2.1.1 ðịa ủiểm
Thớ nghiệm ủược tiến hành trong phũng thớ nghiệm tại Bộ mụn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, ðại Học Cần Thơ.
Thời gian thớ nghiệm từ thỏng 08/2009 ủến thỏng 03/2010.
2.1.2 Vật liệu
Nguồn sõu mọt: mọt gạo, mọt thúc ủỏ ủược nhõn nuụi trong gạo trắng và gạo lức.
Húa chất sử dụng: allyl isothiocyanate (AITC) ủược phũng thớ nghiệm cung cấp, phosphine của công ty Cổ Phần Khử Trùng Việt Nam.
Gạo trắng ủược khử trựng (bằng phosphine) kiểm tra khụng bị nhiễm cụn trựng ủể dựng trong thớ nghiệm.
Các dụng cụ: hộp nhựa kín nắp có thể tích 2L, ống nhỏ giọt, dĩa pêtri, giấy thấm, tủ hút, micropippette…
2.2 PHƯƠNG PHÁP
2.2.1 Chuẩn bị nguồn sâu mọt
Cỏc loài sõu mọt ủược nhõn nuụi từ trước trong gạo ở ủiều kiện phũng thớ nghiệm.
2.2.2 Thớ nghiệm 1: Khảo sỏt hiệu lực tỏc ủộng của một số nồng ủộ AITC lờn thành trùng mọt gạo S. oryzae
Thớ nghiệm ủược bố trớ hoàn toàn ngẫu nhiờn, bốn lần lặp lại (mỗi hộp gồm 250 gam gạo và 50 thành trùng mọt gạo) với bốn nghiệm thức xử lý AITC (với các nồng ủộ 3 àl/2L, 5 àl/2L, 7 àl/2L, 9 àl/2L) và nghiệm thức ủối chứng (khụng xử lý).
Ghi nhận tỷ lệ mọt sống ở thời ủiểm 48 giờ sau khi xử lý.
2.2.3 Thớ nghiệm 2: Khảo sỏt hiệu lực của allyl isothiocyanate (9àl/2L) ủối với thành trùng mọt gạo theo thời gian
Thớ nghiệm ủược bố trớ hoàn toàn ngẫu nhiờn, bốn lần lặp lại (mỗi hộp gồm 250 gam gạo và 50 thành trùng mọt gạo). Gồm 4 nghiệm thức xử lý AITC ở nồng ủộ 9 àl/2L tương ứng với 4 mức thời gian là 6, 12, 24, 48 giờ và ủối chứng (khụng xử lý).
Ghi nhận tỷ lệ mọt còn sống ở các nghiệm thức sau khi xử lý.
2.2.4 Thớ nghiệm 3: Khảo sỏt hiệu lực tỏc ủộng của một số nồng ủộ AITC lờn thành trựng mọt thúc ủỏ T. castaneum
Thớ nghiệm ủược bố trớ hoàn toàn ngẫu nhiờn, bốn lần lặp lại (mỗi hộp gồm 250 gam gạo và 50 thành trựng mọt thúc ủỏ) với ba nghiệm thức xử lý AITC (ở cỏc nồng ủộ 6 àl/2L, 9 àl/2L, 12 àl/2L) và nghiệm thức ủối chứng (khụng xử lý).
Ghi nhận tỷ lệ mọt sống ở thời ủiểm 48 giờ sau khi xử lý.
2.2.5 Thớ nghiệm 4: Khảo sỏt hiệu lực của AITC (9àl/2L) ủối với thành trựng mọt thúc ủỏ theo thời gian
Thớ nghiệm ủược bố trớ hoàn toàn ngẫu nhiờn, bốn lần lặp lại (mỗi hộp gồm 250 gam gạo và 50 thành trựng mọt thúc ủỏ). Gồm 3 nghiệm thức xử lý AITC ở nồng ủộ 9 àl/2L tương ứng với 3 mức thời gian là 3, 5, 7 ngày và ủối chứng (khụng xử lý).
Ghi nhận tỷ lệ mọt còn sống ở các nghiệm thức sau khi xử lý.
2.2.6 Thớ nghiệm 5: Khảo sỏt hiệu lực của AITC ủối với trứng mọt thúc ủỏ (nồng ủộ 9àl/2L)
Chuẩn bị 4,5kg gạo ủó ủược khử trựng với phosphine, sau ủú thả vào 200 thành trựng mọt thúc ủỏ (100 cặp) và ủể 3 ngày cho mọt ủẻ trứng. Sau 3 ngày bắt hết thành trựng ra và trộn ủều khối gạo ủể thực hiện thớ nghiệm. Thớ nghiệm gồm 4 nghiệm thức và 4 lần lặp lại, trong ủú 3 nghiệm thức xử lý AITC ở nồng ủộ 9àl/2L tương ứng với 3 mức thời gian là 1, 2, 3 ngày và ủối chứng (khụng xử lý). Mỗi hộp
Sau ủú ủếm số ấu trựng ủược nở ra. Nghiệm thức ủối chứng mở nắp ở thời ủiểm 3 ngày sau khi xử lý.
2.2.7 Thớ nghiệm 6: Khảo sỏt hiệu lực của AITC (9àl/2L) ủối với ấu trựng mọt thúc ủỏ theo thời gian
Thớ nghiệm ủược bố trớ hoàn toàn ngẫu nhiờn, bốn lần lặp lại (mỗi hộp gồm 250 gam gạo và 50 ấu trựng mọt thúc ủỏ). Gồm 3 nghiệm thức xử lý AITC ở nồng ủộ 9àl/2L tương ứng với 3 mức thời gian là 2, 4, 6 ngày và ủối chứng (khụng xử lý).
Ghi nhận tỷ lệ ấu trùng mọt còn sống ở các nghiệm thức sau khi xử lý.
Nghiệm thức ủối chứng ủược ủếm ở thời ủiểm 6 ngày sau khi xử lý.
Cách xử lý thuốc
Dựng micropippete hỳt thuốc nhỏ vào miếng giấy thấm và ủặt vào hộp. Lưu ý: cỏc thao tỏc phải thực hiện trong tủ hỳt. Mang ủầy ủủ gang tay và khẩu trang ủể trỏnh ngộ ủộc.
Tất cả cỏc thớ nghiệm, ủộ hữu hiệu của thuốc ủược tớnh theo cụng thức Abbott (1925).
ðHH ( %) = C
T
C− x 100
Trong ủú, C: Tỷ lệ (%) mọt cũn sống ở nghiệm thức ủối chứng T: Tỷ lệ (%) mọt còn sống ở nghiệm thức có xử lý thuốc Số liệu thớ nghiệm ủược xử lý bằng chương trỡnh MSTATC.
Chương 3