1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Hình 2.3. Sơ ựồ khảo sát thời gian nấu chiết.
Nấu chiết trong nước thường, tỉ lệ dung dịch w/v=1/10, nhiệt ựộ chiết 70 Cồ (Xác ựịnh thời gian (giờ))
Rong nâu chọn, rửa, ngâm bằng nước ngọt.
Ngâm EtOH tỉ lệ dung dịch v/w=1/1, thời gian ngâm 24 giờ, ngâm nhiệt ựộ thường.
Tiếp tục thực hiện theo sơ ựồ chiết
Polymannuronic
Xác ựịnh khối lượng sản phẩm, sản phẩm ựem phân tắch chứa x% mannuronic axắt.
Cách tiến hành:
Cân 1kg rong nâu khơ, ngâm và rửa sạch trong nước ngọt 1,5-2 giờ ựể ráo, Ngâm rong trong EtOH tỉ lệ dung dịch w/v=1/1, ngâm trong thời gian 24 giờ, nhiệt ựộ bình thường, sao cho lượng rong luơn ngập trong dung dịch. Rong sau khi ngâm xong ựể ráo và cắt nhỏ ựể nấu chiết. Rong ựược nấu chiết trong nước thường, lượng nước nấu gấp 10-12 lần lượng rong khơ, nấu tại nhiệt ựộ 70 Cồ, thời gian nấu tại các mốc thời gian theo sơ ựồ thực nghiệm. Thực hiện tiếp tục chiết theo sơ ựồ chiết thu sản phẩm. Xác ựịnh khối lượng sản phẩm, phân tắch thành phần mannuronic trong sản phẩm. Chọn thời gian chiết thắch hợp.
2.2.1.3. Khảo sát nồng ựộ axắt acetic ựể tách mannuronan ra khỏi dịch chiết nước ban ựầu:
20 30 40 50 60
Hình 2.4: Sơ ựồ khảo sát nồng ựộ axắt acetic ựể tách mannuronan.
Dịch chiết ựược lọc tinh và cơ cịn 1/10 thể tắch ban ựầu bằng máy siêu lọc kắch thước màng lọc 30 kDa , tốc ựộ bơm nhu
ựộng 100 v/ph
Kết tủa polymannuronic bằng acid acetic (Xác ựịnh nồng ựộ acid acetic % (v/v) ựể kết tủa
polymannuronic)
Polymannuronic
Xác ựịnh khối lượng sản phẩm, sản phẩm ựem phân tắch chứa x% mannuronic axắt.
Chọn nồng ựộ acid acetic ựể kết tủa polymannuronic chiết tối ưu
Ly tâm thu kết tủa, tốc ựộ 2600v/ ph, thời gian 1giờ
Trung hịa kết tủa bằng dung dịch NaOH 0,1M.
Ly tâm thu dịch lọc
Kết tủa polymannuronic và rửa bằng EtOH, 80% ọ96%(v/v). (Xác ựịnh nồng ựộ EtOH ựể tách mannuronan ra khỏi dung dịch)
Cách tiến hành: