Thể tích dịch cấy đã cấy trên mỗi đĩa, tính bằng m- 123docz.net

n1: Số đĩa ở độ pha loãng thứ hai được giữ lại d: Độ pha loãng thứ nhất được giữ lại

R1,2,3,4: tỉ lệ khẳng định dương tính trên 4 đĩa của hai độ pha loãng liên tiếp được giữ lại.

Phan.Tich.Vi.Sinh.Thuc.Pham.De.tai.Dinh.luong.Coliforms.va.E.Coli.bang.phuong.phap.dem.khuan.lacPhan.Tich.Vi.Sinh.Thuc.Pham.De.tai.Dinh.luong.Coliforms.va.E.Coli.bang.phuong.phap.dem.khuan.lacPhan.Tich.Vi.Sinh.Thuc.Pham.De.tai.Dinh.luong.Coliforms.va.E.Coli.bang.phuong.phap.dem.khuan.lacPhan.Tich.Vi.Sinh.Thuc.Pham.De.tai.Dinh.luong.Coliforms.va.E.Coli.bang.phuong.phap.dem.khuan.lac Phan.Tich.Vi.Sinh.Thuc.Pham.De.tai.Dinh.luong.Coliforms.va.E.Coli.bang.phuong.phap.dem.khuan.lacPhan.Tich.Vi.Sinh.Thuc.Pham.De.tai.Dinh.luong.Coliforms.va.E.Coli.bang.phuong.phap.dem.khuan.lacPhan.Tich.Vi.Sinh.Thuc.Pham.De.tai.Dinh.luong.Coliforms.va.E.Coli.bang.phuong.phap.dem.khuan.lacPhan.Tich.Vi.Sinh.Thuc.Pham.De.tai.Dinh.luong.Coliforms.va.E.Coli.bang.phuong.phap.dem.khuan.lac

Ví dụ: Kiểm tra định lượng Coliforms có trong 1ml sũa tươi tiệt trùng theo phương pháp Pasteur.

Quy trình phân tích

Chuẩn bị mẫu trước khi phân tích:

Dùng pipet vô trùng hút chính xác 1ml mẫu và pha loãng thành các dãy thập phân kế tiếp nhau. Cuối cùng thu được các dịch mẫu có các nồng độ thập phân như sau: 10 -1 , 10 -2 , 10 -3

Kỹ thuật pha loãng mẫu

Kỹ thuật cấy mẫu

Kết quả khuẩn lạc trên môi trường VRB:

Khuẩn lạc Coliforms đặc trưng trên môi trường VRB có màu đỏ đến đỏ đậm, có vùng tủa muối mật, đường kính ≥ 0,5 mm.

Khuẩn lạc trên đĩa cấy

Tính N = Tổng số khuẩn lạc đặc trưng trên tất cả các đĩa cấy.

Kết quả: số khuẩn lạc đếm được trên các đĩa ở mỗi nồng độ pha loãng trên môi trường VRB như sau:

Độ pha loãng

10 -1 10 -2 10 -3

Đĩa số 1 (n 1 )

21 13 7

Đĩa số 2 (n 2 )

17 10 6

Tổng 74

Kết quả khuẩn lạc trên các đĩa

Từ tổng số khuẩn lạc đếm trên 6 đĩa, chọn bất kì 5 khuẩn lạc nghi ngờ từ các đĩa (2 KL (khuẩn lạc) từ 2 đĩa của 10 -1 , 1 khuẩn lạc từ 1 đĩa của được10 -2 và 2 khuẩn lạc từ 2 đĩa của 10 -3 ), dùng que cấy vòng vô trùng cấy chuyền sang 5 ống nghiệm chứa môi trường BGBL có chứa ống Durham úp ngược. Ủ ở 37 o C ± 1 o C trong 24 - 48h.

Kết quả khẳng định là (+) khi vi khuẩn tăng trưởng làm đục môi trường và sinh hơi trong ống Durham.

Thử nghiệm khẳng định Coliforms

Thử nghiệm khẳng định Coliforms Ghi nhận số ống (+) có sinh hơi với mỗi độ pha loãng.

Cách tính kết quả:

Dựa vào số khuẩn lạc đếm được và tỉ lệ khẳng định, tính mật độ của Coliforms theo công thức sau:

A (CFU/g hay CFU/ml) = × R

Trong đó: N: tổng số khuẩn lạc đếm được.

n i : số đĩa có số khuẩn lạc được chọn tại mỗi độ pha loãng.

v: dung tích mẫu (ml) cấy vào mỗi đĩa.

f i : độ pha loãng có khuẩn lạc được chọn tại các đĩa đếm.

Thể tích dịch cấy đã cấy trên mỗi đĩa, tính bằng mililit