CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4 SƠ ĐỒ BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM
Sơ đồ 2.2 Kế hoạch thí nghiệm Khảo sát nguyên liệu bột hạt bí đỏ
tách béo.
Xác định thành phần hóa học cơ bản của bột hạt bí
đỏ tách béo.
Khảo sát ảnh hưởng của ảnh hưởng của tỷ lệ nguyên liệu:
dung môi đến hiệu suất tách lipid.
Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ bột hạt bí đã tách béo: nước đến khả năng
hydate hóa.
Khảo sát ảnh hưởng của thời gian ngâm khuấy nguyên liệu trong dung
môi đến hiệu suất tách lipid.
Khảo sát ảnh hưởng của thời gian khuấy bột bí đã tách béo trong nước đến khả năng hydate hóa.
Khảo sát ảnh hưởng của pH đến khả năng trích ly dịch trích glutelin thô.
Khảo sát ảnh hưởng của số lần rửa tủa protein thu nhận glutelin
concontrate tinh sạch.
35
2.4.1. Ảnh hưởng của tỷ lệ nguyên liệu: dung môi đến hiệu suất tách lipid.
Thông số cố định: khối lượng mẫu bột hạt bí đỏ 1 g, thời gian ngâm trong dung môi 12 giờ.
Thông số khảo sát: tỷ lệ nguyên liệu: dung môi lần lượt là (1:1), (1:2), (1:3), (1:4), (1:5), (1:6), (1:7), (1:8), (1:9), (1:10), (1:11), (1:12).
Hàm mục tiêu: xác định hiệu suất tách lipid (%).
Sơ đồ 2.3 Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ nguyên liệu: dung môi
2.4.2. Ảnh hưởng của thời gian ngâm khuấy bột hạt bí đỏ trong dung môi đến hiệu suất tách lipid.
Thông số cố định:
Khối lượng mẫu 1g.
Tỷ lệ nguyên liệu: dung môi là (1: 10) thu được ở thí nghiệm 3.4.1.
Sấy 1050C / 12h
Khuấy nguyên liệu trong dung môi theo các tỉ lệ 1:1; 1:2; 1:3; 1:4; 1:5; 1:6;
1:7; 1:8; 1:9 1:10; 1:11; 1:12 1g bột hạt bí đỏ
Xác định hiệu suất tách lipid (%) Chiết rút lipid
36
Thông số khảo sát: thời gian ngâm khuấy nguyên liệu trong dung môi là 6 giờ, 12 giờ, 18 giờ, 24 giờ, 30 giờ và 36 giờ, 42 giờ.
Hàm mục tiêu: hiệu suất tách lipid (%).
Sơ đồ 2.4 Khảo sát ảnh hưởng của thời gian ngâm khuấy nguyên liệu trong dung môi.
2.4.3. Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ bột hạt bí đã tách béo: nước đến khả năng hydate hóa.
Thông số cố định: bột bí đó đã tách béo 1 g.
Thông số khảo sát: tỷ lệ bột bí đã tách béo: nước ngâm lần lượt là (1:1), (1:2), (1:3), (1:4), (1:5), (1:6), (1:7), (1:8), (1:9), (1:10), (1:11), (1:12).
Hàm mục tiờu: xỏc đinh lượng protein hũa tan (àg/g) Chiết rút lipid
Sấy 1050C / 12h
Xác đinh hiệu suất tách lipid (%)
1g bột hạt bí đỏ
Khuấy nguyên liệu trong dung môi với tỷ lệ 1:10
trong các thời gian 6 giờ, 12 giờ, 18 giờ, 24 giờ, 30 giờ, 36 giờ, 42 giờ
37
Sơ đồ 2.5 Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ bột hạt bí đã tách béo: nước đến khả năng hydate hóa.
2.4.4. Khảo sát ảnh hưởng của thời gian khuấy bột bí đã tách béo trong nước đến khả năng hydate hóa.
Thông số cố định: bột bí đó đã tách béo 1g, tỷ lệ 1nguyên liệu: 10 nước sử dụng kết quả thu được ở thí nghiệm 2.4.3.
Thông số khảo sát: thời gian ngâm nước là 10 phút, 20 phút, 30 phút, 40 phút, 50 phút, 60 phút.
Hàm mục tiờu: xỏc đinh lượng protein hũa tan (àg/g) Xác định lượng protein hòa
tan
1g bột hạt bí đỏ đã tách béo
Khuấy
bột hạt bí đã tách béo : nước với các tỉ lệ : 1:1; 1:2;
1:3; 1:4; 1:5; 1:6; 1:7; 1:8; 1:9; 1:10; 1:11; 1:12
38
Sơ đồ 2.6 Khảo sát ảnh hưởng của thời gian khuấy bột bí đã tách béo trong nước đến khả năng hydate hóa.
2.4.5. Khảo sát ảnh hưởng của pH đến khả năng trích ly dịch trích glutelin thô.
- Thông số cố định: bột bí đó đã tách béo 1g, tỷ lệ 1nguyên liệu: 10 nước ngâm và thời gian ngâm 30 phút sử dụng kết quả ở thí nghiệm 2.4.3 và 2.4.4.
- Thông số khảo sát: pH thay đổi lần lượt là 7, 8, 9, 10, 11 và 12.
- Hàm mục tiờu: xỏc định lượng protein hũa tan (àg/g).
1g bột hạt bí đỏ đã tách béo
Khuấy bột hạt bí đã tách béo: nước với tỉ lệ 1:10 trong các thời gian 10 phút, 20 phút, 30 phút, 40 phút, 50 phút, 60 phút
Xác định lượng protein hòa tan
39
Sơ đồ 2.7 Khảo sát ảnh hưởng của pH đến khả năng trích ly dịch trích glutelin thô Khuấy 1bột hạt bí tách béo: 10 nước thời
gian 30 phút
Chỉnh pH từ 7, 8, 9,10,11 đến 12
Trích ly máy lắc 150vòng/phút 300C
Ly tâm 5000vòng/phút 200C 30 phút
Xác định khối lượng protein
Bã ã NaOH
2N
40
2.4.6. Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ dịch trích thô: thể tích HCl 2M đến khả năng tạo tủa protein
Sơ đồ 2.8 Khảo sát ảnh hưởng của Vdịch trích thô: VHCl 2M đến khả năng tạo tủa protein.
Dịch trích glutelin thô
Vdịch trích: VHCl 2M từ (1:0,1); (1:0,5); (1:1);
(1:1,5); (1:2)
Ly tâm 5000vòng/phút trong 30 phút
Xác định khối lượng tủa protein
41
2.4.7. Khảo sát ảnh hưởng của số lần rửa tủa protein thu nhận glutelin concontrate tinh sạch.
pp
Dịch trích glutelin thô
Lọc Điều chỉnh về pI HCL 2M
Cặn
Rửa tủa lần 1
NaOH 2N
Ly tâm lần 1
Ly tâm lần 2 Rửa tủa lần 2
Ly tâm lần 3
Hòa tan, chỉnh về pH7
Sấy thăng hoa
Chế phẩm glutelin concentra
Dịch lỏng Nước
Dịch lỏng
Dịch lỏng
42