CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
3.2. Nghiên cứu chiết tách Anthocyanin
3.2.3. Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết tách Anthocyanin
Để khảo sát tỉ lệ của hệ dung môi tối ưu cho quá trình chiết tách Anthocyanin, chúng tôi cân mỗi mẫu 20g khoai lang tím và tiến hành ngâm trong 50mL dung môi vừa khảo sát được ở trên ưng với các tỉ lệ khác nhau ngâm trong vòng 60 phút, ở nhiệt độ phòng. Sau khi ngâm chiết xong, lọc chân không thu được dịch chiết.
SVTH: Phan Thị Diệu Hiền Page 36 Đem dịch chiết thu được pha loãng 25 lần, sau đó tiến hành đo mật độ quang Kết quả được thể hiện ở Bảng 3.3 và Hình 3.4
Bảng 3.3. Tỉ lệ hệ dung môi và độ hấp thụ màu
STT Tỉ lệ hệ dung môi C2H5OH: H2O Độ hấp thụ màu
1 1:9 0,4721
2 2:8 0,4860
3 3:7 0,4913
4 4:6 0,5257
5 5:5 0,5964
6 6:4 0,5872
7 7:3 0,5832
8 8:2 0,5754
9 9:1 0,4996
SVTH: Phan Thị Diệu Hiền Page 37 Hình 3.4. Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng của tỉ lệ C2H5OH: H2O
Nhận xét: Kết quả thu được ở Bảng 3.4, chúng tôi nhận thấy rằng với tỉ lệ dung môi etanol - nước là 1:1 (1% HCl), độ hấp thụ màu của dịch chiết là cao nhất.
Vì vậy, chúng tôi chọn tỉ lệ hệ dung môi etanol - nước (1%HCl) tối ưu cho quá trình chiết anthocyanin là 1:1.
3.2.3.2. Khảo sát thời gian tối ưu
Để khảo sát thời gian tối ưu cho quá trình chiết tách Anthocyanin, chúng tôi tiến hành chiết tách ở một số mốc thời gian khác nhau.
Cân mỗi mẫu 20g khoai lang tím cho vào 6 cốc thủy tinh khô đã chuẩn bị sẵn và tiến hành ngâm trong các mốc thời gian khác nhau: 30 phút, 45 phút, 60 phút, 75 phút, 90 phút, 105 phút ở nhiệt độ phòng. Sau khi ngâm chiết trong 50mL dung môi xong, lọc chân không thu được dịch chiết.
Đem dịch chiết thu được pha loãng 25 lần, sau đó tiến hành đo mật độ quang Kết quả được thể hiện qua Bảng 3.4 và Hình 3.5
0.4 0.45 0.5 0.55 0.6 0.65
0 2 4 6 8 10
Mật độ quang(A)
Tỉ lệ C2H5OH: H2O
SVTH: Phan Thị Diệu Hiền Page 38 Bảng 3.4. Thời gian tối ưu chiết tách Anthocyanin
STT Thời gian (phút) Độ hấp thụ màu
1 30 0,4932
2 45 0,5538
3 60 0,6036
4 75 0,7440
5 90 0,7491
6 105 0,7523
Hình 3.5 . Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng của thời gian đến quá trình chiết tách anthocyanin
Nhận xét: Từ kết quả thu được ở Bảng 3.4, ta thấy được khi thời gian chiết tách chất màu tăng thì mật độ quang tăng. Khi thay đổi thời gian chiết từ 45phút đến 75 phút thì mật độ quang tăng mạnh, nên hàm lượng anthocyanin tăng nhanh.
Tuy nhiên, khi tăng từ 75phút đến 90 phút, 105 phút thì mật độ quang có tăng nhưng tăng chậm và không đáng kể, đồng thời lượng tăng giảm dần. Do đó, chúng tôi chọn thời gian tối ưu cho quá trình chiết anthocyanin là 75 phút trong hệ dung môi etanol/nước (1:1, 1% HCl) . Thời gian này sẽ được sử dụng cho các quá trình nghiên cứu tiếp theo.
0.4 0.45 0.5 0.55 0.6 0.65 0.7 0.75 0.8
0 20 40 60 80 100 120
Mật độ quang (A)
Thời gian (phút)
SVTH: Phan Thị Diệu Hiền Page 39 3.2.3.3. Khảo sát tỉ lệ Rắn/Lỏng
Để khảo sát tỉ lệ tối ưu cho quá trình chiết tách Anthocyanin, chúng tôi tiến hành chiết tách với tỉ lệ rắn/lỏng khác nhau.
Cân mỗi mẫu khoai lang tím cho vào 4 cốc thủy tinh khô đã chuẩn bị sẵn với tỉ lệ rắn/lỏng (g/mL) như sau: 1:1, 1:2, 1:3, 1:4và tiến hành ngâm trong thời gian đã khảo sát ở trên ở nhiệt độ phòng. Sau khi ngâm chiết xong, lọc chân không thu được dịch chiết.
Đem dịch chiết thu được pha loãng 25 lần, sau đó tiến hành đo mật độ quang.
Kết quả được thể hiện ở Bảng 3.5 và Hình 3.6 Bảng 3.5. Tỉ lệ Rắn/Lỏng
STT Tỉ lệ R/L (g/mL) Độ hấp thụ màu
1 1:1 0,6189
2 1:2 0,6741
3 1:3 0,7446
4 1:4 0,7532
Hình 3.6 . Đồ thị biểu diễn kết quả khảo sát tỉ lệ R/L
0.5 0.55 0.6 0.65 0.7 0.75 0.8
1:00 1:01 1:01 1:02 1:03 1:04 1:04
Mật độ quang (A)
Tỉ lệ rắn/lỏng (g/mL)
SVTH: Phan Thị Diệu Hiền Page 40 Nhận xét: Kết quả thu được ở Bảng 3.5 và Hình 3.6, chúng tôi nhận thấy rằng với tỉ lệ rắn/lỏng từ 1:3 đến 1:4, độ hấp thụ màu của dịch chiết tăng dần nhưng không đáng kể. Vì vậy, dựa vào độ hấp thụ màu chúng tôi chọn tỉ lệ rắn/lỏng tối ưu cho quá trình chiết anthocyanin là 1:3.
3.2.3.4. Khảo sát nhiệt độ
Để khảo sát nhiệt độ tối ưu cho quá trình chiết tách Anthocyanin, chúng tôi tiến hành chiết tách ở một số mốc nhiệt độ khác nhau.
Cân mỗi mẫu 20g khoai lang tím cho vào 6 cốc thủy tinh khô đã chuẩn bị sẵn và tiến hành ngâm trong các mức nhiệt độ khác nhau: nhiệt độ phòng, 45oC, 55oC, 65oC,75oC,85oC. Sau khi ngâm chiết xong, lọc chân không thu được dịch chiết.
Đem dịch chiết thu được pha loãng 25 lần, sau đó tiến hành đo mật độ quang.
Kết quả được thể hiện theo Bảng 3.6 và Hình 3.7
Bảng 3.6. Nhiệt độ và độ hấp thụ màu của quá trình chiết STT Nhiệt độ(oC) Độ hấp thụ màu
1 Nhiệt độ phòng 0,7445
2 45 0,7593
3 55 0,7931
4 65 0,8439
5 75 0,8291
6 85 0,7918
SVTH: Phan Thị Diệu Hiền Page 41 Hình 3.7 . Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng nhiệt độ đến việc chiết tách anthocyanin
Nhận xét: Khi tăng nhiệt độ sẽ làm giảm độ nhớt đồng thời tăng tốc độ khuếch tán do đó tạo điều kiện thuận lợi cho việc hòa tan các chất từ dung môi vào nguyên liệu. Do đó, mật độ quang của dịch chiết cũng tăng dần. Tuy nhiên, mật độ quang cao nhất ở 65oC, điều này phù hợp với tính chất đặc trưng của anthocyanin là hòa tan tốt trong nước ấm.Tại 75oC , 85oC mật độ quang bắt đầu giảm dần do ở nhiệt độ cao các anthocyanin sẽ bị phân hủy. Cho nên, để giảm bớt sự phân hủy do nhiệt đến mức thấp nhất thường ta sẽ tiến hành ở nhiệt độ vừa phải. Trong đề tài này, chúng tôi chọn nhiệt độ chiết là 65oC trong các quá trình nghiên cứu tiếp theo.