4.1.1 Xây dựng đường chuẩn Vitamin C
Đường chuẩn vitamin C được pha với nồng độ 0-5 àg/mL trong DPPH 40 àg/mL (100 àM) được đo tại bước súng 517 nm.
Bảng 4.1: Phần trăm ức chế gốc tự do DPPH của Vitamin C Vitamin C
(àg/mL) Độ hấp thu % ức chế
0 1,010 0
1 0,882 12,67
2 0,758 24,95
3 0,662 34,46
4 0,561 44,46
5 0,429 57,52
Hình 4.1: Đồ thị biểu diễn phần trăm ức chế theo nồng độ của vitamin C Từ phương trình đường chuẩn y = 10,921x – 2,0495 ta suy ra được IC50(VitC) = 4,39 àg/mL.
30
4.1.2 Kết quả hoạt tính kháng oxi hóa của cao tổng MeOH
Cao tổng MeOH được pha với dóy nồng độ từ 0-300 àg/mL trong DPPH nồng độ 40 àg/mL (100 àM) và được đo tại bước súng 517 nm. Từ độ hấp thu suy ra được phần trăm ức chế [Bảng 4.2 ]. Đường chuẩn phần trăm ức chế theo nồng độ cao tổng được thể hiện trong [Hình 4.2].
Bảng 4.2: Phần trăm ức chế gốc tự do DPPH của cao tổng Cao tổng
(àg/mL)
Độ hấp thu
cao + DPPH Độ hấp thu cao % Ức chế
0 1,137 0 0
100 0,812 0,095 36,94
150 0,705 0,104 47,14
200 0,559 0,107 60,25
250 0,488 0,112 66,93
300 0,387 0,115 76,08
Hình 4.2: Đồ thị biểu diễn phần trăm ức chế theo nồng độ của cao tổng.
Từ phương trình đường chuẩn y = 0,1961x + 18,241 ta suy ra được IC50(cao tổng) = 162 àg/mL.
4.1.3 Kết quả hoạt tính kháng oxi hóa của cao n-hexane
Cao n-hexane được pha với dóy nồng độ từ 0-300 àg/mL trong DPPH nồng độ 40 àg/mL (100 àM) và được đo tại bước súng 517 nm. Từ độ hấp
Nồng độ (àg/mL)
%ức chế
31
thu suy ra được phần trăm ức chế [Bảng 4.3]. Đường chuẩn phần trăm ức chế theo nồng độ cao tổng được thể hiện trong [Hình 4.3].
Bảng 4.3: Phần trăm ức chế gốc tự do DPPH của cao n-hexane Cao HE
(àg/mL)
Độ hấp thu
cao + DPPH Độ hấp thu cao % Ức chế
0 1,125 0 0
100 0,972 0,094 13,60
150 0,834 0,099 25,87
200 0,745 0,101 33,78
250 0,612 0,106 45,60
300 0,541 0,112 51,91
Hình 4.3: Đồ thị biểu diễn phần trăm ức chế theo nồng độ của cao HE.
Từ phương trình đường chuẩn y = 0,1927x – 4,3911 ta suy ra được IC50(cao HE) = 282,3 àg/mL.
4.1.4 Kết quả hoạt tính kháng oxi hóa của cao EA
Cao ethyl acetate được pha với dóy nồng độ từ 0-300 àg/mL trong DPPH nồng độ 40 àg/mL (100 àM) và được đo tại bước súng 517 nm. Từ độ hấp thu suy ra được phần trăm ức chế [Bảng 4.4]. Đường chuẩn phần trăm ức chế theo nồng độ cao tổng được thể hiện trong [Hình 4.4].
Nồng độ (àg/mL)
%ức chế
32
Bảng 4.4: Phần trăm ức chế gốc tự do DPPH của cao EA Cao EA
(àg/mL)
Độ hấp thu
cao + DPPH Độ hấp thu cao % Ức chế
0 1,118 0 0
100 0,795 0,098 37,66
150 0,758 0,157 46,24
200 0,627 0,197 61,54
250 0,527 0,199 70,67
300 0,473 0,213 76,74
Hình 4.4: Đồ thị biểu diễn phần trăm ức chế theo nồng độ của cao EA.
Từ phương trình đường chuẩn y = 0,2052x + 17,531 ta suy ra được IC50(cao EA) = 158,2 àg/mL.
4.1.5 Kết quả hoạt tính kháng oxi hóa của cao nước
Cao nước được pha với dóy nồng độ từ 0-200 àg/mL trong DPPH nồng độ 40 àg/mL (100 àM) và được đo tại bước súng 517 nm. Từ độ hấp thu suy ra được phần trăm ức chế [Bảng 4.5]. Đường chuẩn phần trăm ức chế theo nồng độ cao tổng được thể hiện trong [Hình 4.5].
Nồng độ (àg/mL)
%ức chế
33
Bảng 4.5: Phần trăm ức chế gốc tự do DPPH của cao nước Cao Nước
(àg/mL)
Độ hấp thu
cao + DPPH Độ hấp thu cao % Ức chế
0 1,095 0 0
25 0,719 0,069 40,64
50 0,689 0,075 43,93
100 0,584 0,081 54,06
150 0,461 0,095 66,58
200 0,378 0,097 74,33
Hình 4.5: Đồ thị biểu diễn phần trăm ức chế theo nồng độ của cao nước.
Từ phương trình đường chuẩn y = 0,201x + 34,803 ta suy ra được IC50(cao
nước) = 75,6 àg/mL.
4.1.6 Đánh giá chung hoạt tính kháng oxi hóa
Hoạt tính kháng oxi hóa in vitro của các cao chiết đã được đánh giá thông qua khả năng làm sạch gốc tự do DPPH. Kết quả khảo sát cho thấy:
- Hoạt tớnh khỏng oxi húa cao nhất là cao nước với IC50 = 75,6 àg/mL.
- Hoạt tính kháng oxi hóa trung bình là cao tổng và cao EA với giá trị IC50 = 162 àg/mL và 158,2 àg/mL.
- Hoạt tớnh khỏng oxi húa thấp nhất là cao HE với IC50= 282,3 àg/mL.
Nồng độ (àg/mL)
%ức chế
34
Hình 4.6: Đồ thị biểu diễn hoạt tính kháng oxi hóa DPPH của các cao chiết so với Vitamin C
Khả năng ức chế gốc tự do DPPH (IC50) của cao tổng (162àg/mL) mạnh hơn cỏc cao Hex (282,3 àg/mL) nhưng lại yếu hơn cao nước (75,6 àg/mL) và cao EA (158,2 àg/mL). Từ kết quả cũng cho thấy rằng hoạt tớnh khỏng oxi húa của các cao đều thấp hơn Vitamin C, cao nước thấp hơn Vitamin C khoảng 17 lần, cao EA và cao tổng khoảng 36 lần, cao HE khoảng 64 lần.
Khả năng kháng oxi hóa của các cao chiết được qui ra liều dùng tương đương của vitamin C. Lấy mỗi liều dùng trung bình của vitamin C là 500 mg thì để có được hoạt tính kháng oxi hóa tương đương cần dùng 8,6 g cao nước liều dùng khá phù hợp cho mỗi lần sử dụng. Trong khi đó, cao Hex thì phải cần dùng đến 32,2 g, cao tổng 18,5 g và cao EA 18 g liều dùng cao nên phi thực tế. Kết quả chi tiết được thể hiện trong [Bảng 4.7].
Bảng 4.6: Liều dùng tương đương (g) VitC của các cao chiết IC50
(àg/mL)
Liều dùng tương đương VitC (g) *
Vitamin C 4,39 0,5
Cao tổng 162 18,5
Cao HE 282,3 32,2
Cao EA 158,2 18
Cao nước 75,6 8,6
*Lấy mỗi liều dùng Vitamin C là 500 mg
IC 50 (àg/mL)
Các loại cao
35