- 28oC, pH cũng tương ủối ổn ủịnh 7,5- 7,7. Nhỡn chung cỏc yếu tố môi trường trong quá trình thí nghiệm rất thuận lợi cho sự phát triển của cá.
4.1.2 các yếu tố môi trường trong thí nghiệm sinh lý cá tra.
- Nhiệt ủộ:
Sự biến ủộng của cỏc yếu tố nhiệt ủộ chỉ dao ủộng trong khoảng 28±0,3.
Do quỏ trỡnh thớ nhiệm ủược tiến hành trong phũng kớnh, nhiệt ủộ trong phũng ủược giữ ổn ủịnh 26oC nhờ mỏy ủiều hũa kết hợp với hecter nõng nhiệt trong suốt quỏ trỡnh thớ nghiệm nờn nhiệt ủộ khụng cú sự biến ủộng lớn.
Nhiệt ủộ ủược xem là một trong những yếu tố quan trong trong quỏ trỡnh trao ủổi chất. Nhiệt ủộ tăng thỡ quỏ trỡnh trao ủổi chất tăng, nhiệt ủộ gióm thỡ quỏ trỡnh trao ủổi chất cũng gióm (nhưng phải trong giới hạn cho phộp). Do ủú nhiệt ủộ cũng ảnh hưởng trực tiếp hay giỏn tiếp ủến hoạt ủộng dinh dưỡng hàng ngày của cỏ. Theo Niconski (1951, ủược trớch dẫn bởi Trương Quốc Phỳ, 2001) nhiệt ủộ cơ thể cỏ chỉ trờn lệch với nhiệt ủộ của mụi trường khoảng 0,5 – 1oC. Khi nhiệt ủộ tăng, cỏ sẽ tăng cường trao ủổi chất, dẫn ủến gia tăng cường ủộ hụ hấp.
Theo Trương Quốc Phỳ, (2001) nhiệt ủộ tốt cho sự phỏt triển của cỏ là 25 – 30oC và tốc ủộ thay ủổi nhiệt ủộ trong khoảng 0,2oC/ phỳt sẻ khụng ảnh hưởng ủến cỏ.
- pH:
Trong quỏ trỡnh thớ nghiệm pH luụn ủược theo dừi và dao ủộng từ 7,5- 7,8.
Theo Boyd ( 1990), pH phù hợp cho sự phát triển của tôm cá từ 6,5- 9. Nếu pH <
6,5 sẽ ảnh hưởng ủến sự tăng trưởng và phỏt triển của tụm cỏ do sự tăng tiết dịch nhờn trờn bề mặt mang làm gióm quỏ trỡnh trao ủổi khớ và ion, gõy mất cõn bằng acid- bazơ, là mất khả năng ủiều hũa ỏp suất thẩm thấu.
pH trong thớ nghiệm thỡ tương ủối ổn ủịnh sẽ khụng ảnh hưởng ủến hoạt ủộng trao ủổi khớ của cỏ ủối với mụi trường.
- Oxy:
Nguồn nước dựng trong thớ nghiệm ủược sục khớ trước một ngày và trong suốt quá trình thí nghiệm nhằm loại bỏ hoàn toàn hàm lượng chlorine trong nước.
Theo Swingle (1969; ủược trớch dẫn bởi Trương Quốc Phỳ, 2001) thỡ hàm lượng oxy hòa tan trong nước lý tưởng là 5 ppm. Tuy nhiên, không nên vượt quá mức bảo hòa vì cá có thể bị bệnh bọt khí trong máu. Cá tra có cơ quan hô hấp phụ nờn cú thể chịu ủựng ủược trong mụi trường cú hàm lượng oxy hũa tan thấp (<2ppm ) nhưng khi buộc phải sống trong môi trường khắc nghiệt này, cá chậm lớn và khú thành thục sinh sản( Nguyễn Chung, 2008 ủược trớch dẫn bởi Trần Sử Đạt, 2010).
Túm lại, cỏc yếu tố mụi trường thớ nghiệm: nhiệt ủộ, pH, Oxy là thớch hợp cho hoạt ủộng bỡnh thường của cỏ tra trong quỏ trỡnh thớ nghiệm.
4.2 Ảnh hưởng của nitrite lên chỉ tiêu sinh lý 4.2.1 Ảnh hưởng của nitrite lên tiêu hao oxy cá tra
Tiờu hao oxy là lượng oxy cần thiết cung cấp cho cỏ ủược tớnh trờn một ủơn vị thời gian (mgO2/Kg/h). Đõy là một chỉ tiờu quan trọng nhằm ủỏnh giỏ cường ủộ trao ủổi chất của cỏ. Trong ủiều kiện nhiệt ủộ thớch hợp và khụng ở tranh thỏi căng thẳng , năng lượng dựng trong quỏ trỡnh trao ủổi chất giỳp cho cỏ duy trỡ hoạt ủộng sống tối thiểu của những cơ quan: hụ hấp, nội tạng, thần kinh ( Trần Sử Đạt ,2010)
Tiờu hao oxy trong của cỏ tra trong ủiều kiện khụng cú nitrite trong mụi trường ( nghiệm thức ủối chứng ) trung bỡnh là 74 mgO2/kg/giờ khỏc biệt khụng có ý nghĩa thống kê( p > 0,05) so với nghiệm thức 59,1 mg/l NO2 – N ( 67mgO2/kg/giờ) nhưng khỏc biệt cú ý nghĩa thống kờ (p < 0,05) ủối với nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N ( 56 mgO2/kg/giờ ) và nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N ( 42 mgO2/kg/giờ). Túm lại, cường ủộ hụ hấp của cỏ giảm ở tất cả cỏc nghiệm thức.
Bảng 4.2 Tiêu hao oxy trung bình của cá tra ở các nghiệm thức.
Kết quả thí nghiệm cho thấy khả năng tiêu hao oxy của cá giãm dần khi nồng ủộ tiờu hao oxy của cỏ càng tăng nguyờn nhõn là do khi tiếp xỳc với mụi trường cú nồng ủộ nitrite cao (nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N và nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) hemoglobin sẽ chuyển hó thành methemoglobin không còn khả năng kết hợp với oxy.
Khi hàm lượng oxy trong máu giãm cá sẽ tăng cường hàm lượng hồng cầu ủến mang ủể vận chuyển oxy nhưng hemoglobin ủến mang lại bị nitrite oxy húa sắt (II) trong hemoglobin thành sắt (III) không còn khả năng kết hợp với oxy. Do ủú trong mụi trường cú nitrite cao thỡ cỏ sẻ phản ứng lại bằng cỏch tăng tần số hụ hấp ủể tăng cường trao ủổi khớ nhưng mức ủộ sử dụng oxy lại gióm nờn tiờu hao oxy gióm khi nồng ủộ nitrite trong mụi trường càng tăng. Kết quả nghiờm cứu này cũng phù hợp với kết quả nghiên cứu trên cá Cyprynus Carpio cho rằng khi tiếp xỳc với nitrite cú nồng ủộ càng cao thỡ tỡ lệ tiờu thụ oxy gióm dần. ( theo Tilak et al. (2007) trích dẫn từ Mai Diệu Quyên, 2010).
0 10 20 30 40 50 60 70 80
DC LC10 LC25 LC50
Series1
Kết quả nghiên cứu của Lương Diễm Trang (2009) trên cá tra thì tiêu hao oxy của cỏ cũng gióm khi tiếp xỳc với nồng ủộ Malachite green càng cao.
4.2.2 Ảnh hưởng của nitrite lên ngưỡng oxy cá tra.
Theo Mark Boyley và hans Malte (2008) ngưỡng oxy là giỏ trị mà tại ủú ủộng vật mất khả năng lấy oxy ủể duy trỡ sự sống. Ngưỡng oxy cũng là giỏ trị ủại diện của tình trạng giãm oxy trong máu, mang và trong tim.
Kết quả thớ nghiệm cho thấy ngưỡng oxy của cỏ tra ở cỏc nghiệm thức ủều cú sự khỏc biệt cú ý nghĩa thống kờ (p<0,05) so với ủối chứng ( 1,85mg/L ). Tuy nhiên, giữa các nghiệm thức 59,1 mg/l NO2 – N (2,49mg/ L), 66,4 mg/l NO2 – N (2,69 mg/ L) và nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N (2,77mg/ L) thì lại khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p>0,05).
Bảng 4.3 Ngưỡng oxy của cá tra trung bình ở các nghiệm thức.
Thời gian chết của cá ở các nghiệm thức cũng có sư khác biệt. Đối với cá cú nống ủộ nitrite cao (75,6 mg/l NO2 – N) thỡ cỏ chết nhanh hon so với nghiệm thức ủối chứng, nghiệm thức 59,1 mg/l NO2 – N và nghiệm thức 66,4 mg/l NO2- N.
Hoạt ủộng của cỏ trong lỳc thớ nghiệm: trước khi chết cỏ hoạt ủộng liờn tục nhằm tỡm nguồn oxy cung cấp cho cơ thể ủồng thời co thể cũng tăng cường trao ủổi chất ủể bài tiết chất ủộc ra ngoài. Nhưng khi cỏ tăng cường cỏc hoạt ủộng thỡ phải tiờu tốn nhiều năng lượng cho quỏ trỡnh vận ủộng nờn quỏ trỡnh trao ủổi chất, quỏ trỡnh hụ hấp của cỏ cũng tăng lờn. Quỏ trỡnh trao ủổi chất tăng thỡ phải cần nhiều oxy do ủú tần số hụ hấp của cỏ tăng lờn. Khi tần số hụ hấp tăng lại tạo ủiều
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3
DC LC10 LC25 LC50
Series1
kiện cho hemoglobin trong máu tiếp xúc với nitrite trong môi trường và bị oxy húa thành methemoglobin (khụng cũn khả năng vận chuyển oxy). Sau ủú cỏ sẻ từ từ chỡm xuống ủỏy bỡnh rồi chết. Điếu này cho thấy ủối với cỏ trong nghiệm thức cú hàm lượng nitrite trong mụi trường lại chết nhanh hơn so với nghiệm thức ủối chứng và ở nghiệm thức cú nồng ủộ nitrite cao (75,6 mg/l NO2 – N) lại chết nhanh hơn so với nghiệm thức cú nồng ủộ nitrite thấp (59,1 mg/l NO2 – N, 66,4 mg/l NO2 – N) mặc dù hàm lượng oxy trong môi trường vẫn còn phù hợp cho sự sống của cỏ (O2 > 2,5 mg/L ở cỏc nghiệm thức cú nồng ủộ nitrite trong nước)
Điều này cũng tương tự như kết quả nghiên cứu của Nguyễn Thanh Phương và Đỗ Thị Thanh Hương, (1997, trích dẫn từ Nguyễn Ngọc Hiền, 2007) nghiờn cứu sự thay ủổi bờn ngoài của cỏ rụ phi (Oreochromis niloticus) giống sau khi ủưa thuốc Methyl parathion (MP) vào cỏc bể thớ nghiệm thỡ lụ cú nồng ủộ thuốc cao nhất (17mg/L và 24mg/L) cỏ dần dần bất ủộng và chỡm xuống ủỏy bể sau 2 giờ tiếp xỳc với thuốc. 1-2 giờ tiếp theo cỏ di chuyển lờn mặt nước ủể ủốp khụng khớ, nhưng sau ủú cỏ cũng mất dần khả năng bơi lội, trở nờn mất thăng bằng, cỏc hoạt ủộng của cơ thể yếu dần và cỏ bắt ủầu chết.
Theo Đỗ Thị Thanh Hương và Nguyễn Anh Tuấn (1997) cho rằng ngưỡng oxy và tiêu hao oxy của cá sống trong môi trường có thuốc trừ sâu luôn cao hơn trong ủiều kiện khụng cú thuốc, sự rối loạn hụ hấp cũng là dấu hiệu ủầu tiờn của nhiễm ủộc.
Theo Bass, (1977) thí nghiệm trên cá mang xanh (Lepomis macrochirus) và cỏ hồi (salmo gairdneri) cho rằng nồng ủộ chlorine gần mức gõy chết sẽ làm cho các tế bào biểu bì của phiến mang dầy lên, mang bị tổn thương nên làm giảm sự vận chuyển oxy qua mang, ở nồng ủộ chlorine cao sẽ làm hoại tử mang.