CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ - THẢO LUẬN
3.2 Thắ nghiệm 2: đánh giá khả năng ựối kháng của các chủng vi khuẩn chọn lọc sơ khởi ủối với vi khuẩn gõy bệnh Ralstonia solanacearum trong ủĩa petri
Kết quả phõn tớch từ 32 mẫu rễ của cõy gừng khỏe ủược thu thập 2 huyện Chợ Mới và Tri Tôn, tỉnh An Giang và 3 mẫu rễ thu thập tại thành phố Hồ Chí Minh ủó phõn lập ủược 199 chủng vi khuẩn vựng rễ (bao gồm vi khuẩn vựng rễ và vi khuẩn nội sinh rễ).
Qua thớ nghiệm ủỏnh giỏ khả năng ủối khỏng của 199 chủng vi khuẩn vựng rễ ủó phõn lập ủược với vi khuẩn R. solanacearum (chủng Rs TT4) ghi nhận cú 41 chủng cú khả năng ủối khỏng ở cỏc mức ủộ khỏc nhau (20 chủng vi khuẩn vựng rễ và 21 chủng vi khuẩn nội sinh rễ), chiếm tỷ lệ 20,6% so với tổng số vi khuẩn ủó phân lập (bảng 3.3).
Cỏc chủng vi khuẩn ủối khỏng này phần lớn là những chủng vi khuẩn ủó qua xử lý nhiệt và là vi khuẩn nội sinh. ðặc ủiểm của cỏc chủng vi khuẩn ủối khỏng qua chọn lọc sơ khởi ở thớ nghiệm 2 ủược trỡnh bày ở bảng 3.2.
Bảng 3.2: ðăc ủiểm phõn lập của cỏc chủng vi khuẩn ủối khỏng qua chọn lọc sơ khởi
STT Chủng vi khuẩn
Xử lý nhiệt
Vi khuẩn vùng rễ
Vi khuẩn
nội sinh ðặc ủiểm khuẩn lạc
1 Cm 1.1 e Khụng x Trắng ủục, bằng phẳng, trũn, khụng rỡa
2 Cm 1.2 e Không x Trắng sáng, bằng phẳng, hơi tròn, không rìa
3 Cm 3.1 et Có x Trắng sáng, tâm nhô cao, bất dạng, rìa mỏng
4 Cm 4.1 Không x Vàng, khô nhăn, tròn, rìa mỏng
5 Cm 4.2 et Có x Vàng nhạt, tròn, trơn láng, hơi nhô, không rìa
6 Cm 4.3 Không x Vàng nhạt, trơn láng, tâm nhô, không rìa
7 Cm 4.4 t Có x Hồng, trơn láng, tròn, không rìa
8 Cm 4.5 Không x Vàng nhạt, hơi tròn, bằng phẳng, không rìa
9 Cm 4.6 Không x Vàng nhạt, hơi tròn, tâm lõm, rìa xẻ thùy
10 Tt 5.1 e Khụng x Trắng ủục, bằng phẳng, bất dạng, rỡa nhăn
11 Tt 5.2 t Cú x Trắng ủục, bằng phẳng, tõm trắng, rỡa răng cưa
12 Tt 5.3 Khụng x Trắng ủục, bằng bẳng, hơi ướt, rỡa răng cưa
13 Tt 5.4 e Khụng x Trắng ủục, tõm nhụ, nhăn, rỡa mỏng
14 Tt 5.5 Khụng x Trắng ủục, bằng phẳng, khụ, hơi trũn, khụng rỡa
15 Tt 5.6 e Khụng x Trắng ủục, búng, hơi nhụ, khụng rỡa
16 Tt 5.7 et Có x Vàng nhạt, tâm nhô, nhăn, rìa mỏng
17 Tt 5.8 et Cú x Trắng ủục, bằng phằng, rỡa xẻ thựy
18 Tt 5.9 et Cú x Trắng ủục, bằng phằng, khụng rỡa
19 Tt 5.10 et Cú x Trắng ủục, trơn, tõm lừm, rỡa xẻ thựy
20 Tt 5.11 t Có x Trắng sáng, bằng phẳng, không rìa
21 Tt 5.12 t Cú x Trắng ủục, tõm hơi lừm, rỡa nhụ, hơi nhăn
22 Tt 6.1 t Có x Vàng xanh, bằng phẳng, không rìa
23 Tt 6.2 et Có x Vàng nhạt, tâm trắng, nhăn, rìa xẻ thùy
24 Tt 6.3 Khụng x Trắng ủục, tõm lừm, nhăn, rỡa nhăn
28 Tt 7.3 e Khụng x Trắng ủục, bất dạng, khụ nhăn, rỡa hơi nhụ
29 Tt 7.4 et Cú x Trắng ủục, nhăn, tõm hơi nhụ, khụng rỡa
30 Tt 7.5 et Có x Trắng sáng, hơi nhăn, rìa mỏng
31 Tt 7.6 e Khụng x Trắng ủục, trũn, khụ trơn, hơi nhụ, khụng rỡa
32 Tt 7.7 et Cú x Trắng ủục, hơi nhăn, rỡa mỏng
33 Tt 8.1 t Có x Trắng sáng, , tâm nhô cao, nhăn, rìa nhăn
34 Tt 8.2 Khụng x Trắng ủục, trũn, hơi nhăn, nhụ
35 Tt 8.3 t Có x Trắng sáng, bất dạng, nhăn, hơi nhô
36 Tt 8.4 t Có x Trắng sáng, khô nhăn, bất dạng, không rìa
37 Tt 8.5 t Có x Hồng nhạt, bằng phằng, bất dạng, không rìa
38 Tt 8.6 t Cú x Trắng ủục, búng, trũn, ướt
39 Tp 9.1 Không x Vàng tươi, trơn láng, nhô cao, không rìa
40 Tp 9.2 Khụng x Trắng ủục, bất dạng, khụ nhăn, rỡa hơi nhụ
41 Tp 9.3 e Khụng x Trắng ủục, hơi nhụ, hơi trũn, khụng rỡa
Ghi chỳ: - Cm, TT, TP: tờn ủịa ủiểm thu mẫu (Cm: Chợ Mới-An Giang; TT: Tri Tụn-An Giang; TP: Thành phố Hồ Chí Minh).
đánh giá khả năng ựối kháng của 41 chủng vi khuẩn vùng rễ với vi khuẩn R.
solanacearum ủược trỡnh bày ở bảng 3.3 cho thấy:
- Tại thời ủiểm 24 giờ sau khi thử ủối khỏng (SKTðK), hiệu quả ủối khỏng của cỏc chủng khỏc biệt cú ý nghĩa thống kờ ở mức 1%, trong ủú 3 chủng Tt 5.3 (2,7 mm), Tt 5.7 et (2,3 mm), Tt 7.4 et (2,3 mm) biểu hiện khả năng ủối khỏng mạnh nhất.
- Ở 48 giờ SKTðK, 2 chủng Tt 5.5 (5,2 mm) và Tt 7.7 et (4,8 mm) thể hiện hiệu quả ủối khỏng tương ủương nhau và khỏc biệt cú ý nghĩa thống kờ so với các chủng còn lại.
- Ở thời ủiểm 72 giờ SKTðK, chủng Tt 5.5 (5,2 mm) và Tt 7.7 et (4,8 mm) lại tiếp tục thể hiện hiệu quả ủối khỏng cao và bền.
- Cỏc chủng ủối khỏng sớm ở thời ủiểm 24 giờ là Tt 5.3,Tt 5.7 et, Tt 7.4 et, sau 48 giờ và 72 giờ thỡ khả năng ủối khỏng khụng phỏt triển mạnh nữa. Ngược lại, chủng Tt 8.1 t (5,0 mm), dự thể hiện ủối khỏng muộn ở thời ủiểm 72 giờ nhưng khả năng ủối khỏng ủạt khỏ cao và tương ủương với 2 chủng Tt 5.5, Tt 7.7 et.
Do chủng Rs TT4 là chủng vi khuẩn gõy bệnh biểu hiện tớnh ủộc sớm và cao nhất nờn theo thang ủỏnh giỏ khả năng ủối khỏng giữa vi khuẩn với vi khuẩn (Ahmed, N.A, Zahran, E.B. 2006), khả năng ủối khỏng của cỏc chủng vi khuẩn ủối kháng trên chỉ ở mức trung bình-yếu.
Qua khảo sỏt thực tế, cỏc ruộng gừng 5, 7, 8 ủược nụng canh tỏc khỏ tốt từ
bệnh hại. Ngoài ra, nụng dõn cũn chỳ trọng nhiều ủến việc bún phõn hữu cơ tăng dinh dưỡng cho ủất và tỏc ủộng cú lợi cho nguồn vi sinh vật trong ủất. Cú thể chớnh vỡ thế, cỏc chủng vi khuẩn vựng rễ phõn lập ủược từ những cõy gừng khỏe của cỏc ruộng núi trờn biểu hiện khả năng ủối khỏng tốt hơn so với cỏc chủng vi khuẩn vựng rễ của các ruộng gừng còn lại.
Kết quả thớ nghiệm chọn ra ủược 10 chủng vi khuẩn ủối khỏng biểu hiện khỏ tốt là: Tt 5.3, Tt 5.5, Tt 5.9 et, Tt 5.10 et, Tt 5.12 t, Tt 6.2 et, Tt 7.3 e, Tt 7.4 et, Tt 7.7 et, Tt 8.1 t.
Bảng 3.3: Khả năng ủối khỏng của 41 chủng vi khuẩn vựng rễ với R. solanacearum (chủng Rs TT4) trên môi trường King’B có agar
Nghiệm thức Bán kính vi khuẩn gây bệnh bị ức chế (mm)
Giờ quan sát 24 giờ SKTðK 48 giờ SKTðK 72 giờ SKTðK
Cm 1.1 e 0,5 j 0,8 l 1,7 jkl Cm 1.2 e 0,8 hij 2,3 ghij 2,5 ghi Cm 3.1 et 1,7 de 2,3 hij 2,3 hi Cm 4.1 0,5 j 0,7 l 0,8 no Cm 4.2 et 0,7 ij 0,8 l 0,8 no Cm 4.3 0,5 j 0,7 l 0,8 no Cm 4.4 t 0,5 j 0,7 l 0,8 no Cm 4.5 0,5 j 0,5 l 0,5 o Cm 4.6 1,7 de 2,7 f-i 2,7 fgh Tt 5.1 e 1,2 fgh 2,0 jk 2,0 ijk Tt 5.2 t 0,5 j 1,7 k 2,0 ijk Tt 5.3 2,7 a 3,5 cd 4,5 bc Tt 5.4 e 0,5 j 2,3 g-j 3,3 d Tt 5.5 2,0 bc 5,2 a 5,2 a Tt 5.6 e 1,3 efg 2,3 g-j 2,5 ghi Tt 5.7 et 2,3 ab 2,7 f-i 3,2 de Tt 5.8 et 0,8 hij 3,0 efg 3,2 d-g Tt 5.9 et 2,0 bc 3,0 def 3,3 d Tt 5.10 et 2,0 cd 4,3 b 4,5 bc Tt 5.11 t 1,3 efg 1,7 k 2,3 hi
Tt 6.2 et 1,7 cde 3,3 de 3,3 d Tt 6.3 0,7 ij 1,0 l 1,0 no Tt 6.4 t 1,0 ghi 1,0 l 1,5 klm Tt 7.1 e 0,5 j 0,7 l 1,0 no Tt 7.2 et 1,2 fgh 1,8 jk 2,7 e-h Tt 7.3 e 0,8 hij 3,3 de 4,0 c Tt 7.4 et 2,3 ab 3,2 def 3,3 d Tt 7.5 et 0,7 ij 2,8 e-h 3,2 def Tt 7.6 e 0,5 j 0,7 l 0,8 no Tt 7.7 et 1,0 ghi 4,8 a 4,8 ab Tt 8.1 t 0,7 ij 2,7 f-i 5,0 ab Tt 8.2 0,5 j 0,8 l 1,0 mno Tt 8.3 t 0,8 hij 1,7 k 2,0 ijk Tt 8.4 t 1,5 ef 2,2 ijk 2,2 hij Tt 8.5 t 0,5 j 1,0 l 1,7 lmn Tt 8.6 t 0,5 j 1,0 l 1,0 mno Tp 9.1 0,7 ij 1,0 l 2,2 hij Tp 9.2 0,8 hij 1,7 k 2,0 ijk Tp 9.3 e 0,7 ij 1,0 l 2,2 hij
CV% 5,43 7,94 7,67
Ý nghĩa F tính ** ** **
Ghi chỳ: - Cỏc trung bỡnh trong cựng một cột ủược theo sau bởi một hay những chữ cỏi giống nhau thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê trong phép thử Ducan.
- ** khác biệt ở mức ý nghĩa 1%.
- Số liệu ủược chuyển sang căn (x+0,5) khi phõn tớch thống kờ.