II. Mục tiêu, nội dung và ph−ơng pháp nghiên cứu triển kha
2.3.2. Ph−ơng pháp nghiên cứu và triển kha
1. Nghiên cứu, đánh giá tập tính sinh sống, phản ứng và mức độ nhạy cảm pheromone của các loài sâu hại đ−ợc tiến hành theo ph−ơng pháp dòng khí (Air Flow) với áp lực dòng khí l−u chuyển theo thời gian khác nhau: 5; 10; 15; ... và tới 180 phút. Mỗi đợt thí nghiệm tiến hành với số l−ợng từ 50 - 100 tr−ởng thành đực của loài sâu hại cần nghiên cứu. Sau mỗi khoảng thời gian nhất định thì tiến hành đếm và ghi chép lại số tr−ởng thành di chuyển về phía có đặt mồi pheromone. Các thí nghiệm tr−ớc hết đ−ợc tiến hành tại phòng thí nghiệm côn trùng của tr−ờng ĐH Cornell để tiếp cận và học tập ph−ơng pháp nghiên cứu theo phía bạn h−ớng dẫn. Sau đó, sẽ tự tiến hành tại phòng thí nghiệm của Viện BVTV (VIệt Nam). 2. Nhận biết, phân tích thành phần hoá học pheromone sâu hại đ−ợc tiến hành trên hệ thống máy phân tích điện lý (Electronic Antenno-Graphy - EAG) kết hợp với hệ thống phân tích sắc ký khí (Gas Chromatography). Tổng hợp pheromone sâu hại đ−ợc tiến hành theo ph−ơng pháp hoá hợp từng phần các hợp chất hữu cơ dạng vòng, kết hợp ph−ơng pháp oxy hoá khử bằng trang thiết bị và hoá chất hiện có của Phòng thí nghiệm pheromone của Tr−ờng ĐH Cornell.
3. Phát triển dạng sử dụng pheromone theo ph−ơng pháp tạo dạng mồi bẫy trên chất liệu cao su (Rubber septum) dạng quả chuông và dạng vi ống. với liều l−ợng pheromone khác nhau từ 1,0 và 2,0 microlit/giá thể tuỳ theo loài sâu hại. Mỗi đợt thí nghiệm đ−ợc tiến hành với số l−ợng từ 500 - 1000 đơn vị mồi pheromone cho mỗi loại giá thể. Thí nghiệm đ−ợc tiến hành tại Phòng thí nghiệm pheromone của Viện BVTV.
Sau đó, đánh giá khả năng hấp dẫn của sâu hại đối với mỗi loại giá thể tạo dạng đ−ợc tiến hành trực tiếp trên đồng ruộng theo ph−ơng pháp thí nghiệm của Hummell H. E. và Muitler T.A. (1984). Mỗi loại mồi pheromone của giá thể đ−ợc tiến hành theo ph−ơng pháp 50 bẫy, không nhắc lại, trên loại cây trồng mà loài sâu hại đó th−ờng phá hại. Hàng ngày đếm và ghi chép số l−ợng tr−ởng thành sâu hại vào từng bẫy vào buổi sáng kết hợp vớt bỏ chúng khỏi bẫy. Thí nghiệm tiến hành liên tục từ khi đặt mồi bẫy pheromone cho tới khi mồi pheromone không còn hiệu lực hấp dẫn tr−ởng thành sâu hại. Số liệu đ−ợc sử
7
lý so sánh theo ch−ơng trình CSTATE theo ph−ơng thức so sánh cặp giá trị trung bình số l−ợng tr−ởng thành vào bẫy hàng ngày của mỗi loại giá thể pheromone.
4. Phát triển dạng sử dụng pheromone theo ph−ơng pháp tạo dạng mồi bẫy trên chất liệu cao su (rubber septum) dạng quả chuông. Mỗi mồi đ−ợc cố định với liều l−ợng pheromone khác nhau từ 1,0 và 2,0 microlit/giá thể tuỳ theo loài sâu hại. Mỗi đợt thí nghiệm đ−ợc tiến hành với số l−ợng từ 500 - 1000 đơn vị mồi pheromone cho mỗi loại giá thể. Thí nghiệm đ−ợc tiến hành tại phòng thí nghiệm pheromone của Viện BVTV. Sau đó, đánh giá trực tiếp trên đồng ruộng theo ph−ơng pháp thí nghiệm của Hummell H. E. và Muitler T.A. (1984). Mỗi loại mồi pheromone của giá thể đ−ợc tiến hành theo ph−ơng pháp 50 bẫy, không nhắc lại, trên loại cây trồng mà loài sâu hại đó th−ờng phá hại. Hàng ngày đếm và ghi chép số l−ợng tr−ởng thành sâu hại. Thí nghiệm tiến hành liên tục từ khi đặt mồi bẫy pheromone cho tới khi mồi pheromone không còn hiệu lực hấp dẫn tr−ởng thành sâu hại.. Số liệu thu đ−ợc sử lý so sánh theo ch−ơng trình CSTATE theo ph−ơng thức so sánh cặp giá trị trung bình số l−ợng tr−ởng thành vào bẫy hàng ngày của mỗi loại giá thể.
5. Nghiên cứu sử dụng bẫy pheromone để theo dõi dự báo số l−ợng quần thể dịch hại đ−ợc tiến hành với đối t−ợng sâu hại quan trọng trên từng loại cây trồng. Lựa chọn địa điểm thí nghiệm với cây trồng đ−ợc gieo trồng cùng thời vụ trên diện tích tối thiểu từ 3 -5 ha. Mỗi đợt thí nghiệm tiến hành triển khai với số l−ợng 25 - 30 bẫy pheromone t−ơng ứng với đối t−ợng sâu hại cần nghiên cứu.
Hàng ngày theo dõi, ghi chép số l−ợng tr−ởng thành vào từng bẫy. Đồng thời, định kỳ 5 ngày/lần điều tra theo dõi và ghi chép mật độ sâu non tổng số phát sinh trên cây trồng theo ph−ơng pháp 5 điểm chéo góc không lặp lại. Từ đó, tổng hợp và đánh giá mối quan hệ giữa số l−ợng tr−ởng thành sâu hại vào bẫy và mật độ sâu non phát sinh trên đồng ruộng. 6. Xây dựng mô hình trình diễn và huấn luyện nông dân vẫn áp dụng theo ph−ơng pháp nghiên cứu triển khai vẫn th−ờng áp dụng của Viện BVTV. Mô hình thực hiện với qui mô từ 5 - 10 ha/vụ. Các bẫy Pheromone đ−ợc đặt ngay từ khi trồng rau với mật độ 100 bẫy/ha ở độ cao 30 cm so với mặt ruộng rau. Bẫy pheromone phải đặt liên tục từ đầu vụ đến cuối vụ rau. Chỉ phun thuốc khi cần thiết bằng các loại thuốc sinh học hoặc thuốc hoá học có tính chọn lọc cao với đối t−ợng cần phòng trừ.
Theo dõi mỗi loại sâu phát sinh trên ruộng, trong ruộng khu mô hình theo dõi 10 bẫy cố định phân bố rải rác trong mô hình, còn trong khu ruộng nông dân thì đặt 10 bẫy rải rác
8
để theo dõi. Hàng ngày vào các buổi sáng, đếm số l−ợng tr−ởng thành sâu hại vào bẫy rồi vớt bỏ. Đánh số thứ tự 10 bẫy theo dõi và số liệu của bẫy nào ghi riêng cho bẫy đó. Đồng thời theo dõi định kỳ 5 ngày/lần mật độ sâu non sâu hại trên 30 cây trên ruộng theo ph−ơng pháp 5 điểm chéo góc cuốn chiếu không lặp lại.
Ghi chép tỷ mỉ ngày phun thuốc, loại thuốc, chi phí BVTV và diễn biến thời tiết trong suốt thời gian từ đầu vụ đến cuối vụ rau để đánh giá hiệu quả kinh tế của việc ứng dụng pheromone trong phòng trừ tổng hợp sâu hại rau thập tự
7. Tổng hợp và sử lý số liệu: Tất cả số liệu thí nghiệm thu thập đều đ−ợc xử lý theo ch−ơng trình thống kê IRRISTAT hoặc MSTAT t−ơng ứng. Kết quả đánh giá hiệu quả hạn chế số l−ợng quần thể sâu hại của pheromone qua các thí nghiệm ngoài đồng rộng đ−ợc sử lý dựa theo công thức Henderson- Tillton.