CHƯƠNG II: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2. NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG HỖN HỢP
3.2.3. Áp dụng thực tế phân tích một số hỗn hợp thuốc trên thị trường
Áp dụng qui trình phân tích đã xây dựng trong mục 2.3 chúng tôi tiến hành định lượng atorvastatin, fenofibrat trong một số mẫu thuốc.
Phân tích hàm lượng atorvastatin trong các mẫu thuốc
Tiến hành định lượng atorvastatin trong thuốc Avastor 10mg viên nén sản xuất tại trong công ty cổ phần dược phẩm Boston Việt Nam theo quy trình 3.3.3.
Cân 10 viên thuốc atorvastatin, xác định khối lượng trung bình của từng viên, đem nghiền bằng cối mã não, trộn đều. Cân chính xác một lượng mẫu thuốc, thêm 15ml metanol vào cốc 50ml, rung siêu âm 45 phút cho thuốc tan hết.Chuyển dung dịch vào bình định mức 25,0ml, định mức tới vạch bằng nước cất 2 lần, ta được dung dịch A.
Luận văn thạc sĩ Khoa học
53
Lấy 2,5ml dung dịch A chuyển vào bình định mức 25,0ml, định mức bằng nước cất đến vạch ta được dung dịch B, dung dịch này có nồng độ tương ứng khoảng 10-5M. Dùng pipet lấy 0,5ml vào bình định mức 25,0ml, thêm 10ml dung dịch đệm BR tại pH = 6,5 rồi định mức bằng nước cất đến vạch. Lắc kỹ rồi chuyển vào bình điện phân và tiến hành đo trong các điều kiện đã chọn. Hàm lượng atorvastatin được xác định bằng phương pháp thêm chuẩn.
Bảng 3.16. Cường độ dòng píc khi đo mẫu thuốc Avastor bằng phương pháp thêm chuẩn
STT 1 2 3
Nồng độ Atorvastatin trong mẫu thuốc Cx Cx Cx
Thể tích dung dịch chuẩn hỗn hợp10-5M
thêm vào (ml) 0 0,5 0,5
Nồng độ Atorvastatin trong bình(M)
Cx Cx+2.10-7 Cx+4.10-7
Cường độ píc I(nA) 8,90 15,0 26,0
-900m -1.00 -1.10 -1.20 -1.30 -1.40
U (V) -25.0n
-20.0n -15.0n -10.0n -5.00n 0
I (A)
Hình 3.37. Đường von-ampe hòa tan khi đo mẫu (10mg) của công ty dược phẩm SHYT bằng phương pháp thêm chuẩn
Bằng phương pháp thêm chuẩn, tính toán được nồng độ của atorvastatin trong dung dịch đo Cx = 2,7.10-7(M).
1
2
3
Luận văn thạc sĩ Khoa học
54 Áp dụng công thức trong mục 2.3.1.
Hàm lượng atorvastatin trong 1 viên thuốc có khối lượng 0,1574 g là:
So với hàm lượng Atorvastatin (10 mg) ghi trên nhãn thuốc thì bằng phương pháp Von-ampe hòa tan hấp phụ xác định được 13,54 mg cao hơn 3,54 mg.
Bảng 3.17. Kết quả định lượng atovastatin trong viên nén (10mg) sản xuất tại Công ty Cổ phần Dược phẩm SHYT.
Mẫu Iator(nA) Nồng độ Hàm lượng
ator (mg/viên) Hàm lượng
(%) Số liệu thống kê
M1 8,9 2,7.10-7 13,54 135 X=11,63, SD=2,15
RSD=0,18%
m=11,63±0,05 (mức tin cậy 95%)
M2 8,62 2,36. 10-7 11,84 118
M3 8,1 1,9. 10-7 9,53 95
Hàm lượng atorvastatin trong viên thuốc xác định được là 11,63 mg Áp dụng thực tế phân tích hàm lượng fenofibrat trong các mẫu thuốc
Tiến hành định lượng fenofibrat trong thuốc Lipistad 300 mg viên nên sản xuất tại trong công ty cổ phần Dược phẩm Stada Việt Nam.Tiến hành cân đo mẫu theo quy trình phân tích đã xây dựng trong mục 2.3.1.
Tương tự, cân 10 viên thuốc fenofibrat, xác định khối lượng trung bình của từng viên, đem nghiền bằng cối mã não, trộn đều. Cân chính xác mẫu thuốc đã nghiền mịn, thêm 15ml metanol vào cốc 50ml, rung siêu âm 45 phút cho thuốc tan hết.Chuyển dung dịch vào bình định mức 25,0ml, định mức tới vạch bằng nước cất 2 lần, ta được dung dịch F.
Lấy 0,25ml dung dich F chuyển vào bình định mức 25,0ml, định mức bằng nước cất đến vạch ta được dung dịch hỗn hợp B, dung dịch này có nồng độ tương ứng khoảng 10-5M. Dùng pipet lấy 0,5ml vào bình định mức 25,0ml, thêm 10ml dung dịch đệm BR tại pH = 6,5 rồi định mức bằng nước cất đến vạch. Lắc kỹ rồi chuyển vào bình điện phân và tiến hành đo trong các điều kiện đã chọn. Hàm lượng atovastatin và fenofibrat được xác định bằng phương pháp thêm chuẩn.
Luận văn thạc sĩ Khoa học
55
Kết quả được trình bày bằng bảng 3.18 như sau :
Bảng 3.18. Cường độ dòng píc khi đo mẫu thuốc bằng phương pháp thêm chuẩn
STT 1 2 3
Nồng độ fenofibrat trong mẫu thuốc Cx C Cx
Thể tích dung dịch chuẩn hỗn hợp
10-5M thêm vào(ml) 0 1,0 1,0
Nồng độ hỗn hợp trong bình(M) Cx Cx+4.10-7 Cx+8.10-7
Cường độ píc I(nA) 5,02 8,5 9,8
-900m -1.00 -1.10 -1.20 -1.30 -1.40
U (V) -10.0n
-8.00n -6.00n -4.00n -2.00n 0
I (A)
Hình 3.38. Đường von-ampe hòa tan của thuốc Lipistad 300mg
Bằng phương pháp thêm chuẩn, tính được nồng độ fenofibrat trong dung dịch đo : Cx = 48,59. 10-8(M)
Áp dụng công thức trong mục 2.3.3.
1
2
3
Luận văn thạc sĩ Khoa học
56
Hàm lượng fenofibrat rong 1 viên thuốc có khối lượng 0,3969 g là :
So với hàm lượng fenofibrat (300 mg) ghi trên nhãn thuốc thì bằng phương pháp Von-ampe hòa tan hấp phụ xác định được 281 mg thấp hơn 19 mg.
Tương tự, tiến hành xác định hàm lượng fenofibrat trong các mẫu thuốc sau Kết quả được trình bày trong bảng 3.19.
Bảng 3.19. Kết quả định lượng fenofibrat trong viên nang (300mg) sản xuất tại Công ty Cổ phần Dược phấm Standa
Mẫu Ifeno(nA) Nồng độ Hàm lượng
feno (mg/viên) Hàm lượng
(%) Số liệu thống kê
M3 5,02 48,59. 10-8 281 94 X=300
SD=38,0 RSD=0,12%
m=300±0,05 (mức tin cậy 95%)
M1 5,60 55,07.10-8 319 106
M2 5,10 34,50.10-8 215 107
Phân tích đồng thời hàm lượng atovastatin và fenofibrat trong mẫu thuốc.
Tiến hành định lượng hỗn hợp thuốc atorvastatin 10 mg và fenofibrat 300mg. Tiến hành cân đo mẫu theo quy trình phân tích đã xây dựng trong mục 2.3.3. Kết quả đo được trình bày bằng bảng 3.20 như sau:
Bảng 3.20. Cường độ dòng píc khi đo hỗn hợp mẫu thuốc atorvastatin và fenofibrat bằng phương pháp thêm chuẩn
STT 1 2
Nồng độ hỗn hợp ato và feno trong
mẫu thuốc Cx Cx
Thể tích dung dịch chuẩn10-5M thêm
vào(ml) 0 0,50
Nồng độ hỗn hợp ato và feno trong
bình (M) Cx Cx+2.10-7
Cường độ píc I(nA) Ato Feno Ato Feno
8,14 6,9 15,21 11,43
Luận văn thạc sĩ Khoa học
57
-900m -1.00 -1.10 -1.20 -1.30 -1.40
U (V) -15.0n
-10.0n -5.00n 0
I (A)
Hình 3.39: Đường von-ampe hòa tan của hỗn hợp Atovastatin 10mg và Fenofibrat 300mg (đường 1) mẫu; đường 2) thêm chuẩn)
Dựa vào kết quả đo cường độ dòng khi có thêm chuẩn hỗn hợp xác định nồng độ fenofibrat trong mẫu là:3,4.10-7 M
Hàm lượng fenofibrat trong 1 viên thuốc có khối lượng 0,3969 g là
Nồng độ atovastatin trong mẫu là: 2,3.10-7
Hàm lượng Atovastatintrong 1 viên thuốc có khối lượng 0,1574 g là:
2 1
Luận văn thạc sĩ Khoa học
58
Tương tự, tiến hành xác định hàm atovastatin và fenofibrat trong các mẫu thuốc sau. Kết quả thu được trong bảng.
Bảng 3.21. Kết quả định lượng fenofibrat 300 mg và atorvastatin 10 mg trong các mẫu thuốc.
Mẫu I(nA) Nồng độ feno
Nồng độ ato
Hàm lượng feno (mg/viên)
Hàm lượng ato (mg/viên)
Sự sai khác so với hàm lượng ghi trên nhãn của fenofibrat
(%)
Sự sai khác so với hàm lượng ghi trên nhãn của atovastatin
(%) feno ator
M1 6,9 8,14 3,4.10-7 2,3.10-7 315 11,54 +5 15,4
M2 5,3 5,86 3,02.10-7 1,97.10-7 190 9,88 -5 -1,2
M3 8,02 8,96 2,97.10-7 2,18.10-7 275 10,94 -8,3 9,4
M4 5,9 8,9 2,14.10-7 2,3910-7 324 11,96 +8 19,6
M5 3.84 8,2 2,0.10-7 1,9.10-7 201 9,53 +0,5 -4,7
Các kết quả phân tích đều có RSD nhỏ (<2%), đáp ứng yêu cầu của phương pháp phân tích. Các kết quả phân tích cũng cho thấy hàm lượng atorvastatin trong các viên thuốc từ 95,30 đến 119,60% so với ghi trên nhãn và hàm lượng fenofibrat từ 91,66 đến 108,00% so với ghi trên nhãn, đối chiếu với tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam [1] thấy thuốc của các công ty trên đều đạt tiêu chuẩn 90 đến 110% so với ghi trên nhãn và cũng cho thấy sự sai lệch giữa các kết quả phân tích trong giới hạn cho phép sự sai khác chỉ là ngẫu nhiên.
Như vậy, với quy trình phân tích hỗn hợp atorvastatin và fenofibrat nghiên cứu được chúng ta có thể áp dụng để phân tích đồng thời hoặc riêng từng thuốc. Luận văn thạc sĩ Khoa học