-Lame và Lamelle tự tách rời ra, mẫu dính vào lame hoặc lamelle VI. Khử nước Khử nước Cồn 100 Cồn 200 Cồn 300 Cồn 400 Cồn 500 Cồn 600 Cồn 700 Cồn 800 Cồn 900 Cồn tuyệt đối 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 3giờ 20 phút Thấy được hình dạng NST, những mẫu vật chưa trong
VII Làm trong Làm trong
vật mẫu
Làm trong
mẫu Xilen I Xilen II Xilen III Xilentuyệt đối 5 phút 5 phút 5 phút 5 phút 20 phút
Mẫu rõ, trong. Khơng cịn nước
VIII
Dán mẫu Dám mẫu Baume canada 3 ngày mẫu khơ 3 ngày Mẫu nhìn rõ các giai đoạn phân bào, khơng bọt khí -Nhuộm Carmin acêtic:
3 ngày 6 giờ 30 phút 30 giây. giây.
-Nhuộm Hematocyline phèn sắt: 3 ngày 10 giờ 30 phút 30 giây
Bảng tĩm tắt qui trình thực hiện tiêu bản cố định về sự giảm phân ở Tế bào của cờ bắp non (zea mays).
Thời gian Các bước Thực hiện Hĩa chất sử dụng
Từng bước Tổng Cộng Kết quả I Cố định -Cố định -Rửa -Dung dịch carnoy -Nước cất 24 giờ 5 phút 24giờ 5 phút
Mẫu được cố định, giữ cho cấu trúc của nĩ như trạng thái sống và khơng bị tiếp tục phân hủy.
-Carmin- acêtic
10 phút
10 phút
Tế bào chất màu nhạt, nhân cĩ màu đỏ thẩm. II Giầm mẫu và nhuộm mẫu -Nhỏ thuốc nhuộm -Giầm mẫu Hematocyline
-phèn sắt 10 phút 10 phút Tế bào chất màu hạt nhân cĩ màu xanh đen
III. Khử nước Khử nước Khử nước Cồn 100 Cồn 200 Cồn 300 Cồn 400 Cồn 500 Cồn 600 Cồn 700 Cồn 800 Cồn 900 Cồn tuyệt đối 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 20 phút 3giờ 20 phút
Thấy được các giai đoạn của sự phân bào, nhưng mẫu vật chưa trong
IV Làm trong Làm trong
mẫu vật
Làm trong
mẫu Xilen I Xilen II Xilen III Xilentuyệt đối 5 phút 5 phút 5 phút 5 phút 20 phút
Mẫu rõ, trong. Khơng cịn nước
V
Dán mẫu Dán mẫu Baume canada 3 ngày mẫu khơ 3 ngày Mẫu nhìn rõ các giai đoạn phân bào, khơng bọt khí -Nhuộm Carmin acêtic
và nhuộm bằng Hematocyline phèn sắt: thời gian bằng nhau: 4 ngày 4 giờ 05 phút
KẾT LUẬN.
Quá trình thực hiện tiêu bản hiển vi về sự sinh sản ở tế bào thực vật, chúng tơi thực hiện 2 loại:
Loại tiêu bản tạm thời:
-Qui trình thực hiện tiêu bản tạm thời để hướng dẫn sinh viên thao tác thực hành trong giờ học tại phịng thí nghiệm, qua đĩ quan sát được các giai đoạn phân bào nguyên phân và giảm phân ở tế bào thực vật. Tiêu bản tạm thời chỉ giữ được mẫu vật trong thời gian ngắn.
Loại tiêu bản cố định:
-Chúng tơi thực hiện được 100 tiêu bản cố định về sự sinh sản của tế bào thực vật – tiêu bản thấy được từng giai đoạn của quá trình phân bào – để phục vụ lâu dài trong nghiên cứu và giảng dạy.
Khi thực hiện tiêu bản chúng tơi nhận thấy:
1. Chuẩn bị mẫu vật:
-Để cĩ đủ các giai đoạn trong quá trình phân bào, phải lấy mẫu lúc 9 giờ đến 10 giờ sáng, vì đây là thời gian tế bào đang sinh sản mạnh.
-Trên tiêu bản về quá trình nguyên phân cĩ đủ các giai đoạn của quá trình phân bào. Trên tiêu bản về quá trình giảm phân chỉ thấy được một vài giai đoạn của quá trình phân bào, để cĩ đầy đủ các giai đoạn phải quan sát trên nhiều tiêu bản.
-Khi thực hiện tiêu bản giảm phân, sau khi chọn cờ bắp đúng qui định, ta phải lưu ý đến sự trưởng thành của bao phấn theo những vị trí khác nhau của hoa trên cờ bắp, cĩ như the,á ta mới cĩ đủ các giai đoạn phân bào.
2. Nhuộm mẫu:
Thời gian nhuộm mẫu cĩ khác nhau tùy loại thuốc nhuộm và tùy loại tế bào: -Mơ phân sinh rễ hành: Nhuộm Carmin – acêtíc, thời gian 15 phút. Nhuộm hematocyline, thời gian 4 giờ thuốc mới thấm đều tồn bộ mẫu vật.
-Bao phấn của hoa bắp: Nhuộm Carmin – acêtic và nhuộm Hematocyline từ 5 đến 10 phút sau khi nhuộm mẫu mới ăn màu rõ.
3.Khử nước:
Thời gian khử nước qua mỗi lọ cồn 20 phút là thích hợp, vì khi chuyển sang làm trong mẫu khơng cịn thấy nước và mẫu khơng bị mờ. Nếu thời gian khử nước lâu hơn, thuốc nhuộm sẽ bị nhạt màu; thời gian khử nước sớm hơn, tế bào bị co lại.
4.Làm trong mẫu:
Trong quá trình khử nước cũng như làm trong mẫu, khơng nên để mẫu bị khơ, vì để khơ mẫu mẫu sẽ bị đen. Phải dán mẫu ngay khi mẫu đã trong.
Đề nghị:
Khi thực hiện đề tài này, ngồi việc chuẩn bị hĩa chất và mẫu vật, kính hiển vi là một cơng cụ khơng thể thiếu được.
Hiện tại kính hiển vi của phịng thí nghiệm chỉ quan sát được ở vật kính 10 và 20. Để thấy rõ các giai đoạn sinh sản của tế bào thực vật, cần quan sát ở số bội giác 40.
Vì vậy chúng tơi đề nghị nhà trường cho sửa chữa,và lau chùi lại hệ thống kính hiển vi phục vụ cho yêu cầu:
-Nghiệm thu kết quả của đề tài.
PHÂN BAØO NGUYÊN NHIỄM(MITOSIS).
A. Prophase = Kỳ đầu.
Hình 1a: nhiễm sắc chất cĩ dạng chấm nhuyễn, mịn, đều.
Hình 1b: nhiễm sắc chất cĩ dạng dấu phẩy hoặc sợi dài, tương ứng nhiễm sắc thể.
B. Metaphase = kỳ giữa.
Hình 2: các nhiễm sắc thể nằm ơ ûmặt phẳng xích đạo của thoi vơ sắc. C. Anaphase kỳ sau.
Hình 3a: nhiễm sắc thể tách đơi hồn tồn. Hình 3b: Mỗi nữa đi về mỗi cực của tế bào.
Hình 3c: tại mỗi cực của tế bào cĩ đúng số nhiễm sắc thể mà tế bào cĩ. D. Telophase = Kỳ cuối.
Hình 4: Màng nhân hình thành – xuất hiện vách ngăn chia tế bào mẹ thành 2 tế bào con.
PHÂN BAØO GIẢM NHIỄM (MEIOSIS).